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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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383
- 英文名:
Human Genomic DNA Quantification Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括人基因组DNA定量试剂盒厂家在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:人基因组DNA定量试剂盒厂家
编号:WE0230
产地:国产|进口
英文名:Human Genomic DNA Quantification Kit
本产品是采用探针法进行实时荧光定量PCR(qPCR),实现对从各种样品(石蜡样本、流式分选的细胞、血清或血浆样本及少量临床样本等)中抽提的DNA进行浓度和质量的准确检测。产品提供了qPCR过程中所需的全*(代"套")试剂,包括反应混合液,引物混合物,标准品,只需添加提取好的DNA即可开始实验,操作简单方便、省时省力。反应混合物使用了高效、快速的热启动BaldStar Taq DNA Polymerase,扩增灵敏度高,特异性好,缩短了程序反应的时间。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-radiCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System, QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system, Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
关于人基因组DNA定量试剂盒厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·Y染色体人基因组DNA定量试剂盒
编号:WE0232
英文名称:Y Human Male DNA Quantification Kit
规格:1ml|5ml
本产品是一种检测人类男性Y染色体浓度的实时荧光定量PCR试剂盒,包括精心优化的PCR反应液、引物混合物、标准品,尤其适用于珍贵、微量DNA样本的定量检测。试剂盒采用了全新高效、快速的热启动扩增酶Goldstar Taq DNA Polymerase,有效避免常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。本品实现对Y染色体的准确定量,后续可应用于各种领域如遗传制图、物种多态性研究、疾病基因定位、亲子鉴定和法医鉴定等研究分析。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因 此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-radiCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System, QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system, Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
·AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0390
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, AP Conjugated
规格:100μl
本产品为碱性磷酸酶标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,可用于Western Blot和ELISA检测。AP(Alkaline Phosphatase)即碱性磷酸酶,可以催化BCIP/NBT等显色试剂显色或催化适当的化学发光试剂产生化学发光。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M Tris-HCl,0.25M NaCl,50%甘油,pH8.0
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
应用范围:WB(1:2000-10000)、ELISA(1:2000-20000)
人基因组DNA定量试剂盒厂家关键词:WE0230,Human Genomic DNA Quantification Kit,人基因组DNA定量试剂盒
·高保真多重PCR Mix(下一代测序用)
编号:WE0125
英文名称:HiFi PCR Mix for NGS
规格:1ml|5ml
本品是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,具有高保真性、高延伸性、低偏好性的特点,对复杂的DNA模板(如高GC含量模板)有均衡的扩增效率,特别适合于二代建库中多重PCR的扩增。
本品所含的高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,扩增范围更广泛。本产品有效提升了基因组中高GC或高AT区域的扩增效率,降低扩增偏好性从而提高测序覆盖度。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×HiFi PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、该产品不适用于有修饰的引物。
2、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
3、避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 |
| 2×HiFi PCR Mix | 25μl |
| Primer Pool | 0.1 -0.3μM |
| DNA or cfDNA | 5ng-100ng |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 2 min | |
| 变性 | 98℃ | 20 s | 30-40 个循环 |
| 退火延伸 | 65℃ | 90 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
人基因组DNA定量试剂盒厂家关键词:WE0230,Human Genomic DNA Quantification Kit,人基因组DNA定量试剂盒
·2×BaHF MasterMix(含染料)
编号:WE0114
英文名称:2×BaHF MasterMix(With Dye)
规格:5ml
本品为由BaHF DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×,具有操作简便快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好的优点,可最大限度地减少人为误差和污染。该产品所含的BaHF DNA Polymerase是经过特殊处理的热启动高保真聚合酶。该聚合酶具有5"-3"DNA聚合酶活性,5"-3"核酸外切酶活性和3"-5"核酸外切酶活性,在普通PCR条件下,与BaldStar Taq DNA Polymerase相比,具有扩增效率高、错配率低的优良性能。化学修饰使该酶在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活需要在95℃下孵育10分钟,该条件可以整合入已有的PCR热循环程序。优化的缓冲体系使酶的作用发挥最大功效,实现对目的片段的高保真、高特异性、高扩增效率、高灵敏度扩增。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于常规的PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×BaHF MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×BaHF MasterMix含有BaHF DNA Polymerase,3.4 mM MgCl2和 400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因;
4、2~8℃存放三个月,活性无明显改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaHF MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 30-40 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 60 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaHF DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
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了长足的发展,比如BioTeke公司的荧光定量系列产品就以其优良的品质和亲民的价格越来越受到国内用户的青睐,目前还可以申请试用装。为了证明其荧光定量系列产品的品质,BioTeke公司特邀请了山东大学细胞发育遗传学实验室进行了BioTeke的SYBR GREEN I实时荧光定量产品和T公司的实时荧光定量试剂的比对实验。具体实验如下:实验材料小鼠肝脏组织山东大学实验室提供样品cDNA实验方法RNA提取:Bioteke RNApure高纯总RNA提取试剂盒,操作步骤请参考说明书。目的基因:小鼠管家基因β–
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