细菌专用蛋白酶抑制剂折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应细菌专用蛋白酶抑制剂折扣价，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：细菌专用蛋白酶抑制剂折扣价
英文名：Protease Inhibitor for Bacteria
品牌：百奥莱博
规格：1mL
产地：国产|进口
本产品是由6种独立的蛋白酶抑制剂(不含EDTA)按照优化的配比配置而成的蛋白酶抑制剂混合液，溶剂为DMSO。专门用于裂解各种细菌样品时，抑制各种内源和外源蛋白酶活性，防止蛋白降解，从而有效地提高蛋白质得出率，同时不使样品本身的性质发生改变。本品抑制谱广，能特异性抑制丝*酸蛋白酶、丝*酸半胱*酸蛋白酶、*肽酶，半胱*酸蛋白酶和天冬*酸蛋白酶等各种蛋白酶活性。本产品与各种细菌裂解液兼容，在裂解液中加入1/100体积即可。

产品特点：
1．即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2．含有AEBSF 、Aprotein、Bestatin、E-64、Leupeptin、pepstatin A等蛋白酶抑制剂。
3．本品抑制谱广，与各种细菌细胞裂解液兼容。

储存条件：低温运输，-20℃密封保存，有效期两年。使用时可短时间放置于常温或4℃中，用毕应立即放回-20℃中保存。

使用方法：临用前室温融解细菌专用蛋白酶抑制剂，混匀，按照1：100 比例加入到细菌细胞裂解液中。

注意事项：
1．本产品在水溶液中极不稳定，15分钟即可水解掉～50%的活性，需临用前加入。
2．本产品不含EDTA，为100×DMSO 储存液形式。使用时应调整本产品浓度为1×，若有蛋白酶含量丰富的细胞或组织，可适当增加本产品在实验体系中的浓度。
3．本产品置于-20℃保存时，DMSO 呈现冰晶状态，此属于正常现象，非产品质量问题。
4．避免反复冻融，可分装储存。

疑难解答：
1．该蛋白酶抑制剂有哪些优势？
答：针对多种*基酸的靶点，对目的蛋白进行全方位的保护，使其免受内源性蛋白酶的降解，蛋白的得出率较高，大大提高实验效率。
2．可以配合细胞裂解液一起使用吗？
答：可以，这样可以充分的裂解细胞或组织中的蛋白，有效降低蛋白质的降解。
3．为什么需要用DMSO溶解？可否换成其他溶剂？
答：本产品较易溶解于DMSO，且DMSO通常不会影响实验结果，而且性质稳定，利于保存和运输。因此暂不考虑其他溶剂。
4．实验时误将其放置常温下，会不会造成试剂变质？
答：短时间放置于常温下是可以的，不会造成试剂变质，因为蛋白酶抑制剂通常比较稳定。如果实验需要在常温下进行，建议将其置于冰块操作，用毕后迅速放置-20℃保存。同时应尽量避免反复冻融。

我公司的细菌专用蛋白酶抑制剂折扣价，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·DMSO，PCR级
编号：BTN80205
英文名称：DMSO，PCR Grade
规格：1.5mL
大量实验显示5-10%的DMSO能够促进PCR反应，尤其是高GC模板的PCR反应，本产品就是专门用于PCR或RT-PCR的高纯度DMSO。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

·百万碱基级动物DNA提取试剂盒
编号：BTN130929
英文名称：Animal DNA extraction kit(Million base pairs)
规格：10次
大量实验显示5-10%的DMSO能够促进PCR反应，尤其是高GC模板的PCR反应，本产品就是专门用于PCR或RT-PCR的高纯度DMSO。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

·PCR级绿如蓝DNA染料
编号：BTN70909
英文名称：DNAgreen, PCR Grade
规格：0.1mL
第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR，所以反应重复性很不稳定，并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样，是第三代饱和型荧光染料，在饱和浓度下也不抑制荧光PCR反应。

产品特点：
1. 饱和浓度不抑制PCR反应，因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green I。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位，因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系，可以用于精细的Tm 测定实验，如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I 接近，可以使用SYBR Green I的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内，毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。

储存条件：常温运输、-20℃避光保存，有效期一年。

使用方法：
先将本产品放置在室温融化，然后震荡10秒钟，短暂离心后待用。下面以50μL的标准PCR反应体系为例说明其使用：

1.在一干净的PCR 管中，加入下列成分：

 

试剂	加入量
10×PCR Buffer(No Mg2+)	5μl
MgCl2 50mM	2.5μl
dNTP 10mM	1μl
本产品(PCR级绿如蓝染料)	2.5μl
Taq DNA聚合酶	1-5U
DNA模板	适量
PCR引物	5-50 pmol each
补水到	50μl

2. 放入荧光PCR 仪中进行qPCR，并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I 完全一样。

