大片段Bst DNA聚合酶折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")大片段Bst DNA聚合酶折扣价，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：大片段Bst DNA聚合酶折扣价
编号：BTN100209
规格：800U
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
Bst DNA聚合酶大片段是将缺少5´→3´外切核酸酶结构域的Bacillus stearothermophilus(嗜热脂肪芽孢杆菌)DNA聚合酶基因在E.coli中表达纯化而得。

产品特点：
1. 5´→3´DNA聚合酶活性，但不具有5´→3´外切核酸酶活性，因此没有纠错功能。
2. 嗜温性，最适反应温度为68℃，建议反应温度不要超过70℃。
3. 强链置换能力，可以用于DNA链置换反应和LAMP扩增。还可用于68℃DNA测序(该条件尤其适用于富含GC的模板和纳克级的模板)。
4. 不能用于热循环测序或PCR，80℃ 10分钟即可失活。

产品组成：

 

成分	规格
Bst DNA聚合酶(8U/μL)	100μl
10×Bst Buffer	1.5ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存、有效期一年。长期贮存需补加100μg/mL BSA或0.1% Triton X-100。

1×Bst DNA聚合酶Buffer的组成：20mM Tris-HCl(pH8.8 @ 25 ℃)，10mM KCl，10mM(NH4)2SO4，2mM MgSO4，0.1% Triton X-100

活性定义及检测条件：1 U 指65℃条件下，30分钟内使10nmoL的dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。活性检测条件为：50mM KCl，20mM Tris-HCl(pH8.8),10mM MgCl2，30 nM M13mp18 ssDNA，70 nM M13 测序引物(-47)24 mer，200μm dATP，200μm dCTP,200μm dGTP,100μm[3H] dTTP，100μg/mL BSA和酶，65℃温育。

贮存条件：50mM KCl，10mM Tris-HCl(pH7.5)，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.1% Triton X-100和50%甘油，贮存于-20℃。

关于大片段Bst DNA聚合酶折扣价的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·中pH缓冲液套装
编号：BTN100829
英文名称：Medium pH Buffer Set
规格：30次
Native-PAGE，非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳是目前电泳法分离非变性蛋白质的主要方法，实验过程杜绝变性剂接触目的蛋白质，常用于同工酶的鉴定和提纯。本产品可快速制备分离胶，不含SDS，并确保配制分离胶的精确pH值。

产品组成：

成份	规格(30次*)
4×浓缩胶配胶液(pH5.5)	100ml
4×分离胶配胶液(pH7.5)	200ml
中pH电泳液(pH7.0)	10L(干粉)
5×中pH上样液	1ml
使用手册	1份

*注：1次是指的一次mini-Gel电泳

储存条件：常温运输及保存(5×中pH上样液需要-20℃保存)，有效期为一年。

·PCR法DNA探针标记试剂盒
编号：BTN90604A
英文名称：PCR DNA Labeling Kit
规格：5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。


大片段Bst DNA聚合酶折扣价关键词：BTN100209,大片段Bst DNA聚合酶,Bst DNA Polymerase，Large Fragment


·环状DNA全基因组扩增试剂盒
编号：BTN100947
英文名称：Circular DNA Whole Genome Amplification Kit
规格：30次
本产品基于WGA的、专门用于环状DNA(如质粒)扩增的全基因组扩增试剂盒，优化后的反应体系对环状DNA全基因扩增有良好的效果，可以方便、简单、快速、经济的得到环状DNA样品的扩增产物。

产品特点：
1. 线状DNA清除剂可以清除残留的线状DNA，保留环状DNA，包括超螺旋DNA、带裂口(nick)的环状DNA和带缺口(gap)的环状DNA。
2. WGA采用基于phi29 DNA聚合酶的MDA法，能得到平均长度在10Kb以上的扩增产物，还具有高产量和高保真性的特点。
3.可以将环状DNA扩增上万倍，是保留珍贵痕量DNA样品的唯一办法。
4.可使用各种环状DNA样品，包括质粒DNA，环状病毒DNA，线粒体DNA等。
5. 操作简便快捷，恒温(30℃)反应，无须PCR仪即可实现扩增。
6.产物可用于多种后续试验，包括酶切、克隆、文库构建、测序、基因芯片分析等。

