海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)厂家

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百奥莱博专业生产销*(代"售")海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)厂家
编号：BTN130401
规格：50次
英文名：Marine animal DNA column extraction kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒是在柱式动物DNA提取试剂盒(BTN71206)试剂盒基础上优化改良而得，专门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒，可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取，可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。

产品特点：
1. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2. 操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用*酚*仿等有机试剂。
3. 应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。
4. 性价比高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液(20mg/mL)	1ml
溶液B	15ml
溶液C	13ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	15ml
通用洗脱液	15ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1. 切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μL溶液A的离心管中，涡旋振荡15秒。注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA，可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客户自备，BTN3160)，振荡15秒，室温放置5分钟。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL)，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
3. 加入200μl溶液B，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意：加入溶液B时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA 量少和提取出的DNA 不纯。
4. 加入200μl 无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集管中)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
6. 向离心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
8. 重复操作步骤7。
9. 将吸附柱放回收集管中，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
10. 将吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl 通用洗脱液，室温放置2-5分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，将溶液收集到离心管中。注意：通用洗脱液的体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5 范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA 降解。

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SY0350 5×非变性蛋白上样缓冲液
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SV1653 pTK-CLuc 载体
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SY0103 SRE-Luc荧光素酶报告基因质粒 SRE luciferase reporter plasmid 
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·超快DNA-RNA两用转膜试剂盒
编号：BTN121110
英文名称：Rapid Nucleic Acid Blotting Kit
规格：5次
本试剂盒是基于毛细管转膜法的Southern和Northern印迹膜制备试剂，专门用于从电泳得到的凝胶中制备用于Southern杂交和Northern杂交的印迹膜。其操作流程如下：


产品特点：
1.即开即用，提供制备5张13×20cm大小的Southern杂交和Northern杂交印迹膜所需要的印迹膜和溶液，不需要用户单独准备。
2.快速：转膜过程只需要1小时，整个过程只需要2.5小时(对DNA)或1.5小时(对RNA)。
3.跟硝酸纤维素膜、带电尼龙膜、中性尼龙膜和PVDF膜兼容。包括Nytron、Gene Screen Plus、Zetabind、Biotrans、Hybond-N、Immobilon等。
4.A型提供硝酸纤维素膜，适用于400bp以上的靶分子，背景低。B型提供带电尼龙膜，适用于40bp以上的靶分子，结合力强。如需中性尼龙膜或PVDF膜，需另购。
5.使用优化的下向转膜法，不但效率比上行转膜法高30%左右，而且条带弥散度低、分辨率高。
可用琼脂糖胶(包括脉冲电泳胶，DNA电泳、RNA甲醛胶电泳和RNA戊二醛电泳)和DNA PAGE胶。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	660g
溶液B	100ml
溶液C	250ml
硝酸纤维素膜13×20cm	5张(仅A型提供)
带电尼龙膜13×20cm	5张(仅B型提供)
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：

一：Southern印迹膜的制备
1.按常规方法进行电泳(包括脉冲电泳)，本试剂盒不提供电泳所需试剂。如果进行常规的Southern杂交，建议使用0.7%琼脂糖进行电泳，分离酶切的基因组DNA。电泳时最好加电泳分子量对照、酶切对照(先将标记的全长lambda DNA或探针质粒与样品DNA的混合，再酶切)、阴性样品(不含检测片段的DNA样品)、杂交分子量对照(标记的1.lambda/Hind III)等。电泳后和荧光标尺并排拍照。
2.变性：首次使用时需配制变性液2.5L(在3L的干净玻璃烧杯中加入约2L自备的去离子水，搅拌缓慢中加入220g成分A和100mL溶液B，溶解后定容到2.5L后即可用)，将凝胶转移到一个至少10倍于胶体积的变性液中，脱色摇床上室温下摇晃处理60分钟(如果使用带正电尼龙膜，此步处理可以缩短到30分钟)。未用完的变性液可放瓶中室温保存。
3.转膜：如果使用带正点的尼龙膜，则直接用上步配制的变性液转膜，如果使用中性尼龙膜和硝酸纤维素膜，则需配置转膜液(在3L的干净玻璃烧杯中加入约2L自备的去离子水，缓慢搅拌中加入440 g成分A和2mL溶液B，溶解后定容到2.5L后即可用)。将凝胶转移到至少10倍于凝胶体积的转膜液中，脱色摇床上室温下摇晃处理15分钟。
4.测量凝胶的大小，然后借助尺子准确切出一张印迹膜，每边比凝胶大1mm，并切去一角，将印迹膜漂浮于去离子水上20分钟确保全部湿润，再按下图设置下行转膜体系(比上行转膜体系效率高30%)。图中membrane即印迹膜，transfer buffer即转膜液，吸水滤纸厚度为2-3cm，一般按每cm2印迹膜需要1mL转膜液的比例准备转膜液。对大的凝胶，可以同时使用两张滤纸分别跟两个容器的转膜液连接以便使转膜匀浆。

5.转膜1小时。结束后用铅笔标记核酸结合面以免搞错。注意：不要过夜转膜，否则信号将降低50%。
6.将印迹膜在中和液中处理10分钟，中和液的用量至少为0.5mL/cm2印迹膜。
7.可将凝胶放入EB(0.5μg/mL)溶液中染色30分钟后UV下观察残留核酸的量，反推转膜效率。此步也可跳过。
8.将印迹膜夹在两层滤纸中间80℃干燥15分钟以固定核酸(不需真空)，干燥时间不需延长，否则杂交信号可能会降低。
9.此时印迹膜可直接用于后续的核酸杂交实验或者在干燥状态下保存待用(可放数月)。

二：Northern印迹膜的制备
10.按常规方法进行电泳，本试剂盒不提供电泳所需试剂。本方法适用于甲醛变性胶和乙二醛变性胶，电泳后和荧光标尺并排拍照。
凝胶不需要变性和中和处理(也不能变性，否则RNA将会降解)，直接进入转膜步骤(同Southern印迹膜制备的第3到第9步)。


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