柱式骨骼DNA提取试剂盒说明书

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百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式骨骼DNA提取试剂盒说明书，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式骨骼DNA提取试剂盒说明书
品牌：百奥莱博
编号：BTN91102
规格：50次
英文名：Bone DNA column extraction kit
本试剂盒是专门用于从动物骨骼(包括骨粉)样品中提取DNA的产品，20次规格足够50次微量提取。

产品特点：
1. 微量提取，一次可以处理300mg左右的骨骼(但需要先将骨粉变成骨粉)。
2. 柱式操作，方法简单，整个过程只需要40-60分钟。
3. 得到的DNA分子量不均匀，一般在20 Kb到100bp之间，具体取决于骨骼的新鲜程度，骨粉的加工方法等。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50mL
溶液B	15mL
溶液C	30mL
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液2.0	10mL
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 骨粉的制备：用自备酒精将骨骼表面擦洗干净，以防污染物对后续PCR的影响，然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉，可以跳过此步，直接进入下一步。
2. 用天平称取0.2克骨粉，转移到2mL塑料离心管中。
3. 加入1mL溶液A到骨粉中，充分振荡30秒混匀。(注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用，且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠，需使劲振荡混匀。)
4. 65℃水浴放置30分钟。
5. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备*仿，充分振荡30秒混匀。
6. 12000rpm室温离心3分钟，小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
7. 加入0.5mL溶液C，颠倒混匀。
8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要 12000rpm室温离心1分钟，并弃收集管中的穿透液。
9. 加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
10. 再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
11. 12000rpm室温离心半分钟，弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要，否则残留的液体会抑制后续的PCR。
12. 将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μL DNA洗脱液，然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60-80℃再使用，效果更佳。
13. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
14. 取少量进行电泳检测。注意：一般DNA都呈现弥散状，分布在20 Kb到100bp这一广泛的范围，其比例跟骨骼(或骨粉)的新鲜程度、加工过程(对骨粉)等因素密切相关。
15. DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。

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KT109 多重PCR扩增试剂盒
ARB13923 猪补体蛋白3(C3)Elisa方法检测 Porcine complement 3,c3 ELISA KIT
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L-丝*酸甲酯盐*(代"酸")盐 Indazole 5680-80-8
120-23-0 β- Naphthoxyacetic acid (BNOA) β-*氧乙酸
ARB12259 大鼠全段甲状旁腺素(I-PTH)Elisa定量检测 Rat intact paRathormone ,i-pth ELISA KIT
台氏液 Tyrode"s Solution  500ml
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柱式骨骼DNA提取试剂盒说明书关键词：BTN91102,柱式骨骼DNA提取试剂盒,Bone DNA column extraction kit

苏丹Ⅳ Pyronin B 85-83-6
2478-38-8 Acetosyringone  乙酰丁香酮
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BL1116 台盼蓝染色液(0.4%)
59-23-4 D(+)Galactose   D-半乳糖
DNA Marker I(100～600bp) 
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*扎*铵 Palmitoleic acid 7281-04-1
酚酞-尼罗蓝指示剂   100ml
ARB11198 人组织相容性2-K1-K 区(H2-K1)含量检测 Human Histocomp*(代"a")tibility 2-k1-k region,h2-k1 ELISA KIT
BTN131055 TCEP盐*(代"酸")膦 TCEP?HCl
PC4401 THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(第一链耐热反转录试剂盒)
ARB11881 人激肽释放酶6(KLK 6)Elisa定量检测 Human kallikrein 6,klk 6 ELISA KIT
DL-正缬*酸 Phenylpyruvic acid 760-78-1
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A0401 标准新生牛血清(无菌采制) 100ml/200ml/500ml
柱式骨骼DNA提取试剂盒说明书关键词：BTN91102,柱式骨骼DNA提取试剂盒,Bone DNA column extraction kit


·Phusion DNA聚合酶
编号：BTN130429
英文名称：Phusion DNA Polymerase
规格：100U
本产品是Phusion DNA Polymerase基因经过原核表达，并经多次纯化分离得到。该酶是由高保真Pfu DNA聚合酶和独特的双链DNA结合蛋白Sso7d融合而成，其结构示意图如下：


产品特点：
1．极强的DNA 持续合成能力，合成DNA 能力分别是Pfu DNA聚合酶和Taq DNA聚合酶的10倍和2倍。
2．快速，相比常用的DNA聚合酶，合成时间大大缩短，延伸速率为15-30s/kb。
3．可以短时间内高效、高保真扩增长片段DNA，最长可以扩增20Kb。
4．具有 5´-3´和3´-5´核酸外切酶活性，是目前保真度最高的热稳定性聚合酶，保真性是Taq DNA聚合酶的50倍，Pfu DNA聚合酶的6倍。
5．Phusion DNA聚合酶扩增的PCR产物为钝端双链DNA，不能直接用于AT克隆。

产品组成：

成分	规格
Phusion DNA Polymerase，2U/μL	50μl
5×Phusion HF Buffer	2×1.5ml
5×Phusion GC Buffer	1.5ml
50mM MgCl2 Solution	1.5ml
5×PCR Enhancer	500μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：DNA 模板、引物、dNTP、超纯水等。

使用方法：(以50μL的PCR反应体系为例)

1．设置PCR反应,在一干净的PCR管中，依次加入下列成分：

5×Phusion HF Buffer	10μL
DNA 模板(自备)	＜250ng
dNTP(2mM each)(自备)	5μL
PCR引物(自备)	10pmol each
5×PCR Enhancer(选择添加)	1.5μL
Phusion DNA Polymerase	0.5μL
补超纯水到	50μL

注：
⑴ 如果反应体系不是50μL，各成分需按等比例增加或减少，也可根据PCR特点自行调节Phusion DNA Polymerase、模板和引物的用量，进行体系优化。
⑵ 对于扩增困难或序列较长的模板(如富含GC的或具有复制二级结构的)，可用5×Phusion GC Buffer 代替5×Phusion HF Buffer来进行PCR反应。
⑶ 请最后将Phusion DNA Polymerase 加入到反应体系内，防止该酶具有的外切酶活性降解引物。
⑷ 5×Phusion HF Buffer中已含有1.5mM MgCl2。如有需要，可根据PCR反应特点额外添加MgCl2。
⑸ 对于GC含量较高的模板，可选择性加入5×PCR Enhancer。

2．PCR反应参数：

过程	温度	时间
预变性	98℃	30s-3min
PCR反应(25-35个循环)	98℃	5-10s
	45-72℃	10-30s
	72℃	15-30s/kb
最后延伸	72℃	5-10min

3．反应结束后取5-10μL反应产物，琼脂糖凝胶电泳分析。

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