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北京大提柱式质粒DNA提取试剂盒促销

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  • ¥150 - 2350
  • 百奥莱博
  • BTN80912-YXS
  • 北京
  • 2025年07月16日
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      516

    • 英文名

      Mass-plasmid DNA column extraction kit

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      RNase A溶液需-20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京大提柱式质粒DNA提取试剂盒促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京大提柱式质粒DNA提取试剂盒促销
    产地:国产|进口
    英文名:Mass-plasmid DNA column extraction kit
    规格:5次
    编号:BTN80912
    品牌:百奥莱博
    本试剂盒是用于质粒DNA大量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快速提取质粒DNA,全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从50-100mL 过夜培养的菌液纯化得到高达300-500μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280= 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。

    试剂盒特点:
    1.快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
    2.纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
    3.产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
    4.用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
    5.价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    溶液A 30ml
    溶液B 30ml
    RNase A溶液(10mg/mL) 0.15ml
    溶液C 40ml
    大提离心吸附柱 5套
    通用洗柱液 100ml
    DNA洗脱液2.0 10ml×2
    说明书 1份


    储存条件:RNase A溶液需-20℃保存,其余成分可室温或4℃保存,如有沉淀可加热溶解后再使用。

    使用方法:
    1. 用250mL离心管收集100-300mL菌液,5000rpm离心10分钟,去除上清。
    2. 往细菌沉淀中加入6mL溶液A,充分振荡悬浮(第一次使用时需要将RNase A溶液全部加入到溶液A中并混合均匀,未用完的、含RNase A的溶液A需放4℃保存)。注意:充分重悬细胞沉淀使之无细胞结块状物对于获得高的质粒产量十分重要。
    3. 加入6mL溶液B,温和翻转10 余次至透明。若混合液不透明,应减少细菌的用量或室温放置5-10分钟直到裂解液变透明。注意: 避免剧烈振荡,否则细菌基因组DNA 将断裂为小片段,与质粒难以分离,污染质粒DNA。
    4. 加入冰浴的8mL溶液C,颠倒混匀,冰上放置10分钟。混合物中将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
    5. 6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力强,离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
    6. 将上清液(约20mL)转移到离心吸附柱中,放入50mL 套管中。
    7. 6000rpm离心5分钟,质粒DNA 将与离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
    8. 将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
    9. 重复上步一次,即将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
    10.室温6000rpm 空甩5分钟,弃穿透液。注意:此步对去除残留通用洗柱液很重要,否则通用洗柱液会影响DNA的使用。
    11. 将离心吸附柱放入一个自备的、干净的50mL塑料离心管中,加1mL DNA洗脱液2.0(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳),室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟,收集液即是质粒DNA溶液。
    12. 本试剂盒中的离心吸附柱吸附能力较强,所以再用1mL DNA 洗脱液2.0洗脱3-4次才能把绝大部分质粒DNA 洗脱下来。得到的RNA可以收集在一起立即使用或存放于-80℃待用。注:如果DNA 洗脱液不够,可以用自备的DEPC 水代替。
     注:一般情况下,第一次洗脱可以洗脱约25%的质粒DNA;第二次洗脱可以洗脱约35%的质粒DNA;第三次洗脱可以洗脱约20%的质粒DNA;第四次洗脱可以洗脱约10%的质粒DNA;第五次洗脱可以洗脱约8%的质粒DNA。
    13. 合并所得质粒DNA,立即使用或-20℃储存。如果需要使用液相内毒素清除剂清除质粒DNA中的内毒素,可以直接将此步所得的DNA溶液用于去内毒素处理。如果DNA浓度太低,可以另购本公司的核酸浓缩剂进行浓缩。

    注意事项:
    1.细菌培养时间一般为12-16小时,但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
    2.溶液A:溶液B:溶液C的比例为3:3:4。若细菌量增大,需按此比例放大这些溶液的使用量。
    3.随菌体增多应延长溶液B的作用时间,直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
    4.加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片,离心后应避免带入到后续处理中。
    5.通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次,否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
    6.质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。100mL高拷贝的菌液一般能得到700-1500ug质粒DNA,100mL低拷贝的菌液一般能得到150-350ug质粒DNA。
    7.纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常,未分开的环套质粒,易被误判为基因组DNA。

