北京T3 RNA聚合酶厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京T3 RNA聚合酶厂商由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多T3 RNA聚合酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京T3 RNA聚合酶厂商
英文名：T3 RNA Polymerase
规格：1000U
产地：国产|进口
编号：BTN120309
品牌：百奥莱博
本酶是噬菌体T3 DNA编码的酶，对T3启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶，具有 5´→3´的RNA聚合酶活性，以含有T3启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。

产品用途：
1．为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2．制作 RNA 剪接反应的前体。
3．以帽类似物为引物，制作Capped mRNA。

产品组成：

 

成份	规格
T3 RNA聚合酶	50μL(20U/μL)
5×转录缓冲液	0.25mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。

北京T3 RNA聚合酶厂商极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞
编号：BTN130558
英文名称：E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Rosetta(DE3)pLysS是Rosetta(DE3)的衍生菌株，为高度严紧表达宿主菌，一般用于毒性含真核蛋白靶蛋白表达，lac透性酶突变，可以控制表达水平，提供稀有密码子tRNAs。抗性为*霉素(34μg/ml)。

基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)plysS pRARE(CmR)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

·AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)
编号：BTN100903
英文名称：AFLP Kit(EcoRI-MseI)
规格：1600次
本产品在传统AFLP-PCR的基础上经过精心优化而开发。AFLP(amplified fragment length polymorphism)原理是一种结合RFLP和PCR技术特点的、迄今为止最有效分子标记分型技术，其原理如下：


产品特点：
1．一站式，足够50次酶切-连接反应、50次预扩反应和1600次AFLP PCR(PCR按30μL体系计算)，但不包括DNA 纯化和带型分析试剂(如PAGE电泳试剂和银染试剂)。
2．本系列产品提供EcoRI-MseI 组合，适用于GC含量在50%以上的基因组。对GC含量在50%以下的基因组，需从本公司采购AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3．各种参数都经过优化，一次PCR所得AFLP片段数一般在10-100之间，可重复性好，误差小于0.6%。
4．本产品适用于基因组在500 Mb-6000Mb的材料(如动物和植物)，对于基因组在50-500Mb的材料(如细菌和真菌)或50Mb以下的材料(如质粒，cosmid，BAC，YAC和PAC等)，需要分别另购专门的+1型预扩引物混合液和+3型EcoRI引物(8 种)AFLP引物对。

试剂盒组成：

成分	规格
酶切-连接Buffer，10×	100μl
EcoRI-MseI酶混合液	100μl
EcoRI-MseI 接头混合物	1ml
T4 DNA连接酶(1U/μL)	50μl
+0型预扩引物混合液	750μl
PCR Mix 3.0	9ml×3
对照DNA(50ng/μL)	20μl
+2型EcoRI引物(8条)	1ml每种
+3型MseI引物(8条)	1ml每种
TE溶液，pH8.0	10ml
超纯水	10ml
说明书	1份

+2型EcoRI引物和+3型MseI引物最后碱基的序列

引物名称	8条引物3´最后碱基
+2型EcoRI引物	-AA,-AT,-AG,-AC,-TA,-TT,-TG,-TC
+3型MseI引物	-CAA,-CAC,-CAG,-CAT,-CTA,-CTC,-CTG,-CTT

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：Southern级DNA纯化试剂，尿素-PAGE电泳套装，银染试剂盒。

使用方法：

一、DNA提取(本试剂盒不提供相关试剂)
用户需要自备50-500ng Southern级别的基因组DNA，用前最好预实验以确保DNA能够被EcoRI和MseI内切酶彻底切开。

二、限制性酶切和接头连接反应(本试剂盒足够50次本反应)
1．在0.2mL离心管中加入设置20μL的限制性内切酶酶切体系：

成分	用量
酶切-连接Buffer，10×	2μl
样品DNA	50ng(对小基因组材料) 500ng(对大基因组材料) 如果用对照，则用5μL
EcoR I-Mse I酶混合液	2μl
超纯水	加水到20μl

2．轻柔混匀并短暂离心后，37℃保温2小时酶切(若PCR 仪器不带热盖，则必须加50μL自备石蜡油，否则水分会蒸发影响反应。下同)，70℃保温15分钟灭活内切酶。
3．在上述酶反应体系中加入20μl EcoRI-MseI 接头混合物和1μl T4 DNA连接酶，轻柔混匀并短暂离心后，20℃保温2小时让接头跟DNA片段相连。
4．在一个离心管中加入10μl上步得到的连接反应液和90μL TE缓冲液，pH8，充分混匀，得到酶切-连接反应10倍稀释液，未用完的酶切-连接反应原液(30μL)可放-20℃保存。

