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细菌RNA提取试剂盒优惠促销

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  • ¥190 - 2020
  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月11日
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      303

    • 英文名

      Bacterial RNA extraction kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      常温运输,4℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    细菌RNA提取试剂盒优惠促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多细菌RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:细菌RNA提取试剂盒优惠促销
    品牌:百奥莱博
    规格:100次
    编号:BTN51102
    英文名:Bacterial RNA extraction kit
    产地:国产|进口
    本试剂盒是在动物RNA提取试剂盒基础上根据细菌提取的具体情况改良而得。它基于异硫*酸胍/酚/*仿提取RNA原理,可用于包括E.coli、Campylobacter fetus、Pseudomonas aeruginosa、Rhodobacter sphaeroides等各种常见的革氏阴性细菌。如果需要提革氏阳性细菌(如Bacillus subtilis、Staphylococcus aureus等)的RNA,可以选择真菌RNA提取试剂盒。

    试剂盒特点:
    1. 操作简单快速,只要十分钟左右,可以全在室温下进行。
    2. 所得 RNA 质量高,OD260/OD280一般在 1.9,不含基因 DNA污染。
    3. 灵敏度高,可以从一个菌落中提取到普通电泳能够检测到的总 RNA。
    4. 性价比高于进口同类产品。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    细菌RNA提取试剂 100ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.在 1.5mL塑料离心管中离心收集0.2-1.5mL 新鲜细菌(注意:由于细菌RNA 半衰期十分短,所以,必须使用最新鲜细菌),吸尽液体培养基,加入1mL细菌RNA提取试剂盒并用枪充分吹打,确保细菌全部裂解,没有块状物。
     如果使用菌落,则用接种环小心将其转移到装有1mL细菌RNA提取试剂盒的1.5 m塑料离心管中,用移液枪吹打均匀。在细菌数较少时,建议使 用助沉剂 RNApp以提高 RNA 回收率。
    2. 加入0.2mL *仿,在振荡器上充分振荡混均 30秒(必须将管底的液体振荡起来,否则不能有效将DNA 打断和去除蛋白质)。
    3. 12000~15000g室温离心3分钟。上清液无色,下层液呈篮色,中间为蛋白质。小心将上清液转移到另一干净 1.5ml塑料离心管中,上清液体积约为0.6mL。为避免触及中间层的DNA和蛋白质,建议分小量多次 吸取,并且只取 0.5mL,留 0.1mL左右。当细菌数量较少时,中间层十分松散,上清时很容易吸到下层有机相,需要更加小心。
    4.在上清液中加入等体积的异丙醇,振荡器上振荡混均 30秒。
    5. 12000~15000室温离心 3-10分钟,RNA 将在管底侧面形成沉淀。
    6.小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA沉淀。
    7.在离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡器上振荡混均 30秒。
    8. 12000~15000g室温离心 1分钟。
    9.小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA沉淀。
    10. 重复第 8 到第 10 步一次。
    11. 短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留液(约50μl)。
    12. 短暂放 1-2分钟后加入适量 RNA 溶解液使 RNA沉淀溶解,可以立即使用或存放于-80℃长期保存。
    13. RNA 完整性的电泳检测:
     如果需要做 Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。如果是简单检测,可以使用TAE或百奥莱博的SuperBuffer-2 DNA/RNA 两用快速电泳液,但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques,9:558,1990)。普通 DNA上样液不含变性剂,也没经过去 RNase处理,所以最好不要使用。 尤其需要注意的是不要使用TBE进行RNA电泳,因为TBE 所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分,硼*(代"酸")通过与RNA 核糖中的羟基发生络合反应,形成RNA分子内或RNA分子间的络合复合物,使同样长度的RNA 具有不同的泳动速度,电泳条带弥散,同时有大的RNA 络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关,而RNA样品中污染的其他多糖(如植物中提取的RNA)也会参与此反应,使硼*(代"酸")对RNA电泳的影响更复杂,所以TBE 对RNA电泳的影响没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行,最好是避免使用。
     由于细菌细胞中70-80%的RNA为rRNA,后者又由23S(约3700nt),16S(约1700nt)和5S(约100nt)三种组成,所以变性胶电泳后应该在UV下看见三条清晰的rRNA带。由于核酸长度与结合 EB的数量成正比(当然还与RNA的二级结构有关,双链部分结合能力比单链部分强),所以23S rRNA条带的荧光强度一般比16S rRNA条带的荧光强度强2倍。如果这两条rRNA 带不清晰或比例小于此范围则表示 RNA 有降解(因为大的RNA 被酶降解的可能更大)。
    14. RNA产量产率测定:
     将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出 RNA的产量和产率。注意不要将RNA 稀释在 DEPC 水中检测 OD260和OD280,否则光吸收比在 TE中测得的低 10%-15%,因为核酸光吸收跟溶液 pH相关,而 DEPC 水中的DEPC高压分解后产生的CO2与水反应生成碳酸,使溶液 pH降低进而降低 RNA的光吸收。
    15. RNA 纯度测定:
     无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),OD260/OD230一般在2.0-2.3 之间,如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染,但一般不影响 RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除,DNA和多糖污染可以分别用百奥莱博的DNAScavenger和PS Scavenger去除。

