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大量
- 英文名:
Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8
- 保质期:
半年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
100次
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM0101 | 总SOD活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 | 452.00元 |
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)能催化超氧化物阴离子发生歧化作用,生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率达不到100%等,从而使检测的灵敏度和精确度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C其氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,并且不太适合大批量样本的检测。
目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的WST-8法,可以检测出低达0.5U/ml的超氧化物歧化酶。WST-8法的原理参考图1,WST-8可以和黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化产生的超氧化物阴离子(O2.-)反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),由于SOD能催化超氧化物阴离子发生歧化作用,所以该反应步骤可以被SOD所抑制,因此SOD的活性与甲臜染料的生成量成负相关,从而通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。
图1. 基于黄嘌呤氧化酶偶联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO:xanthine oxidase。
WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时,最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。
本试剂盒的性能优于同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)。本产品的用途与同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)相同,等量SOD导致的吸光度变化值显著大于NBT法,线性范围更宽。本试剂盒提供的SOD样品制备液能直接裂解细胞,无需匀浆,操作更加便捷。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时,对于检测结果仍无显著影响。
本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM0101-1 | SOD样品制备液 | 50ml |
| LM0101-2 | SOD检测缓冲液 | 50ml |
| LM0101-3 | WST-8 | 800μl |
| LM0101-4 | 酶溶液 | 100μl |
| LM0101-5 | 反应启动液(40X) | 60μl |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,半年有效。LM0101-3 WST-8需避光保存。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
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文献和实验MTT的替代产品—XTT,WST-1,CCK-8(WST-8)
的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,线性范围更宽,灵敏度更高 4 、 CCK-8 法或称 WST-8 法 CCK-8 试剂中含有 WST–8 :化学名: 2- ( 2- 甲氧基 -4- 硝基苯基) -3- ( 4- 硝基苯基) -5- ( 2 , 4- 二磺酸苯) -2H- 四唑单钠盐,它在电子载体 1- 甲氧基 -5
kandr20051 最近在做细胞实验,用的是WST-1检测细胞活性。在检测的前72个小时,实验都符合预期,给药组的OD值比阴性对照组的要低,但是到了96个小时以后,WST-1的结果就逆转了。给药组的OD值远远高于阴性对照组。 但最奇怪的是,WST-1的检测结果与我镜下观察到的细胞形态和多少完全不同! 这是阴性对照组 这是给药组的 为什么会出现这种结果呢?
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