DNA碱性胶上样液(国产,进口)

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

DNA碱性胶上样液(国产,进口)是高品质的核酸电泳和回收产品，由北京百奥莱博供应，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多DNA碱性胶上样液等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：DNA碱性胶上样液(国产,进口)
编号：BTN101222
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：1.5mL
英文名：DNAload for Alkaline Gel
本品是6×的DNA碱变性琼脂糖电泳上样液，含有碱溶液、助沉剂、染料等成分。

产品特点：
1. 即开即用，不需要制备各种溶液。
2. 使用简单，电泳时，先将DNA样品与本上样液1：5混合即可直接上样。
3.还可以用于DNA碱变性琼脂糖电泳。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

关于DNA碱性胶上样液(国产,进口)的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·T4 DNA聚合酶
编号：BTN120411
英文名称：T4 DNA Polymerase
规格：50U
在模板及引物存在的条件下，催化与模板互补的脱氧核苷酸依次选择性地连接在引物的3´-OH末端上的反应。本酶还具有单链DNA特异性的3´→5´核酸外切酶活性，该活性比Klenow Fragment强100～1000倍，也作用于双链DNA，在dNTP存在条件下表现出聚合酶活性，当dNTP用尽时转为3´→5´核酸外切酶的活性。本酶不含 5´→3´的核酸外切酶活性。

产品特点：
1．利用较强的3´→5´的核酸外切酶活性，通过置换合成(Replacement synthesis)从 DNA片段的3´末端进行标记。
2．DNA末端的平滑化。
3．通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点。

产品组成：

 

成份	规格
T4 DNA聚合酶	10μL
10×Buffer	1mL
0.1% BSA	500μL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以热变性小牛胸腺 DNA 为模板/引物，在37℃、pH8.8的条件下，30分钟内使10nmol全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

纯度：2U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

备注
1．本酶的最适 pH为8～9，在pH7.5及pH9.7时活性约为50%。
2．活性的表达需要Mg2+的存在。为了获得最大活性，还需要SH基的还原剂存在。
3．整个反应体系中的离子强度超过100mM时活性将被抑制。
4．本酶易受模板 DNA高级结构的影响，T4 gene 32产物可以显著提高聚合酶活性，而 3´→5´的核酸外切酶活性则完全被抑制。
5．在10×反应缓冲液中直接加入0.1% BSA时会产生大量白色沉淀，因此在调制反应液时请按下列顺序添加试剂：dH2O→10×反应缓冲液→0.1% BSA→底物DNA。


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·酵母DNA提取试剂盒
编号：BTN130990
英文名称：Yeast DNA extraction kit
规格：50次

·动物线粒体纯化试剂盒B(精提)
编号：BTN111207B
英文名称：Animal Mitochondria Purification Kit(B)
规格：5次
线粒体是非常重要的细胞器，它不但跟很多人类疾病相关，而且还是母系遗传研究的重要材料。对线粒体进行遗传研究和生化研究都需要纯化线粒体。本产品可用于纯化动物细胞线粒体的试剂盒。

产品特点：
1．即开即用，用户不需要自己配制各种溶液，优化各种条件。
2．有粗提和精提两个选择，但是精提需要超速离心机。粗提所得线粒体可以直接用于蛋白分析(SDS-PAGE、Western Blot、ELISA等)、蛋白组分析和线粒体DNA纯化。精提线粒体可以用于偶联分析和体外线粒体蛋白合成等实验。
3．本产品一次可以处理约2×108个培养细胞，30mg培养细胞(相当于15瓶150mm培养细胞)可以纯化到到0.5-1.5mg线粒体。
4．本产品适用于各种动物悬浮培养细胞和贴壁培养细胞，不能用于动物实体组织。
5．提供线粒体染液，可以在操作中随时监测纯化过程中线粒体的完整性。

试剂盒组成：

粗提型(BTN111207A)

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	250ml
蔗糖	80g
詹纳斯绿B染色液(0.2%)	1ml

精提型(BTN111207B)

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	250ml×2
蔗糖	100g
詹纳斯绿B染色液(0.2%)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，保存期限一年。

使用方法：
注意：线粒体膜对温度高度敏感，所以整个操作必须在冰上或冷室进行，所要用到的溶液和离心管都必须预先冷却，否则线粒体容易破裂。

一、准备工作(此步骤同柱式动物线粒体DNA提取试剂盒中线粒体提取步骤)。未用完的下列溶液需要-20℃保存，否则容易长菌。下次使用前务必让沉淀溶解并摇晃均匀。
1．将溶液A和溶液B放冰上预冷待用。
2．配制1.7M高比重溶液(仅限BTN111207B精提型试剂盒，BTN111207A粗提型试剂盒不需要配制此溶液)：36克蔗糖用溶液B溶解并定溶到60mL，冰上预冷待用。
3．配制1.0M低比重溶液，BTN111207A粗提型试剂盒需要100mL，配制方法是将34克蔗糖用溶液B溶解并定溶到100mL，冰上预冷待用。111207B粗提型试剂盒需要150mL，配制方法是将51克蔗糖用溶液B溶解并定溶到150mL，冰上预冷待用。
4．配制线粒体重悬液，BTN111207A粗提型试剂盒需要200mL，配制方法是将150mL溶液B和50mL 1.0M低比重溶液混合；BTN111207B精提型试剂盒需要300mL，配制方法是将225mL溶液B和75mL 1.0M低比重溶液混合，即得300mL 线粒体重悬液，冰上预冷待用。