注意事项：
1. 如果使用iCycler，可以不加FAM；如果使用ABI系统，需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”；使用LightCycler时，最好在PCR 体系中再加入终浓度为0.5mg/mL的BSA以降低仪器对染料和模板的非特异吸附。
2. 如果使用化学修饰过的Taq DNA聚合酶，可能需要减低KCl的浓度并提高Tris的浓度。


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·热启动Taq DNA聚合酶
编号：BTN120401
英文名称：HotStart Taq DNA Polymerase
规格：100U
热启动Taq DNA聚合酶设计用于增强DNA扩增的特异性、敏感性和产量。使用该酶可在室温配制反应体系，使用非常方便。热启动Taq DNA聚合酶是一种重组Taq DNA聚合酶，蛋白分子*基酸残基上增加了热不稳定的封闭基团。该酶在室温下没有活性，避免形成引物二聚体和非特异性延伸。从而增加DNA扩增的特异性。95℃加热4分钟可恢复酶活性。活化的酶具有与热启动Taq DNA聚合酶相同的功能：催化5´→3´方向合成DNA、无可检测的3´→5´校正外切酶活性、具有较低的5´→3´外切酶活性。该酶还具有脱氧核糖核酸酶转移活性，在PCR产物的3´-端多加1个腺嘌呤。活化前检测不到这些活性。

产品特点：
1．高产量扩增复杂模板。
2．不需要95℃加热4分钟即可激活酶活性。
3．PCR特异性高-降低错配效应和减少引物二聚体的生成。
4．增强的PCR敏感性。
5．使用方便，室温配制PCR反应体系。
6．扩增产物具有3´-dA突出末端。

产品组成：

成分	规格
热启动Taq DNA聚合酶(5U/μL)	20μl
10×反应 Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况，设定最佳反应条件。10×HotMaster Taq Buffer中含有Mg2+，配有浓度为15mM MgCl2 。实际PCR反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+，设置最佳的反应体系。该酶最适延伸温度为65℃，可在60℃-70℃之间调整。

以人基因组DNA为模板，护增1kb的片段
1．反应体系的建立：50μL反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系)：

2．PCR反应循环的设置：

3．结果检测：反应结束后取5μl反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。


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·AMV逆转录酶
编号：BTN90502
英文名称：AMV Reverse Transcriptase
规格：200U
AMV逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒(AMV)，其方法由Houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157KD的αβ全酶。本酶经高度纯化，完全无核酸酶污染。本酶可用于cDNA合成，也可用于RNA和DNA的双脱氧测序。AMV逆转录酶以总RNA或polyA+ RNA为模板，具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性，DNA为模板的DNA聚合酶活性和RNase H酶活性，最适反应温度在42-55℃，最高可达60℃，如果使用焦磷酸*，最适温度为37-41℃。按照标准使用方法可以得到长至10-12 kb cDNA。本AMV逆转录酶比普通AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cDNA。

产品特点：
1．高灵敏度,可以1ng的总RNA进行cDNA合成。
2．反应温度可升高到60℃，可有效打开RNA二级结构，适用于二级结构复杂的RNA模板。
3．可合成长至10-12kb的cDNA。
4．可用于first strand cDNA合成、RT-PCR、RNA测序和双脱氧法DNA测序、引物延伸和DNA片段的3´-末端标记。
5．本酶具有内源性的RNase H活性，所以最好不要用于cDNA文库的构建。

产品组成：

成分	规格
AMV 逆转录酶(10U/μL)	20μl
5×AMV Buffer	200μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以poly(rA)为模板，以oligo(dT)12-18 为引物，在37℃温度下，在10分钟将1nmol的dTMP掺入入到多核苷酸中所需酶量为一个单位。

使用方法：(合成1st-strand cDNA)
1．按下表配制RT反应体系:

加入物	加入量
总RNA 或poly(A)mRNA 或专一的RNA	500-2000ng 50-500ng 0.05pg-500ng
注：RNA样品不能有基因组DNA污染。
Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物	1μL 1μL 15-20pmol
注：随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比
RNase-free水	补水到11μL

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。
3．严格按下表顺序加入各成分：

5×AMV Buffer(本产品提供)	5μL
RNase Inhibitor(40U/μL,自备)	1μL
焦磷酸* 40mM(预热到42℃)	2.5μL
dNTP(10mM each,自备)	2.5μL
AMV逆转录酶	1-3μL(=10-30U)

4．补水使反应终体积为25μL。
5．42℃保温60分钟(对Oligo dT引物或模板专一引物)或37℃保温60分钟(对随机引物)。如果不使用焦磷酸*，反应温度可以提高到42-55℃，最高可达60℃。
6．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用，不需要纯化。50μL Taq DNA聚合酶催化的PCR体系中最多可以使用25μL的RT产物，一般使用10μL AMV催化的RT产物即可。

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