Protein G琼脂糖凝胶大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括Protein G琼脂糖凝胶大量库存促销在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：Protein G琼脂糖凝胶大量库存促销
品牌：百奥莱博
英文名：Protein G-Sepharose
编号：WE0270
规格：5ml
  本产品为Protein G与Sepharose偶联后产物，可从血清，腹水，细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。Protein G是链球菌(group C和G)细胞表面蛋白。它不Protein A类似，通过不免疫球蛋白的Fc区相互作用，可结合大多数哺乳动物的IgG。但两者结合特异性有所丌同。Protein G对人IgG3，小鼠IgG1，大鼠IgG2a等具有高亲和力。天然Protein G具有白蛋白和细胞表面结合域。重组Protein G去除了白蛋白和细胞表面结合域，以减少非特异性结合。本产品具有广谱 IgG结合、高Fc段结合活性、高抗体吸附量和性能稳定等特点，可重复多次使用。

注意事项：
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱，避免产生气泡影响柱效。
2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1，长径比过大将导致洗脱峰拖尾，洗脱体积增大；长径比过小将导致样品与填料接触时间短，吸附不充分，填料吸附蛋白量小。
3、若上样液中抗体浓度过高，应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml，以免上样浓度过高影响柱效。
4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短，洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性，以延长亲和介质的使用寿命。
6、洗脱后，应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右)，以利于维持抗体的生物活性，避免抗体失活。
7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸*缓冲液(pH3.0)做再生处理，长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。

使用方法：

I 缓冲液的准备
1、平衡缓冲液：20 mM PBS，150 mM NaCl，pH7.4-8.5。
2、洗脱缓冲液：0.1 M Glycine，pH2.5-3.0。
3、再生缓冲液：1 M NaCl。
4、中和缓冲液：1 M Tris-Cl，pH9.0。
注意：
1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。

II 样本制备
1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰，去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
注意：样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。

III 操作步骤
1、将Protein G-Sepharose填料混匀后加入层析柱，室温静置10分钟，待凝胶与溶液分层后，把底部的出液口打开，让乙醇通过重力作用缓慢流出。
2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净，用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
3、将样品上柱，上样流速60 cm/h。
4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积，直至基线平稳。
5、洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰，用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2～8℃保存。
注意：操作中如果没有实时的蛋白监测系统，收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中，最后根据测定结果重新调整收集方式。
8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积，再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积，再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2～8℃保存。

储存条件：2～8℃，避免冷冻

我公司的Protein G琼脂糖凝胶大量库存促销，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒
编号：WE0209
英文名称：Magbead Swab DNA Extraction Kit
规格：96次
  本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的口腔拭子DNA提取方法，适用于从干燥保存或在保护液中保存的口腔拭子中提取基因组DNA。在高盐存在时，DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后，高纯度的DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。纯化得到的DNA纯度好(A260/280的比值在1.7-1.9之间)，完整度高(>15 kb)，可用于二代测序、定量PCR、芯片检测等下游实验。

试剂盒组成：

 

组份	96次
Buffer WL	36ml
Buffer ML	36ml
Buffer GW1(浓缩液)	80ml
Buffer GW2(浓缩液)	50ml
Buffer EB	30ml
蛋白酶K	2×25mg
蛋白酶K 储存液	2×1.25ml
Magbeads PN	1ml

自备仪器及试剂：

1、手动单管操提取：
1)恒温混匀仪
2)2/15ml磁力架
3)异丙醇、无水乙醇

2、手动96孔深孔板提取：
1)恒温混匀仪
2)废液抽吸系统
3)手动连续分液器
4)电动连续分液器
5)手动连续分液器分液管
6)96孔深孔板磁力架
7)异丙醇、无水乙醇

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配置好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻和离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
3、Magbeads使用前需涡旋震荡20秒使其充分混匀。
4、首次使用前应按试剂瓶标签在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇并做好标记。
5、实验过程中，磁珠在溶液中的充分混匀对于提取的得率与纯度都有很大的影响。实验过程中务必使磁珠与溶液充分混匀。不同厂家生产的恒温混匀仪震荡混匀效果有一定差异，实验过程中请注意观察磁珠状态。如出现磁珠贴壁等未充分混匀的现象，请用移液器吹吸混匀或调整震荡频率