二、线粒体粗提(此步骤同柱式动物线粒体DNA提取试剂盒中线粒体提取步骤)
5．如果提取材料是单层细胞，先用60mL自备的PBS缓冲液洗涤2×108个培养的单层细胞，共洗涤2次。然后用塑料刮匙刮下细胞，重悬在60mL PBS缓冲液中。如果是悬浮细胞，则1000g 4℃离心10分钟收集2×108个细胞，再用60mL PBS缓冲液洗涤2次，最后将细胞重悬在60mL PBS缓冲液中。
6．用平甩转子(swinging-bucket rotor)离心机1000 g 4℃离心10分钟，吸弃上清，保留细胞沉淀。
7．加入5倍体积(以细胞沉淀的体积为基数)的预冷的溶液A，轻柔重悬细胞。
8．冰上放置4-5分钟。注意：冰浴时间不要超过5分钟。
9．如果是成纤维细胞，由于其难以裂解，可将细胞重悬液在-80℃放置20-30分钟后再化冻，然后进入下步操作。如果不是成纤维细胞，则直接进入下步操作。
10．将细胞重悬液体转移到预冷的Dounce玻璃匀浆器中(工作体积为10-15mL，间隙为0.12 mm，最好是玻璃材质，否则线粒体产率会降低)匀浆适当次数。细胞株不同，其最适匀浆次数不同，一般需要40次-60次左右。匀浆是线粒体纯化最关键的步骤，故匀浆前最好先通过预实验确定最适匀浆次数，方法是每匀浆5-10次后，取2-3μl匀浆液到载玻片上，然后在相差显微镜下观察，完整细胞数量降低到20%以下为佳。
11．加入1/3体积的、预冷的1.0 M低比重溶液，轻柔混匀。
12．用平甩转子离心机4℃ 1000 g离心10分钟。沉淀含残留完整细胞、细胞碎片和细胞核，上清液含线粒体。
13．转移上清液到离心管中，冰上放置。在显微镜下检测上清液中线粒体的完整性。具体做法是先滴50μL左右上清液到载玻片上，再滴入50μl詹纳斯染液绿B染色液20分钟，油镜下观察，蓝绿色颗粒状物即为线粒体。
14．用固定角度转子(fixed-angle rotor)离心机4℃ 15000g离心15分钟，弃上清，所得棕黑色沉淀即为粗提线粒体沉淀。
15．用10mL线粒体重悬液重悬线粒体，4℃ 15000g离心15分钟，弃上清。
16．重复上步一次。
17．最后用适量的线粒体重悬液重悬线粒体，可用于各种后续实验(本试剂盒不提供相关试剂)，如果用于下面的精提操作，则用10mL线粒体重悬液重悬。

三、线粒体精提(需要超速离心机)
18．在跟超速离心机匹配的50mL的离心管中，加入10mL预冷的高比重溶液，再在上面加上10mL预冷的低比重溶液，最后再加上10mL线粒体粗提液。
19．70000g 4℃离心40分钟，线粒体将位于高比重溶液和低比重溶液之间区域。
20．小心用广口吸管吸出线粒体到新的离心管中，加入等体积的线粒体重悬液。
21．用平甩转子离心机1000 g 4℃离心10分钟，吸弃上清，保留线粒体沉淀。
22．用10mL线粒体重悬液重悬线粒体，在平甩转子离心机上4℃ 1000g离心10分钟，吸弃上清，保留线粒体沉淀。
23．再重复上步一次。
24．最后用适量线粒体重悬液重悬线粒体，得到线粒体精提液。可以直接用于Lowry法蛋白浓度测定，也可以用于其他后续实验。


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ARB13435 鸡可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)含量分析 Chicken soluble intercellular adhesion molecule-1,sicam-1 ELISA KIT
53123-88-9 Rapamycin 雷帕霉素
磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒 
1,4-二甲氧基* Bluo-Gal 150-78-7
7724-76-7 异戊烯基腺嘌呤核苷(IPA)
ARB12179 大鼠白细胞介素13(IL-13)酶联免疫定量检测 Rat interleukin13,IL-13 ELISA KIT
BTN131061 谷胱甘肽S转移酶 GST(Glutathione S-Transferase)
BTN131122 考马斯亮蓝R-250 Coomassie Blue R-250
昆布多糖 Sodium glycollate 9008-22-4
H0801 绵羊血浆(去红细胞、无菌过滤)
酒石酸** Glyphosine 526-94-3
Kodak F-5定影液   500ml
F030225 HRP标记兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG*HRP
52-89-1 L-Cysteine HCL L-盐*(代"酸")半胱*酸
ARB13205 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)Elisa定量检测 Mouse brain derived neurotrophic facor,bdnf ELISA KIT
ARB13412 鸡17-酮类固醇(17-KS)elisa检测 Chicken 17-ketosteroids,17-ks ELISA KIT
BOC-N-β-Trityl-L-天门冬酰胺 Aminomethyl resin 132388-68-2
ARB11439 人真胰岛素(TI)elisa检测操作说明书 Human true insulin,ti ELISA KIT
甲基纤维素溶液(2×,1.8%)   250ml
NF-266 APOA-1,APOB标准血清
NF-257 冻干抗人PA血清

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