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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
732
- 英文名:
Linear DNA Scavenger
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应线状DNA清除剂 DNA纯化,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:线状DNA清除剂 DNA纯化
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN101101
规格:30次
分离纯化环状DNA(质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA和某些病毒DNA)的时候经常需要去除其中的基因组DNA污染,否则会对后续的PCR、WGA和测序等反应产生干扰。而基因组DNA一般都十分巨大,无论是线状(如真核细菌基因组DNA)还是环状(如细菌DNA),经过常规的DNA纯化过程都会变成20-50 Kb大小的线状DNA,而上述环状DNA一般还能保持环状构型。根据这一特点,本公司开发了专门用于去除线状DNA的本产品。
产品特点:
1. 即开即用,不需用户花费大量时间去摸索各种条件。
2.酶法去除线性DNA,使线状DNA污染降级几个数量级,不会干扰后续试验。
3. 柱式法纯化回收环状DNA,能快速高效清除残留酶,得到的DNA可直接使用。
4.酶法处理不依赖于DNA序列,适于于任何线状DNA。而内切酶去除线状DNA则需要预先确知其在环状DNA上没有酶切位点。
5.适用的环状DNA包括质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA、环状病毒DNA等。
6. 得到的环状DNA可用于多种后续试验,尤其是WGA、PCR和测序等对污染敏感的试验。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 线状DNA清除剂溶液A | 100μl |
| 线状DNA清除剂溶液B | 30μl |
| 微量核酸沉淀剂 | 2ml |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在干净塑料离心管中,按下表加入各成分(30μl体系):
| 成分 | 样品 | 正对照 | 负对照 |
| DNA(1-10μg) | (样品DNA) | (自备环状DNA) | (自备线状DNA) |
| 溶液A | 3μl | 3μl | 3μl |
| 溶液B | 1μl | 1μl | 1μl |
| 补水到30μL | 补水到30μL | 补水到30μL |
2. 加200μl石蜡油后,37℃保温16小时。注意:保温时间过短可能会形成短的DNA片段,影响后续反应,所以最好保温16小时。必须加石蜡油,否则长时间保温期间水分会蒸发到管盖上。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不加石蜡油。
3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。
4. 如果使用了石蜡油,则需要将30μl酶反应溶液转移到一个新的1.5mL离心管中,再加入60μL 微量核酸沉淀剂。如果没有使用石蜡油,则直接在30μL酶反应溶液中加入60μl 微量核酸沉淀剂。注意:微量核酸沉淀剂取用前需要充分摇匀。
5.室温15000g离心10分钟。
6. 弃上清后加自备的75%乙醇1mL,振荡混匀。
7. 15000离心3~5分钟,弃上清。
8. 再短暂离心后小心吸弃上清,沉淀即为回收的DNA沉淀,可溶于TE或水中。
更多有关线状DNA清除剂 DNA纯化的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·葡萄球菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130842
英文名称:Staphylococcus RNA extraction kit
规格:50次
·生物素化的辣根过氧化物酶
编号:BTN131095
英文名称:Biotin-HRP
规格:5mg
本产品为生物素标记的辣根过氧化物酶,其灵敏性高,推荐用于利用亲和素、链亲和素或中性亲和素蛋白的三明治技术。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性单位定义:一个单位定义为在20℃,20秒内从联*(代"*")三酚中产生1μmol焦酚所需的生物素化辣根过氧化物酶的量。
·大肠杆菌JM110化学感受态细胞
编号:BTN130511
英文名称:E.coli JM110 Chemical Competent Cell
规格:10*100μl
本产品是采用大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达106。本产品为dam-,dcm-的菌株,排除dam,dcm甲基化的影响。
菌株基因型为:dam dcm supE44 hsdR17 thi leu rpsLlacY galK galT ara tonAthrtscΔ(lac-proAB)F-[traD36 proAB+ lacIq cZΔM15]
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
线状DNA清除剂 DNA纯化关键词:线状DNA清除剂,Linear DNA Scavenger,BTN101101
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线状DNA清除剂 DNA纯化关键词:线状DNA清除剂,Linear DNA Scavenger,BTN101101
·λDNA(不含N6-甲基腺嘌呤)
编号:BTN90407B
英文名称:Lambda DNA
规格:5μg
本产品Lambda DNA(λDNA)为λ噬菌体中的DNA,是一种常见的DNA底物,分子量为31.5×106Da/48502bp,浓度为200~500μg/ml。A型为普通Lambda DNA。B型为不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型为非甲基化的cl857 Sam7 λDNA,是从感染的大肠杆菌GM119菌株中分离得到的。该菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作为对DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。
储存溶液:Tris-HCl(pH8.0)10mM;EDTA 1mM
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
纯度:
1. OD260nm/280nm>1.8。
2. 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保温16小时后,琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃,2小时)后,在琼脂糖凝胶电泳时出现8条清晰的DNA电泳带。
我公司正在火爆促销DNA纯化系列产品,欢迎您的垂询选购线状DNA清除剂 DNA纯化。
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Amicon Ultra-0.5 mL Centrifugal Filters for DNA Purification and Concentration 操作示意图: With their vertical membrane design, Amicon Ultra 0.5 mL filters deliver great performance and lower spin times
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