Protein A+G琼脂糖凝胶优惠促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖Protein A+G琼脂糖凝胶优惠促销在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：Protein A+G琼脂糖凝胶优惠促销
产地：国产|进口
编号：WE0268
品牌：百奥莱博
规格：1ml
  本产品为Protein A和Protein G 共价交联到Agarose beads上的产物，并保存在20%乙醇溶液中。本产品包含1ml protein A+G agarose和1ml 20%乙醇溶液，即为50%悬浮介质。主要用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。免疫沉淀抗体包括Mouse IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgA，Rat IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c，Rabbit IgG，Rabbit and Goat polyclonal Abs，以及Human IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。本产品也可以用于抗体的纯化。

注意事项：
1、本产品保存在2～8℃ 20%的乙醇中，从低温取出后恢复到室温后装柱，避免产生气泡影响柱效。
2、使用前请充分颠倒若干次使混合均匀。

使用方法：

I 免疫沉淀(Immunoprecipitation，IP)：
1、蛋白样品的准备：
a. 对于细胞样品，用1×PBS洗涤一次。2×106细胞加入200μl细胞裂解液，以此类推。
b. 对于组织样品约20 mg加入200μl组织蛋白抽提试剂，以此类推。
注：如果裂解获得的蛋白样品浓度过高，可以用裂解液或PBS适当稀释；如果蛋白样品浓度过低，可适当减少裂解液的用量。
2、取约200μg至1 mg蛋白样品，与0.2μg至2μg纯化后的抗体混合，4℃缓慢摇动过夜。
3、取20-40μl充分重悬的Protein A+G Agarose加入到一支新的1.5ml离心管中，短暂离心，小心吸弃上清。
4、加入500μl 1×PBS洗涤Protein A+G Agarose，短暂离心，小心吸弃上清。重复此步骤2次。
5、将步骤2的抗原抗体复合物加入到洗涤后的Protein A+G Agarose中，4℃孵育1-3个小时，短暂离心，小心吸弃上清。
6、加入500μl 1×PBS洗涤，短暂离心，小心吸弃上清。重复此步骤2次。
7、向沉淀中加入20-40μl 2×SDS-PAGE电泳上样缓冲液，涡旋重悬沉淀，短暂离心把样品离心至
8、蛋白煮沸变性5分钟，短暂离心后取部分或全部上清，用于SDS-PAGE电泳或Western Blot等。暂时不用的样品可在-20℃保存。

II 免疫共沉淀(CO-IP)：
参考免疫沉淀的方法进行，但免疫共沉淀(CO-IP)通常必须使用未经冻存的新鲜蛋白样品。普通的免疫沉淀虽然可以使用冻存的蛋白样品，但以用新鲜的蛋白样品为佳。

储存条件：2～8℃，避免冻存。

Protein A+G琼脂糖凝胶优惠促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
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·Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
编号：WE0279
英文名称：Tricine-SDS-PAGE Gel Kit
规格：50次
  常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白，对于相对分子量小的，尤其是10 kD以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽，成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。本产品包括Tricine-SDS-PAGE凝胶制备所需全*(代"套")试剂，只需自备蒸馏水，即可制备高质量各种浓度的凝胶，方便、快捷，电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
49.5%T 3%C	30ml
49.5%T 6%C	100ml
Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer	140ml
Glycerol	30ml
APS	0.5 g
TEMED	750μl

本产品所提供的APS(过硫*(代"酸")铵)为固体粉末，使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水)，将溶液分装后置于-20℃保存，通常半年内有效。溶液在使用中可放置4℃保存两周。

注意事项：
1、本产品所提供的APS(过硫*(代"酸")铵)为固体粉末，使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水)，10%APS配制后分装-20度保存。APS溶液不稳定，应尽量减少室温存放时间，每次取用后立即放回冰箱，以防失效；若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换，使用-20℃保存的10%APS。
2、在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。
3、在分离胶上层加纯水时要小心操作，加水时速度不能太快。
4、丙*(代"烯")酰胺具有神经毒性，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
5、本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：

根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，凝胶浓度配方参考附表。

I 配制分离胶
1、将不同体积的纯水、49.5%T 6%C、Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer和Glycerol(甘油)加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液(对于1 mm mini-gel，分离胶溶液加约4ml)，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

II 配制夹层胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水尽量吸去。
1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3、将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面(对于1 mm的mini-gel，夹层胶溶液加约1ml)， 然后在夹层胶溶液上轻轻覆盖一层水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置，待夹层胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

附表Tricine-SDS-PAGE凝胶配方表：

组份	分离胶(胶浓度/配制体积)			夹层胶 (胶浓度/配制体积)	浓缩胶 (胶浓度/配制体积)
	20%/4.5ml	16.5%/4.5ml	15.5%/4.5ml	10%/2ml	4%/2ml
49.5%T 3%C	-	-	-	0.407ml	0.16ml
49.5%T 6%C	1.82ml	1.5ml	1.395ml	-	-
凝胶缓冲液	1.5ml	1.5ml	1.5ml	0.667ml	0.496ml
甘油	0.48ml	0.48ml	0.48ml	-	-
ddH2O	0.7ml	1.02ml	1.125ml	0.926ml	1.344ml
10% AP	40μl	40μl	40μl	20μl	20μl
TEMED	5μl	5μl	5μl	3μl	3μl

III 配制浓缩胶
去除覆盖在夹层胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4、待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
5、进行电泳操作。

IV 电泳
将电泳槽放入4℃或冰水浴中，外槽加入阳极缓冲液，内槽加入阴极缓冲液，30V预电泳10 min，将样品(已经过Tricine专用上样缓冲液处理)加入点样孔后30V电泳1小时，100V电泳至*酚蓝到达胶底部后停止电泳，进行后续的考马斯亮蓝染色或电转。

储存条件：2～8℃


Protein A+G琼脂糖凝胶优惠促销关键词：WE0268,Protein A+G琼脂糖凝胶,Protein A+G Agarose

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BL0264 (原装)DifcoTM Skim Milk 脱脂奶粉
β-葡萄糖苷酶 Sephadex G-200 9001-22-3
ARB12746 小鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)定量分析 Mouse b-cell leukemia/lymphoma 2,bcl-2 ELISA KIT
593-84-0 异硫"青"酸胍 Guanidine thiocyanate
ARB13957 猪热休克蛋白40(HSP-40)含量测试 Porcine heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT

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