    疑难解答:
    Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA吗?
    A:不是。用 TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳 RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加 RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液 RNAload可以使 RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,最好不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
    Q:如何确认和去处除污染的基因组 DNA?
    A:如果怀疑有 DNA污染,可以用 RNase处理 RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组 DNA污染。进一步确认可以使用 PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。

    想要了解更多关于细菌RNA提取试剂盒优惠促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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    细菌RNA提取试剂盒优惠促销关键词:细菌RNA提取试剂盒,BTN51102,Bacterial RNA extraction kit


    ·超快非醇核酸沉淀剂
    编号:BTN60402
    英文名称:Magic Solution DNArc
    规格:30次
    本产品是我司独创的一管式非醇DNA/RNA沉淀剂,其主要特点超快速度,是只需要离心2分钟即可快速沉淀回收溶液中的单双链DNA或RNA(包括探针),可广泛用于DNA/RNA的去盐,去蛋白,反应纯化,浓缩等。

    产品特点:
    1. 明显提高DNA或RNA沉淀的得率和DNA或RNA提取的产率。
    2. 本产品无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性。
    3. 痕量DNA和RNA(20pg)回收率达95~98%。
    4. 不影响酶切、连接、转录、PCR、转化、转染等实验。
    5. 不影响电泳和DNA-蛋白相互作用。

    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。溶液A呈红色,如果颜色发生变化,则表示pH已经改变,请弃之不用。溶液B为无色液体,会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀,用前无需溶化,直接取上清液使用)。

    使用方法:
    1.将1/10体积的溶液A加入到DNA溶液中(包括PCR,酶切反应液等),振荡混匀。如果回收20 Kb以上的DNA片段,混匀时需要温和;对20Kb以下的DNA片段,可以剧烈震荡。
    2.室温静置至少2分钟。此步十分关键,不能省略而直接离心。
    3.13000 g室温离心5分钟后,小心吸弃上清。
    4.加入0.8mL溶液B,充分震荡混匀。
    5.13000 g室温离心2分钟,小心吸弃上清。
    6.再用0.2mL溶液B重复第4-5步一次。
    7.小心吸弃上清后即得纯化的DNA沉淀,加入少量TE或水,充分吹打溶解。如果最后还会有少量白色不溶沉淀,属于正常现象。

    疑难解答:
    Q:电泳为何不能检测到回收的DNA?
    A:最可能原因是各步加入溶液后没有充分震荡混匀,其次是沉淀在各步吸弃上清时候不小心吸走而丢失,三是溶液A的pH发生改变,四是DNA溶液的盐离子浓度或pH值太高。
    Q:电泳时为何有残留荧光物在加样孔中?
    A:可能是琼脂糖凝胶中的杂质吸附的DNA,吸取 DNA样品时最好先短暂离心,只取上清液。这些不溶杂质一般不影响后续反应。使用高纯度的琼脂糖可以减少杂杂质的污染。百奥莱博一般使用 OXOID的琼脂糖,得到的DNA可以用于常见的分子生物学后续反应。
    Q:本产品与贵公司的Magic Gel DNArc是否相同。
    A: Magic Gel DNArc 有离心管和特殊的融胶液,专门用于从胶中回收DNA;本产品用于从反应液中纯化回收DNA,不需要另外提供离心管和融胶液。Magic Gel DNArc的溶液B和溶液C 分别与本产品的溶液A和溶液B类似但浓度不完全相同,建议不要互用。


    细菌RNA提取试剂盒优惠促销关键词:细菌RNA提取试剂盒,BTN51102,Bacterial RNA extraction kit

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