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柱式动物RNA大量提取试剂盒 RNA纯化

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  • ¥160 - 2160
  • 百奥莱博
  • BTN80901-IPG
  • 北京
  • 2025年07月05日
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      756

    • 英文名

      Animal RNA Column large-scale extraction kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      常温运输,4℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式动物RNA大量提取试剂盒 RNA纯化,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:柱式动物RNA大量提取试剂盒 RNA纯化
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN80901
    规格:5次
    产地:国产|进口
    英文名:Animal RNA Column large-scale extraction kit
    本试剂盒是柱式动物RNA提取试剂盒(BTN71201)的大提升级产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)中大规模快速提取总RNA。跟柱式动物RNA提取试剂盒相比,其主要特点是:
    1.大规模提取,一次最大可以提取到80-100μg的动物总RNA。
    2. 操作简单快速,整个过程只需要不到二十分钟(对一个样品而言)。
    3. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在2.0左右。
    4.一般不含用电泳可以检测到的基因组DNA污染。
    5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
    6. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。

    试剂盒组成:

     
    成分 5T
    溶液A 50ml
    溶液B 50ml
    离心吸附柱 5套
    通用洗柱液 100ml
    RNA 洗脱液 10ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1. 先将1-2 g左右剪切好的动物组织放入50mL塑料离心管中,加10mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/mL 裂解液,否则十分容易产生DNA污染。
    2. 加入0.2倍体积的自备*仿(10mL溶液A需2mL*仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
    3. 5000-7000rpm室温离心3~5分钟。
    4. 将上清液(约6-7mL的无色透明水相,有时水相比重大时,水相在下层,有机相即蓝相在上层,吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的50mL塑料离心管中。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下少许上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
    5. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。加入溶液B后,溶液为乳白色。
    6. 将溶液转移到离心吸附柱中,5000-7000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
    7. 加10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
    8. 加10mL 通用洗柱液,室温离心1分钟,弃穿透液。此步可以省略。
    9.室温5000-7000rpm离心2分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
    10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入1mL RNA 洗脱液。
    11.室温5000-7000rpm离心2分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
    12. 重复10-11 步一次,大提离心吸附柱吸附能力较强,一般第二次洗脱能洗脱较第一次洗脱更多的RNA。
    13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
    14. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH在7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260 RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
    15. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。

    疑难解答:
    Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
    A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如RNA上样液)。
    Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
    A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。

    更多有关柱式动物RNA大量提取试剂盒 RNA纯化的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
    A2801-12 新生牛血清 100ml|500ml
    核组蛋白储存液(pH7.6)   100ml
    ARB10230 人β-微管蛋白(TUBB)定量分析 Human β-tubulin,tubb ELISA KIT
    BFD029 三聚*胺快速检测试剂盒
    显影定影试剂盒   2加仑
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    9005-82-7 直链淀粉 Amylose
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    ARB13829 猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)elisa测定使用说明书 Porcine bcl-2 assaciated x protein,bax ELISA KIT
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    2′-脱氧尿苷-5′-单磷酸二*盐 Farnesol 42155-08-8
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    柱式动物RNA大量提取试剂盒 RNA纯化关键词:柱式动物RNA大量提取试剂盒,BTN80901,Animal RNA Column large-scale extraction kit


    ·ONPG干粉
    编号:BTN131108
    英文名称:o-nitrophenyl-β-Dgalactopyranoside
    规格:1g
    ONPG是在包含β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告酶的ELISA 应用中最经常使用的化学显色底物。该酶-底物反应生成黄色产物,在420nm 有最大吸收,且405nm处强度也很高(与常用的酶标仪滤镜设置匹配)。其反应原理如下:
    β-半乳糖苷酶,ONPG反应原理图

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·柱式DNA污染清除剂(大处理量)
    编号:BTN90802
    英文名称:Maxi Column DNA Scavenger
    规格:5次
    本品是柱式DNA清除剂(BTN90318)的大提升级产品,可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。本公司开发的大提柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有下列特点。

    产品特点:
    1.处理量大,一次可以处理高达400μg的总RNA。
    2. 操作简单快速,全部操作只需要十余分钟。
    3. 回收率高达80%以上。
    4.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平,而 RNA分子完整性不受任何影响。
    5. 本身不含RNase污染,避免了用DNase处理的最大问题。
    6. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
    7. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。

    产品组成:
    成分 规格
    溶液A 5ml
    溶液B 100ml
    大提离心吸附柱 5套
    通用洗柱液 100ml
    RNA洗脱液 5ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输、除溶液A 需要 4℃保存外其余均可室温保存、有效期一年。

    使用方法:
    1. 将1mL 总 RNA溶液与1mL溶液A 加入一个自备的30-50mL塑料离 心管中,并充分震荡 1分钟。注意:RNA溶液中盐(如*离子)的浓度 不能高于0.2 M,如果 RNA溶液的量不足 1mL,最好加自备的无 RNase 水补足到 1mL以便后续操作。
    2. 加入9倍体积(即 18mL)的溶液B,颠倒数次充分混匀。注意:溶液B在 4℃放置后可能会产生沉淀,用前需检查,如果确实有沉淀,必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
    3. 将混合液转移到离心吸附柱中,室温 5000-7000rpm离心一分钟,弃穿透液。
    4. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温 5000-7000rpm离心一分钟,弃穿透液。
    5.一次洗涤一般足够去除杂质。如果有必要,可以再加 10mL 通用洗柱液 到离心吸附柱中,室温 5000-7000rpm离心一分钟,弃穿透液。一般 情况,此步可以省略。
    6.室温 5000-7000rpm离心一分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗 柱液会影响 RNA的使用。
    7. 将离心吸附柱转移到一个新的自备的50mL塑料离心管中,加入0.5mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2分钟。室温 5000-7000rpm离心一分钟,离心管中溶液即为RNA样品。
    8. 由于离心吸附柱吸附能力强,还有大量 RNA 吸附在柱上,所以还需要加 入0.5mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2分钟。室温 5000-7000rpm离 心一分钟。
    9. 两次收集的1mL RNA样品,可以立即使用,也可以存放于-80℃待用。

    疑难解答:
    Q:能否用本产品对同一样品进行反复处理?
    A:可以。
    Q:本产品跟 DNA Scavenger-2有何区别?
    A:本产品为柱式升级产品,比 DNA Scavenger-2 更快速清除 RNA样品中的DNA污染。


    柱式动物RNA大量提取试剂盒 RNA纯化关键词:柱式动物RNA大量提取试剂盒,BTN80901,Animal RNA Column large-scale extraction kit

    PY02-223  匹克氏肉汤基础B  250克  
    纤维素染色液(Gram甲紫法)   3×50ml
    ARB13471 鸡免疫球蛋白M(IgM)尿液中含量检测 Chicken immunoglobulin m,IgM ELISA KIT
    F030609 FITC标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*FITC
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    8002-43-5 蛋黄卵磷脂/卵磷脂(蛋黄)
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    LB冷冻缓冲液   100ml
    F030309 胶体金标记羊抗乙肝e抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBeAg*GOLD
    ARB13404 红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)ELISA检测服务 Cherax quadricarinatus lipovitellin/vitellin,lv/vn ELISA KIT
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    磺胺甲噁唑 Oxytetracycline hydrochloride 723-46-6
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    葡萄糖酸锌 1,1-Dimethylbiguanide hydrochloride (Metformin) 4468-02-4 

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