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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
992
- 英文名:
Acid-Washed Glassbeads(1500~2000μm)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京酸洗玻璃珠(1500~2000μm)厂商,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京酸洗玻璃珠(1500~2000μm)厂商
品牌:百奥莱博
编号:BTN100307E
产地:国产|进口
英文名:Acid-Washed Glassbeads(1500~2000μm)
我公司的北京酸洗玻璃珠(1500~2000μm)厂商,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·20%PVP K30溶液(不含RNase)
编号:BTN60605
英文名称:RNase-free PVP K30
规格:250mL
·20×SSC溶液
编号:BTN100405
英文名称:RNase-free PVP K30
规格:250mL
·PCR级绿如蓝DNA染料
编号:BTN70909
英文名称:DNAgreen, PCR Grade
规格:0.1mL
第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR,所以反应重复性很不稳定,并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样,是第三代饱和型荧光染料,在饱和浓度下也不抑制荧光PCR反应。
产品特点:
1. 饱和浓度不抑制PCR反应,因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green I。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位,因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系,可以用于精细的Tm 测定实验,如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内,毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。
储存条件:常温运输、-20℃避光保存,有效期一年。
使用方法:
先将本产品放置在室温融化,然后震荡10秒钟,短暂离心后待用。下面以50μL的标准PCR反应体系为例说明其使用:
1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:
| 试剂 | 加入量 |
| 10×PCR Buffer(No Mg2+) | 5μl |
| MgCl2 50mM | 2.5μl |
| dNTP 10mM | 1μl |
| 本产品(PCR级绿如蓝染料) | 2.5μl |
| Taq DNA聚合酶 | 1-5U |
| DNA模板 | 适量 |
| PCR引物 | 5-50 pmol each |
| 补水到 | 50μl |
2. 放入荧光PCR 仪中进行qPCR,并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I 完全一样。
注意事项:
1. 如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系统,需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”;使用LightCycler时,最好在PCR 体系中再加入终浓度为0.5mg/mL的BSA以降低仪器对染料和模板的非特异吸附。
2. 如果使用化学修饰过的Taq DNA聚合酶,可能需要减低KCl的浓度并提高Tris的浓度。
北京酸洗玻璃珠(1500~2000μm)厂商关键词:Acid-Washed Glassbeads(1500~2000μm),酸洗玻璃珠,酸洗玻璃珠(1500~2000μm),BTN100307E
·中草药DNA提取试剂盒
编号:BTN60805
英文名称:Chinese herbal medicine DNA extraction kit
规格:20次
基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA的完整性;处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA 比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题,我们公司在植物DNA提取试剂盒产品基础上开发了本产品。
产品特点:
1.适合于大多数药材。
2. 得到的DNA 纯净,OD260/280一般都在1.6以上,原液或100倍之内的稀释液一般都能直接作为PCR 模板。
3. 操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。
4. 试剂无毒无害,环保卫生。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 15ml |
| 溶液B | 15ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL 加入到10-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取20mg左右的中草药,先剪成或研磨成微小的碎片,然后转移到预热的溶液A中匀浆,匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨后将中草药粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨,因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,然后全部转移到新的1.5mL塑料离心管中(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,植物碎片可倒入)。
4. 12000~15000g室温离心3分钟,将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中(上清液的体积一般为200-700μl,如果体积超过700μl,多余部分可以不要)。有的上清液中会有少量细小块状物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀(溶液将呈白色混浊状),然后置冰浴中5分钟。
6. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新离心管中。
7. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。
8. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。
9. 重复*仿抽提步骤一次,此步可以有效去除含色素物质。
10. 加入0.6-1倍体积的异丙醇(自备),上下颠倒30秒混匀。
11. 12000~15000g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。
12.沉淀用75%乙醇清洗2次后,室温晾干。
13. 加入50-100μl自备缓冲液(如TE)溶解沉淀。DNA 即可用于电泳,酶切和PCR等反应。如果需要测OD,则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。
注意:用本产品提供的RNase处理DNA样品时,做好按《分子克隆手册》等参考书上的方法彻底去除其中的DNase。
北京酸洗玻璃珠(1500~2000μm)厂商关键词:Acid-Washed Glassbeads(1500~2000μm),酸洗玻璃珠,酸洗玻璃珠(1500~2000μm),BTN100307E
·血清血浆游离RNA提取试剂盒
编号:BTN130978
英文名称:Serum/Plasma RNA column Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒是专门用于从血清/血浆等液体样品中提取游离RNA的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
3. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4.与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
5. 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
6.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成份 | 编号 | 规格 |
| 溶液A | BTN130978A | 30mL |
| 离心吸附柱(小提) | BTN60911 | 50套 |
| 通用洗柱液 | BTN60408 | 50mL |
| RNA洗脱液 | BTN71207 | 10mL |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL血清/血浆样品。如果样品需要富集,可以将1.5mL液体在4℃下24,000 g冷冻离心60分钟,移弃1.3mL后继续操作。
2. 加入0.6mL溶液A,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液A在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
4. 12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
5. 加入0.8mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
6. 12000~15000g室温离心半分钟。
7.在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μL通用洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中,室温放置2分钟。
8. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为RNA。
9. RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应,也可放-80℃长期保存。注:游离的RNA一般含量极少,不宜用电泳法检测。
疑难解答
Q:提取血清血浆等液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子,每种RNA有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸绝对量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR检测,而PCR或RT-PCR的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。
北京百莱博科技有限公司专业生产DNA纯化产品,欢迎来电咨询选购北京酸洗玻璃珠(1500~2000μm)厂商。
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文献和实验1. 10ml菌液过夜培养至饱和(OD600值为2-3) 2. 离心沉降细胞(Sorvall中以2000rpm的速度),然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤 3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮,然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1:1苯酚:氯仿混和液 4. 漩涡摇匀1-2min 5. 加入200μl的 TE缓冲液,倒置混合6-10次。注意:从这步开始漩涡摇匀可能会剪切DNA 6. 在微型离心机中以13000rpm的速度离心样品5min
A. 取出保存的重组酵母细胞,冰上解冻,加入500 µL裂解缓冲液,充分悬浮; B. 离心(1500 g,4℃,5 min),弃上清; C.将沉淀重悬于裂解缓冲液中,获得悬浮液的OD600 值为50~100(根据取样时所测定菌液的OD600 值计算加入裂解液的量); D. 加入等体积的酸洗玻璃珠,剧烈振荡30 sec后,置于冰上30 sec,反复冻融并剧烈振荡,重复操作5次以上,显微镜下检查细胞破碎情况
脑膜炎奈瑟菌结合型疫苗 在20世纪80年代末开始了对C群脑膜炎球菌结合疫苗的研制,经多次临床试验对儿童和幼儿都是安全、有免疫原性和可引发免疫记忆的(Costantino等,1992;Anderson等,1994;Twumasi等,1995;Lieberman等,1996;Fairley等,1996;Leach等,1997;Borrow等,2000)。 抗血清C群脑膜炎结合疫苗由几家英国厂商开发并先后取得文号(1999年10月一2000年8月),自1999年
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