    北京大提柱式质粒DNA提取试剂盒促销外,我公司正在打折促销以下产品:

    ·Klenow片段(3´→5´exo-)
    编号:BTN131235
    英文名称:Klenow Fragment(3´→ 5´exo-)
    规格:200U
    Klenow片段是大肠杆菌DNA聚合酶I的蛋白水解产物。它保留了DNA聚合酶活性,具有3´→5´外切酶活性,但不具有5´→3´外切核酸酶活性。可以在DNA模板和引物存在的条件下,选择性地催化底物dNTP沿5´→3´方向合成与模板互补的DNA。本产品是重组表达得到。

    产品用途:
    1.双链DNA 5´突出末端的平滑化。
    2.用随机引物制备探针。
    3.随机引物标记法。
    4.寡核苷酸定向诱变中双链DNA的合成。
    5.双脱氧法DNA序列测定(Sanger法)。

    产品组成:
    成分 规格
    Klenow片段(5U/μL) 20μl
    10×Klenow Fragment Buffer 1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    活性定义:以合成的Poly d(A-T)DNA为模板/引物,在37℃、pH7.4的条件下,30分钟内使10nmol的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

    使用举例:(随机引物的同位素标记反应)
    1.在微量离心管中配制下列反应液
    成份 用量
    模板DNA 25ng
    随机引物(6-9mer)(1nmol/μl) 2μL
    补超纯水到 14μL

    2.95℃保温3分钟。然后冰中急冷5分钟。
    3.加入2.5μl 10×Klenow Fragment Buffer。
    4.加入2.5μl dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
    5.加入5μl 111TBq/mmol[α-³²P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq,50μCi)
    6.加入1μl本产品,反应液共25μl。
    7.37℃反应3小时。
    8.65℃加热5分钟。
     反应液可直接作为探针使用。如有必要,可以通过用我司柱式探针纯化试剂盒除去未反应的标记的dCTP。

    注意事项:
    1.本酶有高度稳定性,稀释时不失活,但剧烈搅拌会失活。
    2.由于不含有 5´→3´的外切核酸酶活性,因此没有切口平移活性。
    3.可用于双链DNA末端以及缺口的修复。
    4.与T4 DNA Polymerase相比,对模板高级结构的抵抗性能较好。
    5.由于对DNA的亲和性较强,过量使用易发生凝集作用从而抑制反应进行。
    6.若用于5´突出末端的修饰时,补平后有时会多加一个碱基。
    7.与DNA Polymerase I相同,ddNTPs的掺入不受底物抑制。


    北京大提柱式质粒DNA提取试剂盒促销关键词:Mass-plasmid DNA column extraction kit,大提柱式质粒DNA提取试剂盒,BTN80912

    百里酚 Salicylamide 89-83-8
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    DNA凝胶加样缓冲液(10×DNA Loading Buffer)   5ml
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    BTN60901 可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂 Taq DNA Polymerase Inhibitor
    BTN130869 人超氧化物歧化酶 Superoxide Dismutase
    BL1254 MarkerⅢDNA Ladder
    病毒检测用RNA提取试剂盒 
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    肌酸激酶(兔肌) Sephadex G-100 9001-15-4
    ARB11083 人肾小球组织糖基化终末产物(GTE-AGE)ELISA检测服务 Human glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products,gte-age ELISA KIT
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    F050319 豚鼠IgG抗体 Guinea Pig IgG
    5-*-2-脱氧尿苷 L-Arginine ethyl ester dihydrochloride 59-14-3
    56-41-7 L-Alanine L-丙*酸
    茶多酚 Purine-nucleoside phosphorylase 84650-60-2
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    2-羟基*乙*(代"酸") L-Phenylalaninol 614-75-5
    632-69-9 虎红(玫瑰红)(孟加拉红) Rose Bengal sodiu*(代"m") salt
    ARB13695 兔抗糖蛋白抗体(GP)ELISA检测服务 Rabbit anti-glycoprotein antibody,gp ELISA KIT
    62-56-*(代"6") Thiourea 硫*(代"脲")
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