三、预扩增(本试剂盒足够50次本反应)
5．在0.2mL离心管中设置30μl的PCR 体系：

成分	体积
酶切-连接反应液10倍稀释液	5μl
+0型预扩引物混合液	10μl
PCR Mix 3.0	15μl

6．离心数秒，按下列参数进行PCR预扩增：

	温度	时间
PCR(20次)	94℃	30s
	56℃	60s
	72℃	60s

7．可以取10μl PCR产物在1.5%琼脂糖胶上电泳检测，产物为100-1500bp 模糊条带。
8．将剩下的预扩反应液用TE 稀释50倍，直接用于下步反应或放-20℃保存待用。

四、选择性PCR扩增(本试剂盒足够至少1600次本反应)
9．在0.2mL PCR 管中，加入下列成分(如果用户已经知道哪个一种或几种引物组合适合自己的材料，则直接使用；如果不知道，则需要预先测试所有64 种组合，设置64个PCR反应)，下面只是一种组合：

成分	体积
预扩反应液50倍稀释液	5μl
+2型EcoR I引物之一(八种之一)	5μl
+3型Mse I引物之一(八种之一)	5μl
PCR Mix 3.0	15μl

10．轻柔混匀后离心数秒，按下列参数进行PCR：

	温度	时间
PCR(13次)	94℃	30s
	65℃	30s(每次循环递减0.7℃)
	72℃	60s
PCR(13次)	94℃	30s
	55℃	30s
	72℃	60s
延伸	72℃	5min

五、尿素-PAGE电泳和银染(需另购试剂并按相关说明书进行)


北京T3 RNA聚合酶厂商关键词：T3 RNA聚合酶,BTN120309,T3 RNA Polymerase


·三合一RNA上样液(B型,6X)
编号：BTN3130B
英文名称：RNA Loading Buffer
规格：1.5mL
本品是集RNA变性RNA、上样、RNA染色三种功能于一体的即用型溶液。

产品特点：
1．能提高RNA上样速度，免去繁琐的准备步骤，减少污染。
2．其含有的RNase抑制剂能抑制RNA样品中残留RNase的活性，保证电泳过程中RNA的完整性。
3．所含甘油和染料(仅BTN3130A含EB染料)，便于直接上样和UV观察RNA电泳条带，免去染色和脱色过程。
4．本产品与DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2完全兼容。

产品组成：

成分	规格
三合一RNA上样液	1.5ml
说明书	1份

本产品为红色液体，含红色的EB(*化乙锭)，有致癌性，避免用手直接接触。
另一红色电泳示踪剂的电泳速度相当于50nt的RNA。

储存条件：常温运输，4℃(短期)或-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 按1:1-1:3的比例将RNA样品与RNA上样液混合(如5μL RNA+15μL RNA上样液)。
2. 65-85℃水浴保温10分钟,。
3. 冰浴5分钟后即可直接上样电泳。
 注：本产品含EB，所以琼脂糖凝胶中可以不必再加EB。本产品与甲醛琼脂糖变性凝胶或用DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2配制的非变性琼脂糖变性凝胶兼容。
4.电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果，RNA 条带成红色。

疑难解答：
Q：为何RNA样品在甲醛变性胶中的电泳效果比普通非变性胶差?
A：这是因为在非变性胶中，即使内部有切口的RNA分子(实际已经是两条RNA分子)也会通过形成发夹结构而跟完整的分子等速电泳，而在变性胶中，完整RNA分子和内部有切口的RNA分子将以不同的速度泳动，所以变性胶看起来效果不好是反应了真实情况，非变性胶看起来好只是一种假象。要求严格的实验(如CDNA文库构建)最好还是使用甲醛变性胶判断RNA的质量好坏。


北京T3 RNA聚合酶厂商关键词：T3 RNA聚合酶,BTN120309,T3 RNA Polymerase

SJ0681 Marker Ⅶ
PP0801 超敏可逆蛋白印迹膜染色试剂盒I
肌酸激酶(CK)检测试剂盒(肌酸比色法)   50T
ARB10458 人生长调节致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)含量分析 Human growth-regulated oncogeneγ/melanoma growth stimulating activity,groγ/mgsa ELISA KIT
ARB13570 兔子白介素1(IL-1)检测服务 Rabbit interleukin 1,IL-1 ELISA KIT
BL1406 2×SYBR Green PCR Mastermix
ARB13406 芜菁花叶病毒(TuMV)酶标法分析 
SJ0859 (超级)新生牛血清
ARB12361 大鼠抵抗素(ResIstIn)Elisa定量检测 Rat resistin ELISA KIT
CYB167059 兔抗大鼠IgG
BL1269 0.01M PBS(干粉) PH7.2-7.4
F030426 胶体金标记兔抗大鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Rat IgG*GOLD
Tris-EDTA缓冲液(10×TE,pH7.6)   500ml
25322-68-3 PEG4000   聚乙二醇
ARB12016 大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)Elisa分析 Rat α1-acid glycoprotein,α1-agp ELISA KIT
*苄青霉素溶液(50mg/ml|100mg/ml) Ampicillin 50mg/ml|100mg/ml 10ml

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