操作步骤：

I、手动单管操作：

方案一(用于从干燥保存的口腔拭子中提取基因组DNA)：
1、将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下，置于2.0ml的离心管中。
2、向离心管中加入20μl 蛋白酶K 和300μl Buffer WL，之后将离心管放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡裂解30分钟。
注意：如无恒温混匀仪，将离心管我选振荡10秒后放于56℃水浴锅中孵育30分钟，期间每隔5分钟涡旋振荡10秒钟。
3、将离心管从恒温混合仪上取下，短暂离心后加入300μl Buffer ML。之后将离心管放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡裂解10分钟。
注意：如无恒温混匀仪，将离心管我选振荡10秒后放于56℃水浴锅中孵育30分钟，期间每隔5分钟涡旋振荡10秒钟。
4、将步骤3中的离心管短暂离心后室温放置5分钟，之后将裂解产物转移至1.5ml的离心管中。向离心管中加入200μl异丙醇和10μl充分混匀的Magbeads，涡旋震荡5秒钟后将离心管放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀5分钟或将离心管连续颠倒混匀10分钟。
5、将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
6、将离心管从磁力架上取下，加入750μl Buffer GW1(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
7、重复步骤6。
8、将离心管从磁力架上取下，加入750μl Buffer GW2(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
9、重复步骤8。
10、保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置5-10分钟，使乙醇挥发干净。
注意：如果离心管侧壁上有液珠，可向离心管中加入750μl无水乙醇，盖盖后颠倒离心管(保持离心管固定于磁力架上)，之后彻底弃去无水乙醇。
11、将离心管从磁力架上取下，加入30-100μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠完全悬浮于洗脱液中后将其放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟，或将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟，期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
12、将离心管放于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

方案二(用于从在保护液中保存的口腔拭子中提取基因组DNA)：
1、将口腔拭子的棉签从杆上剪下，置于2.0ml的离心管中。
2、向离心管中加入20μl 蛋白酶K 、300μl保存该拭子的保护液和200μl Buffer ML，之后将离心管放于56℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡裂解30分钟。
注意：如无恒温混匀仪，将离心管我选振荡10秒后放于56℃水浴锅中孵育30分钟，期间每隔5分钟涡旋振荡10秒钟。
3、将离心管从从恒温混合仪上取下，室温放置5分钟。短暂离心后，将裂解产物转移至1.5ml的离心管中。
4、向离心管中加入300μl异丙醇和10μl充分混匀的Magbeads，涡旋震荡5秒钟后将离心管放于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀5分钟或将离心管连续颠倒混匀10分钟。
5、将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后充分弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
6、将离心管从磁力架上取下，加入750μl Buffer GW1(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
7、重复步骤6。
8、将离心管从磁力架上取下，加入750μl Buffer GW2(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
9、重复步骤8。
10、保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置5-10分钟，使乙醇挥发干净。
注意：如果离心管侧壁上有液珠，可向离心管中加入750μl无水乙醇，盖盖后颠倒离心管(保持离心管固定于磁力架上)，之后彻底弃去无水乙醇。
11、将离心管从磁力架上取下，加入30-100μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠完全悬浮于洗脱液中后将其放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟，或将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟，期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
12、将离心管放于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

II、手动96孔板操作：

方案三(用于在96孔深孔板中从干燥保存的口腔拭子中提取基因组DNA)：
1、将口腔拭子棉签剪下放入96孔深孔板(简称“深孔板”)中并记录每个孔中样品名称。
2、向加入口腔拭子的深孔板中用电动连续分液器或8通道移液器加入20μl 蛋白酶K 和 300μl Buffer WL，之后将深孔板放于100℃(该恒温混匀仪为悬空加热，裂解液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡孵育30分钟。
3、将深孔板从恒温混匀仪上取下，加入300μl Buffer ML。之后，将深孔板放于100℃(该恒温混匀仪为悬空加热，裂解液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡孵育10分钟。
4、将深孔板从恒温混合仪上取下，把裂解产物按照顺序转移至新的深孔板中。
5、向新的深孔板中加入210μl充分混匀的异丙醇(200μl)与Magbeads(10μl)混合物。之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀5分钟。
6、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
注意：用废液抽吸系统去除溶液时，需将真空泵调节至较小的负压值，使溶液以一个合适的速度被吸走，速度过快容易造成磁珠的流失。
7、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前检查是否已加入无水乙醇)，之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟。
8、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
9、重复步骤7-8。
10、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前检查是否已加入无水乙醇)，之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀3分钟。
11、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
12、重复步骤10-11。
13、用手动连续分液器向96孔深孔板中加入500μl无水乙醇，之后将深孔板固定于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀1分钟。
14、将板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
15、保持深孔板固定于96孔板磁力架上，将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置2分钟。之后将深孔板从96孔板磁力架上取下放于100℃、1600 rpm的恒温混匀仪上静置5分钟。
16、用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板加入50-100μl Buffer EB，之后将深孔板放于100℃(因该恒温混匀仪为悬空加热，洗脱液实际温度在50-60℃之间)、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀10分钟。
17、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟，用8通道移液器溶液转移至96孔PCR板中盖盖后-20℃保存备用。

