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Ribonuclease A
9001-99-4
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北京百奥莱博科技有限公司
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RNase A 是高品质的酶和辅酶产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多RNase A等酶和辅酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:RNase A 酶和辅酶
编号:QN0387
规格:25mg
英文名:Ribonuclease A
品牌:百奥莱博
产地:北京
核糖核酸酶A是内切核糖核酸酶,可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3"端,切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。反应终产物是嘧啶3"磷酸及末端带嘧啶3"磷酸的寡核苷酸。无辅因子及二价阳离子存在时,核糖核酸酶A的作用可被胎盘RNA酶抑制剂(B1ackburn et al.1977)或氧钒—核糖核苷复合物(Puskas et al.1982)所抑制。说明:生化研究;测定核酸的结构;核糖核酸(RNA)序列分析;水解蛋白样品中的RNA;纯化DNA。
别名:RNA酶
CAS号:9001-99-4
储存条件:-20℃
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63-91-2 L-*丙*酸 MMC
QN0416 辅酶Q10 Coenzyme Q10
155141-29-0 马来酸罗格列酮 BOC-L-Homophenylalanine
10318-18-0 DL-半胱*酸盐*(代"酸")盐无水物 2-Methylindole
56038-13-2 三*蔗糖 H-Tyr-Ome
QN0069 特美汀 Timentin
121-33-5 香兰素 Acarbose
QN1030 低熔点琼脂糖 Agarose(Low melting gel)
373-68-2 四甲基*化铵(四水) EDTA tetrasodiu*(代"m") salt
92-43-3 1-*基-3-吡唑烷酮 Theophylline
7524-52-9 L-色*酸甲酯盐*(代"酸")盐 PHA
QN0645 亚精胺 Spermidine
2361-27-5 噻*(代"吩")-2-羧酸酰肼 Creatine phosphate sodiu*(代"m") salt
85-61-0 辅酶A Pyrimidine
6192-52-5 甲*-4-磺酸 L-Tyrosine methyl ester hydrochloride
QN0299 β-乳球蛋白 来源于牛奶 β-Lactoglobulin from bovine milk
RNase A 酶和辅酶关键词:RNA酶,RNase A,9001-99-4
·纳他霉素
编号:QN0075
英文名称:Pimaricin
规格:1g
本品是一种抗真菌的多烯类抗生素,靠特异性地结合麦角甾醇,抑制真菌生长。 不像制霉菌素和菲律宾霉素, 纳他霉素不改变细胞膜的通透性。
CAS:7681-93-8
分子式:C33H47NO13
分子量:665.73
储存条件:2~8℃
纯度:≥95% (HPLC)
物理性质:几乎无臭无味,可含3mol的水,几乎不溶于水,高级醇、醚、酯,微溶于甲醇,溶于冰醋酸和二甲*亚 砜。对氧化剂和紫外线较为敏感。
·潮霉素B
编号:QN0095
英文名称:Hygromycin B
规格:1g
本品由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素,通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成,从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳动物真核细胞。本品是无菌的潮霉素B溶液(100mg/ml),可直接用培养液稀释使用。
CAS:31282-04-9
分子式:C20H37N3O13
分子量:527.52
储存条件:2~8℃
性状:澄清或轻微浑浊黄色溶液
大肠杆菌( Escherichia coli.)来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),编码潮霉素B磷酸转移酶,将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物,从而起到解毒作用。针对这一原理,潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外,由于作用模式的差异,常与G418,Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂,因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1)第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2)根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
终浓度(μg/mL) | 培养基体积(ml) | 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml) |
50 | 9.9 | 0.1 |
100 | 9.8 | 0.2 |
250 | 9.5 | 0.5 |
500 | 9.0 | 1.0 |
750 | 8.5 | 1.5 |
1000 | 8.0 | 2.0 |
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