北京改良Lowry法蛋白定量试剂盒厂商

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百奥莱博专业生产供应北京改良Lowry法蛋白定量试剂盒厂商，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京改良Lowry法蛋白定量试剂盒厂商
英文名：Enhanced Lowry Assay Kit
编号：BTN101102
产地：国产|进口
规格：1000次
品牌：百奥莱博
 Folin酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚*基酸(色*酸和酪*酸)发生颜色反应，可用于测定蛋白质浓度，但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤，即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物，再使其与Folin酚试剂发生显色反应，产物在750nm检测。
 Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来，灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右，是双缩脲反应的200倍，因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。传统Lowry法受到很多常用的试剂(如DTT、糖、甘油、Triton等)干扰，步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良。
 Lowry检测原理图如下：


产品特点：
1．即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2．能抵抗部分干扰物(如一定浓度SDS或其他去污剂)的干扰。
3．检测线性范围广，在2-100μg，检测上限比经典Lowry法高30%-40%。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A成分一	208ml
溶液A成分二	16ml
溶液A成分三	16ml
溶液B	80ml
溶液C	80ml
福林酚	10mL(用100mL 棕色瓶)
BSA标准品(2mg/mL in水)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一、准备工作
1．制备溶液A：将16mL溶液A成分二和16mL溶液A成分三加入到装溶液A成分一的塑料瓶中，混合均匀得到240mL溶液A。注意：溶液A各成分分开提供更加稳定。
2．制备 Lowry工作液：将溶液A、溶液B和溶液C按3：1：1的体积比混合得到Lowry工作液。此工作液可以室温放置2-3周，所以最好用多少配多少。如果发现溶液B或溶液C有沉淀，需37℃溶解并摇匀后再使用。
3．制备福林酚工作液：在装有10mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入90mL 去离子水，摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置6个月。

二、试管法
4．先用去离子水将BSA 标准(2mg/mL)稀释到50μg/mL，然后在标记的试管中加入下列成分(单位：μL)。注意：每个样品最好做三个稀释度，每个稀释度最好设置三次重复，阴性对照和标准品也最好做三次重复。

标准品(每个做三次重复，此处只列出一个)
编号	BSA 标准(50μg/mL)	水	总体积
阴性对照	0	0	200
1	0	200	200
2	25	175	200
3	50	150	200
4	100	100	200
5	150	50	200
6	200	0	200

 

样品(以1个样品、3个稀释度为例，每个稀释度三个重复，此处只列出一个)
编号	样品	总体积
1	200(稀释度1)	200
阴性对照1	200(用稀释度1稀释的溶解蛋白样品的缓冲液)	200
2	200(稀释度2)	200
阴性对照2	200(用稀释度2稀释的溶解蛋白样品的缓冲液)	200
3	200(稀释度3)	200
阴性对照3	200(用稀释度3稀释的溶解蛋白样品的缓冲液)	200

5．每管中加入200μl Lowry工作液，振荡混匀后室温反应10分钟。
6．每管中加入100μl 福林酚工作液，振荡混匀后室温反应30分钟。
7．用容量为0.5mL、光径为1 cm的玻璃比色杯或聚*乙*(代"烯")比色杯测定750nm的光吸收。测定时，先空白(即阴性对照)后样品，测定样品和BSA标准品时，先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净，必要时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。
8．根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线，然后根据未知样品的光吸收从标准曲线中查得其对应的浓度。

三、96微孔板法
9．同上，只是反应用96 微孔板设置，用酶标测试仪750nm 测定光吸收。

四、样品中干扰物质的去除(本产品不含相关产品，如果样品中有干扰Lowry法蛋白定量的物质(见附表)，可另购本公司的微量蛋白质沉淀试剂盒(BTN81217)去除，也可以用自备试剂按下法去除：用水将样品调到体积为200μl，加入20μl 0.15%去氧胆酸*，混匀，室温放置10分钟。加入20μL 72%的TCA，室温放置5分钟。3000 g离心15分钟，小心去除上清。用200μl水溶解蛋白沉淀后以用于Lowry法测定。
附：常见Lowry法蛋白定量干扰物(低于所列浓度不干扰，高于所列浓度则会干扰，需要按上法去除。不能含任何浓度的DTE，DTT和硫*(代"酸")胺)。

干扰物	浓度	干扰物	浓度
Acetone	10%	2-Mercaptoethanol	1mM
Aprotinin	10mg/mL	NaCl	1 M
CHAPS	0.05%	NaOH	100mM
DMF	10%	NaPi	100mM
DMSO	10%	NP40	0.02%
EDTA	1mM	PMSF	1mM
EGTA	1mM	SDS	1%
Ethanol	10%	Sodium Citrate	100mM
Glucose	100mM	Sucrose	7%
Glycin	100mM	Tris	10mM
HEPES	1mM	Trition X-100	0.03%
Imidazole	25mM	Tween 20	0.05%
Methanol	10%	Urea	3M

疑难解答：
1. 该方法检测的蛋白质浓度范围1μg～50μg/ml。
2. 由于Lowry法测定的是蛋白质中酪*酸残基，对于那些酪*酸残基数高于或低于BSA,其测定的蛋白质含量将偏低或偏高。如果遇到该情况，需要采用BCA或Bradford法测定。
3. 阅读测定方法后化学试剂对测定方法的影响。

