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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
275
- 英文名:
Stable SDS-PAGE Running Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉)批发,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉)批发
规格:20L
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Stable SDS-PAGE Running Buffer
本产品是专门用于长效SDS-PAGE电泳的缓冲液,加水定容后即可使用,简便快捷。
本产品分A、B两种型号。A型电泳液适合30 KD以上蛋白,B型电泳液适合2-30KD蛋白。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
想要了解更多关于长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉)批发的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉)批发关键词:BTN100912A,干粉,>30 KD,长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉),Stable SDS-PAGE Running Buffer
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长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉)批发关键词:BTN100912A,干粉,>30 KD,长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉),Stable SDS-PAGE Running Buffer
·凋亡DNA提取试剂盒
编号:BTN130812
英文名称:Apoptotic DNA extraction kit
规格:24次
细胞凋亡是生命个体中的调控基因为了维持个体生命,调控细胞进行新陈代谢,促使不需要的细胞或者具有危险性的细胞自我凋亡(自杀)的现象,与细胞的发生、分化、生理现象(特别在免疫方面)有着密切关系。细胞凋亡时,染色体DNA以核小体为单位(185bp)进行DNA片断化产生DNA Ladder,这些被片断化了的DNA片段,可以使用电泳的方法进行检出。本试剂盒能够从培养细胞中选择性地提取片断化DNA,能够最大限度地抑制起妨碍作用的完整的染色体DNA的混入,并可以通过电泳法进行高效检出。
产品特点:
1.操作简便:使用Ready-to-Use型试剂。
2.高灵敏度:能够高灵敏度地检出凋亡细胞的片断化DNA。
3.高特异性:抑制完整的染色体DNA的混入,选择性地提取片段化DNA。
4.快速操作:整体操作约需2.5小时。
5.定量性:与荧光色素组合可以对片断化DNA进行定量。
6.安全性:不使用*酚*仿等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 120ml |
| 溶液B | 1ml |
| 溶液C | 120μl |
| RNase A溶液(2mg/mL) | 60μl |
| Proteinase K溶液(10mg/mL) | 30μl |
| 微量核酸沉淀剂 | 3ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.冰上操作,将细胞样品(106-107)重悬于0.5mL Hanks平衡盐溶液(自备)或其他常用细胞缓冲液中。
2.将细胞重悬液与5mL溶液A混合,轻柔颠倒混匀后冰上放置4小时。如果暂时不用,可在-20℃最长保存四周。
3.800g离心5分钟,彻底移弃上清。
4.在细胞沉淀中加入40μL溶液B重悬细胞沉淀,室温放置至少30分钟,期间摇动数次。为方便离心,可将细胞重悬液转移至新的0.5mL或1.5mL Eppendorf离心管中,
5.800g离心5分钟,将上清移入到新的Eppendorf管中,并在SpeedVac上真空离心浓缩15分钟。
6.向浓缩物中加入5μL溶液C和2.5μl RNase A溶液(2mg/mL),混匀后37℃保温30分钟。
7.再加入1μl Proteinase K溶液(10mg/mL)溶液,37℃保温30分钟。
8.加5μl电泳上样缓冲液(自备),常规0.8%琼脂糖电泳分离、EB染色并观察电泳条带。
9.如果所得凋亡DNA溶液需要纯化(溶液中有proteinase K等),需要继续纯化,则加入50μL酚*仿混合液(自备),震荡3分钟混匀,13000g离心3分钟后转移上清到新离心管中,再加入2倍体积(约100μL)微量核酸沉淀剂,混匀后13000g离心15分钟,弃上清,再用1mL 75%的乙醇洗涤一次,空气放干后加入适当体积的水或TE溶解沉淀,所得溶解即凋亡片段DNA溶液。
使用效果:
使用本产品提取细胞DNA效果图。M为DNA Marker,最大条带1.3Kb。
1为正常非凋亡细胞DNA。2为凋亡细胞DNA。
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文献和实验电泳过程同样很重要啊。电转的时候其实只要预染marker只要转到膜上了,那么你的相应分子量的目的蛋白也就转过去了,所以这就是你摸索条件的指示带。3、电泳过程中有推荐TRICINE-SDS-PAGE胶来进行电泳,会更有利于小分子量蛋白的分离,研读了一些文献,这个效果应该还是很肯定的,但是鄙人没有做过这种电泳,所以给不了什么经验,我最终还是用普通SDS-PAGE胶做出来的,不过鉴于我的蛋白分子量是11KD,那么假如你是几KD甚至更小分子量的多肽,那么还是建议你用TRICINE-SDS-PAGE胶来电
【专题讨论】Tricine-SDS-PAGE胶的使用方法与心得(可分离8KD--280KD)
先说一下Tricine胶的好处。 Tricine胶比较容易将样品压平,具体原因我也没有搞清楚,但可以肯定的是这种胶跑出来的Marker又细又直,同样,显出来的条带也压的很好。与普通的SDS-PAGE胶跑出来的结果相比,Marker扩散没有那么厉害,各泳道条带间隔明显,不像普通胶的条带容易连到一起。反正跑出来的条带就是很漂亮。 Tricine-SDS-PAGE胶的配方:(我一直用的就是10%这个浓度,把8KD和280KD都做出来了) 分离胶 积层胶 ddH2O 1.85 mL
等的溶液,可节省科研人员的工作量。配制方法 1.在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5%的双蒸水。2.在室温(20℃到30℃)的水中加入干粉培养基,轻轻搅拌,不要加热。3.水洗包装袋的内部,转移全部的痕量干粉到容器内。4.加NaHCO3到培养基中。5.用双蒸水稀释到想要的体积,搅拌溶解。注意不要过分搅拌。6.通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值,由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3,因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0.2到0.3。培养基在过滤前要保持密封。
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