方案四(用于在96孔深孔板中从在保护液中保存的口腔拭子中提取基因组DNA)
1、将口腔拭子棉签剪下放入96孔深孔板(简称“深孔板”)中并记录每个孔中样品名称。
2、向加入口腔拭子的深孔板中用电动连续分液器或8通道移液器加入20μl 蛋白酶K 、300μl保护该拭子的保护液和200μl Buffer ML，之后将深孔板放于100℃(该恒温混匀仪为悬空加热，裂解液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡孵育30分钟
3、将深孔板从恒温混匀仪上取下，把裂解产物按照顺序转移至新的深孔板中。
4、向新的深孔板中加入310μl充分混匀的异丙醇(300μl)与Magbeads(10μl)混合物。之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀5分钟。
5、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
注意：用废液抽吸系统去除溶液时，需将真空泵调节至较小的负压值，使溶液以一个合适的速度被吸走，速度过快容易造成磁珠的流失。
6、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前检查是否已加入无水乙醇)，之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟。
7、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
8、重复步骤6-7。
9、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前检查是否已加入无水乙醇)，之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀3分钟。
10、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
12、用手动连续分液器向96孔深孔板中加入500μl无水乙醇，之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀1分钟。
13、将板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液，期间避免枪头接触磁珠。
14、保持深孔板固定于96孔板磁力架上，将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置2分钟。之后将深孔板从96孔板磁力架上取下放于100℃、1600 rpm的恒温混匀仪上静置5分钟。
15、用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板加入50-100μl Buffer EB，之后将深孔板放于100℃(因该恒温混匀仪为悬空加热，洗脱液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀10分钟。
16、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟，用8通道移液器溶液转移至96孔PCR板中盖盖后-20℃保存备用。

储存条件：室温(15～30℃)


Protein G琼脂糖凝胶大量库存促销关键词：Protein G-Sepharose ,WE0270,Protein G琼脂糖凝胶


·抗GAPDH多克隆抗体
编号：WE0357
英文名称：Anti GAPDH Rabbit Polyclonal Antibody
规格：100μl
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱*酶)是参与糖酵解的一种关键酶，由4个36kDa的亚基组成。除参与糖酵解外，有证据表明哺乳动物细胞中的GAPDH参与了多种胞内生化过程，包括膜融合(membrane fusion)、微管成束(microtubule bundling)、磷酸转移酶(phosphotransferase)激活、核内RNA出核、DNA复制与DNA修复等。GAPDH蛋白几乎在所有组织中都高水平表达，常用于Western Blot检测中校正系统的内参。

抗体类型：亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原：人工合成多肽
应用范围：WB(1：1000-5000)、ELISA(1：1000-20000)
应用种属：人、大鼠

·抗c-Myc标签单克隆抗体
编号：WE0332
英文名称：Anti c-Myc Mouse Monoclonal Antibody
规格：100μl
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的c-Myc标签，而不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测各种表达载体表达的c-Myc-Tag融合蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成第410-419位多肽序列(EQKLISEEDL)
应用范围：WB(1：500-5000)、ELISA(1：200-20000)

·Bradford蛋白定量试剂盒
编号：WE0275
英文名称：Ultra Bradford Protein Assay Kit
规格：800次微孔板(100管次)
  Bradford 法是最简单和快速的比色蛋白定量方法。 这一方法基于考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后， 产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在465-595 nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可通过检测595 nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量。本产品将传统的Bradford方法进行了改良，最大限度的加大蛋白定量的线性范围，变异性小于普通考马斯亮蓝染色法，灵敏度范围为100-1,500μg/ml。使用本产品反应迅速，颜色产物1小时内保持稳定。本试剂盒适用于多种缓冲液系统，不受金属离子、还原剂和螯合剂的干扰。

试剂盒组成：

组成	规格
Bradford Protein Assay Reagent	2×100ml
BSA Standard Solution(2mg/ml)	2ml

注意事项：
1、BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)。
2、本试剂盒不适合含有去污剂的蛋白定量，具体干扰物质(具体见附表1)，可采用BCA蛋白定量试剂盒(WE0276)或其他蛋白定量产品。
3、所测蛋白分子量必须大于3 kD。