我公司的北京改良Lowry法蛋白定量试剂盒厂商，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
链霉素硫*(代"酸")盐 EGTA tetrasodiu*(代"m") 3810-74-0
ARB10787 人抗中性粒/中心体抗体(ACA)酶免分析 Human anti-centrol and centrosome antibody,aca ELISA KIT
4×Native-PAGE蛋白上样液 5×1ml
ARB12940 小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)elisa检测 Mouse platelet-derived growth factor ab,pdgf-ab ELISA KIT
甘*胆酸 Fluorescamine 475-31-0
*甲环酸 6-Azauridine 1197-18-8
ARB10096 人EB病毒IgA(EBv IgA)酶免分析 Human epstein-barr virus iga,ebv iga ELISA KIT
ARB12241 大鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)定量分析 Rat vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,vegfr-2/flk-1 ELISA KIT
甘露低聚糖 γ-Linolenic acid
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒   30T
F010201 小鼠抗鸡IgG(IgY)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Chicken IgG(IgY)
ARB10283 人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)检测服务 Human epithelial cell adhesion molecule,ep-cam ELISA KIT
PY02-088  马丁氏肉汤  250克  
BTN130927 宫颈采样拭子 Uterus Swabs
25988-63-0 Poly-L-Lysine 多聚-L-赖*酸(7-15万)
肝素*检测试剂盒(天青A比色法)   100T
77-86-1 TRIS 三羟甲基*基甲*(代"烷")
ARB12949 小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)Elisa方法检测 Mouse alpha-granular membrane protein,gmp-140 ELISA KIT
BL1274 4×蛋白上样缓冲液(含DTT)
甲基葡萄糖 Amikacin 13224-94-7
ARB12347 大鼠尿素(UreA)Elisa分析 Rat urea ELISA KIT
BL0870 羊抗兔IgG免疫血清 0.5ml
北京改良Lowry法蛋白定量试剂盒厂商关键词：Enhanced Lowry Assay Kit,改良Lowry法蛋白定量试剂盒,BTN101102

2-*氧乙酸 7,8-Benzoquinoline 120-23-0
ARB11128 人肺耐药蛋白(LRP)酶免分析 Human lung resistance-related protein,lrp ELISA KIT
RealECL发光液 100ml|500ml
普鲁兰糖 1-Thioglycerol 9057-02-7
ARB10158 人Selenoprotein P(SE-P)Elisa方法检测 
F030616 FITC标记兔抗人IgM抗体 Rabbit Anti-Human IgM*FITC
ARB10724 人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)检测服务 Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-ra33-antibody,hnrnp/ra33 ELISA KIT
ARB13600 兔子补体片断3A(C3A)定量分析 Rabbit complement fragment 3a,c3a ELISA KIT
BL1113 亲和硅烷
Tris-Tricine阳极缓冲液(5×,pH8.9)   500ml
A2207-56 猪血清Porcine Serum
HC0047 1.8ml冻存管内旋
硫*(代"酸")铁铵 PLA2 7783-83-7
PY02-106  葡萄糖发酵管  250克  
ARB12081 大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfAtin)免费代测 Rat visfatin ELISA KIT
2,4-二甲氧基*甲醛 Lomefloxacin hydrochloride 613-45-6
弹性蛋白酶(猪胰) Epivir-HBV 39445-21-1
2483-12-3 4*dNTPs
PIPES缓冲液(pH6.8)  10mmol/L 100ml
ARB12203 大鼠孕酮受体(PGR)定量分析 Rat progesterone receptor,pgr ELISA KIT
ARB10365 人末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA代测服务 Human terminal complement complex c5b-9,tcc c5b-9 ELISA KIT
ARB12386 大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体I(TNFsR-I)血清中含量检测 Rat tumor necrosis factor soluble receptor i,tnfsr-i ELISA KIT
北京改良Lowry法蛋白定量试剂盒厂商关键词：Enhanced Lowry Assay Kit,改良Lowry法蛋白定量试剂盒,BTN101102


·辛甲基硫吡喃葡萄糖苷(OTG)
编号：BTN131045
英文名称：1-s-octyl-β-D-thioglucopyranoside
规格：5g
OTG全名是1-s- 辛基-β-D-硫吡喃葡萄糖苷)，它是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。已发现在一些生物系统中，该产品不受β 半乳糖苷酶的影响。光学上透明并且可透析。与辛甲基β 葡糖苷的溶解能力相同，但稳定性更好。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·全血直接扩增Taq DNA聚合酶
编号：BTN130606
英文名称：Blood-Direct Taq Polymerase
规格：100次
本产品是截短后的Taq DNA聚合酶，它缺失了N端的280个*基酸。本产品还有其它突变，这些突变使它能够耐受全血中存在的抑制剂。此酶能够扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先提纯。本产品在25μl的反应体系中能够耐受高达10%的全血(50μl反应体系中耐受20%)。

产品特点：
1．无需对DNA提纯；
2．聚合能力强；
3．适合诊断用PCR；
4．在大多数抗凝剂存在下依然表现良好，包括肝素，柠檬酸和EDTA；

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·弱RIPA裂解液
编号：BTN131008
英文名称：RIPA Lysis Buffer(Weak)
规格：250mL
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表：

产品名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解强度	强	中	温和
对膜蛋白的提取	很好	较好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	很好	较好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
细胞核转录因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制剂	是	是	是
含磷酸酯酶抑制剂	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

对于培养细胞样品：
1. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000～14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

备注：
1.为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒，不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购北京改良Lowry法蛋白定量试剂盒厂商。