Tth DNA聚合酶

特别提示：包括Tth DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Tth DNA聚合酶
英文名称：Tth DNA Polymerase
产品货号：BTN90501
产品规格：250U

本酶来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下，具有DNA多聚酶活性。它与Taq酶一样被广泛用于PCR反应，但耐热性比Taq酶高，因此对高GC含量模板的PCR 也有较好的效果。本酶基本上没有3′→5′外切酶活性及5′→3′外切酶活性，所以也可用于双脱氧法测序。另外，本酶具有RTase活性，在Mn2+存在的情况下，RTase活性会得到强化。利用该特性，可以用来在同一管中进行逆转录反应和PCR反应，即一步法RT PCR。(但是，在Mn2+存在时，RT-PCR的准确性不高)此外，本酶与Taq DNA多聚酶一样，PCR产物可通过T载体进行TA克隆。

产品特点：
1．RT-PCR反应的特异性增加：在较高的温度下进行逆转录，增加了引物杂交和延伸的特异性。
2．二级结构减少：在较高的温度下进行逆转录，减少了由于RNA二级结构引起的问题。

产品组成：

成分	规格
Tth DNA聚合酶(5U/μL)	50μl
10×Tth Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
以λDNA为模板，以10×Tth Buffer(+MgCl2)作为缓冲液进行体积为50μL的PCR扩增反应为例

1．按下列组份配制PCR反应液。

成分	终浓度	用量
Tth DNA聚合酶(5U/μL)	1.25U	0.25μl
10×Tth Buffer(+MgCl2)	1×	5μl
dNTP Mixture(各2.5mM)	各0.2mM	4μl
模板DNA	50pg～1μg	详见下表
引物1(10μM)	0.1～1μM	最多到1μL
引物2(10μM)	0.1～1μM	最多到1μL
灭菌蒸馏水		加到50μL

推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量：

哺乳动物基因组DNA	0.5～1μg
酵母基因组DNA	5～500ng
细菌基因组DNA	0.5～50ng
质粒DNA	5～500pg
PCR回收片段	1～100pg

2．PCR反应条件
以λDNA为模板，扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
1．循环测序：该酶为耐热性酶，可通过与PCR 同样的温度条件进行测序反应。由于其高温稳定性好，对于复杂高级结构的模板效果较好。
2．引物：用于耐热性酶测序的引物需比用于非耐酶测序的引物设定更长的时间。采用较短的引物时，可能会出现不能获得条带变淡的情况。

除了Tth DNA聚合酶,，我公司还供应以下相关产品：


BTN130658 无机焦磷酸酶(PPase)(酵母) 10U
SV0038 AluI限制性内切酶 5KU|1KU|500U
SV0112 BcgI限制性内切酶 1250U|250U
SV0172 BseRI限制性内切酶 1KU|200U|100U
SV0203 Bsp1286I限制性内切酶 2500U|500U|250U
SV0206 BspCNI限制性内切酶 500U|100U
SV0225 BsrFI限制性内切酶 5KU|1KU
SV0259 BstEII-HF RE-Mix限制性内切酶 100次
SV0263 BstUI限制性内切酶 5KU|1KU|500U
SV0289 ClaI限制性内切酶 5KU|1KU|500U
SV0334 Eco53kI限制性内切酶 5KU|1KU|500U
SV0552 NotI限制性内切酶 2500U|2500U|500U|250U
SV0580 PacI RE-Mix限制性内切酶 25次
SV0699 SgrAI限制性内切酶 5KU|1KU
SV0706 SnaBI限制性内切酶 2500U|2500U|500U|250U
SV0811 PI-SceI归位内切酶 1250U|250U
SV0913 LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶 2500U|500U
SV1054 热稳定无机焦磷酸酶 1250U|250U
SV1070 T7 核酸外切酶 5KU|1KU
SV1384 T4 RNA 连接酶 2，截短型 10KU|2KU
SV1563 蛋白内切酶 AspN 50μg
SV1574 酪氨酸激酶 II（CK2） 50KU|10KU
JN0073 核酸内切酶IV 100U×5
GL1254 溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml) 5ml