使用方法：
1、稀释BSA标准品：用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
 

管号	稀释液用量(μl)	BSA标准品用量(μl)	BSA标准品最终浓度(μg/ml)
A	0	100	2000
B	50	150	1500
C	200	200	1000
D	200	200(从C管中取)	500
E	200	200(从D管中取)	250
F	200	200(从E管中取)	125
G	200	0	0(空白)

2、试管检测(检测范围：100-1500μg/ml)
1)按上表稀释标准品，将30μl稀释好的BSA标准品分别加到作好标记的试管中。
2)取干净的试管，分别加入30μl待测蛋白样品(原液或稀释液)，并作好标记，推荐每个测定做2-3个平行反应。
3)向步骤1)和步骤2)的试管中各加入1.5ml Bradford Protein Assay Reagent，充分混匀，室温放置10分钟。
4)用分光光度计测定595 nm处的吸光值。
5)绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。
注意：数据处理时需要去除明显错误的值。未知样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线，可以从计算机给出的线性方程式计算出未知样品的浓度。
6)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。

3、微孔检测(检测范围：100-1500μg/ml)
1)将按表1稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各5μl分别加到作好标记的96孔板微孔中。
2)每孔加入250μl Bradford Protein Assay Reagent，充分混匀，盖上96孔板盖，室温放置10分钟。
3)用酶标仪测定595 nm处的吸光值。
4)绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。
注意：数据处理时需要去除明显错误的值。未知样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线，可以从计算机给出的线性方程式计算出未知样品的浓度。
5)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。

附表1. 干扰物质表

化合物	耐受浓度
缓冲液
乙酸盐	0.6M
甘*酸	0.1M
HEPES	0.1M
MES	0.7M
MOPS	0.2M
Na+-柠檬酸	50mM
PIPES	500mM
磷酸*/磷酸*	1M
乙酸*	0.6M
Tris	2M
盐类
硫*(代"酸")铵	1M
NaCl	1M
尿素	6M
极性化合物
甘油	99%
还原剂
β-巯基乙醇	1M
DTT	1M
去垢剂和变性剂
Brij35	干扰
脱氧胆酸纳	0.25%
CHAPS	1%
NP-40	干扰
辛葡糖	2%
SDS	0.1%
Tween-20	干扰
Triton X-100	0.1%
糖类
蔗糖	1mM
螯合剂
EDTA	100mM
EGTA	50mM
其他
HCl	0.1M
NaOH	0.1M
NAD	1mM
*	5%

储存条件：2～8℃


Protein G琼脂糖凝胶大量库存促销关键词：Protein G-Sepharose ,WE0270,Protein G琼脂糖凝胶


·PVDF膜(0.22μM)
编号：WE0300
英文名称：PVDF Membrane(0.22μM)
规格：1 sheet

·TMB底物显色试剂盒(可溶型，20×)
编号：WE0309
英文名称：Soluble TMB Kit(20×)
规格：100ml
  TMB(3", 3", 5", 5", -四甲基联*(代"*")*(代"胺"))是辣根过氧化物酶(HRP)显色底物，是目前HRP系统ELISA实验的常用显色试剂。TMB显色底物工作液在HRP的催化下，形成蓝色的阳离子产物，在370 nm和652 nm处有主要吸收峰。加酸终止反应后，蓝色转变为黄色，可以在450 nm波长下测定。本试剂盒使用方便，灵敏度高，效果稳定，颜色产物为可溶性，适用于ELISA，不推荐用于IHC实验。

试剂盒组成：

组份	100ml
20×T MB-A	5ml
1×TMB-B	2×50ml

注意事项：
1、显色工作液应即用即配，放置超过10分钟会影响显色效果。
2、TMB颜色底物显色后，随着时间的延长，颜色会逐渐消退，因此显色并终止反应后应尽快读值，否则会影响检测的准确性。
3、以96孔酶标板每孔用量100μl显色工作液计算，5ml 20×TMB Kit 可完成1000孔样品的检测。
4、本产品仅限于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：

1、TMB显色工作液配制：
根据实验需用量，将20×TMB-A和1×TMB-B以1：19的比例均匀混合，即配制成为TMB显色工作液。

2、显色：
1)经HRP标记物孵育并充分洗涤后，酶标板每孔中加100μl TMB显色工作液。
2)室温避光孵育25-30分钟，反应产物呈蓝色。
3)每孔加50μl 0.5M H2SO4 终止显色，此时蓝色产物变为亮黄色。
4)将酶标板置于酶标仪中，450 nm波长下读取数据。

储存条件：2～8℃

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