试剂盒组成：

成分	规格
线状DNA清除剂溶液A	100μl
线状DNA清除剂溶液B	30μl
WGA DNA变性液	75μl
WGA溶液A	150μl
WGA溶液B	300μl
Phi29 DNA聚合酶(10U/μL)	15μl
超纯水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、去除环状样品中的线状DNA(线状DNA量不超过5μg)
1.在干净塑料离心管中，按下表加入各成分(30μL体系)：

成分	样品	正对照	负对照
自备DNA样品(1-10μg)	(样品)	(用环状DNA)	(用线状DNA)
线状DNA清除剂溶液A	3μL	3μL	3μL
线状DNA清除剂溶液B	1μL	1μL	1μL
	补水到30μl	补水到30μl	补水到30μl

2. 加200μL石蜡油后，37℃保温16小时。注意：保温时间过短可能会形成短的DNA片段，影响后续反应，所以最好保温16小时。必须加石蜡油，否则长时间保温期间水分会蒸发到管盖上。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不加石蜡油。
3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。
4.电泳检测酶切效果。本产品不清除带裂口(nick)和带缺口(gap)的环状DNA(如质粒)，所以这些片段将不会消失。如果所含线状DNA超过5μg，则需要用非酶线性DNA清除剂清除或者稀释后用本法处理。
5. WGA扩增需要100pg-100ng的环状DNA，一般环状DNA的浓度都高于此范围，则需用超纯水将DNA稀释到40pg-40ng/μL，稀释过程中线状DNA清除反应中的成分也相应稀释，故一般不会影响后续WGA反应。如果样品中DNA浓度过低，则需要用微量核酸沉淀剂(需另买)沉淀后再溶解到适当体积的超纯水中，沉淀过程中线状DNA清除反应中的成分也被去除。

二、碱变性(对环状DNA，碱变性法一般优于热变性法，推荐用户使用)
6.在PCR塑料管中加入不超过2.5μL环状DNA样品。如果体积不足2.5μL，则用超纯水补齐。最好同时做一个不加样品的阴性对照。
7. 加入等体积(2.5μL)WGA DNA变性液，轻柔吹打混匀。
8.室温放置2分钟变性。
9. 加入5μl WGA溶液A，轻柔吹打混匀后立即进入第15步。注意：热变性的DNA样品不能久存，否则DNA会缓慢复性，所以必须马上进入后续处理。

三、热变性法
10.在PCR塑料管中加入1-5μL纯化好的环状DNA，用量在100pg-100ng之间。最好同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
11. 加入5μL WGA溶液A，轻柔吹打混匀。
12. 如果不足10μL，补水到10μL。
13.在PCR仪器上 95℃加热变性3～5分钟，其间最好打开PCR仪的热盖。也可以使用95℃水浴加热3分钟。
14. 热变性结束后短暂离心(将蒸发到管壁的水甩下)，然后将样品管在冰上放置至少5分钟，立即进入第15步。注意：热变性的DNA样品不能久存，否则DNA会缓慢复性，所以必须马上进入后续处理。

四、WGA反应
15.在10μL碱变性或热变性的DNA样品中，加入10μL的WGA溶液B，轻柔吹打混合均匀。
16. 加入0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)，轻柔吹打混合均匀。
17. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，最好在样品管中加入50μL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。
18. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
19. 立即取2-5μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
20.扩增的DNA可以用于后续试验或放冰箱长期保存。


大片段Bst DNA聚合酶折扣价关键词：BTN100209,大片段Bst DNA聚合酶,Bst DNA Polymerase，Large Fragment

BTN130401 柱式海洋动物DNAOUT Column Marine Animal DNAOUT
ARB10684 人杀伤细胞凝集素样受体(KLR)elisa检测 Human killer cell lectin-like receptor,klr ELISA KIT
植物基因组DNA提取试剂盒 
ARB10890 人抗副流感病毒IgG抗体(Anti-PIV IgG)血清中含量检测 Human poliomyelitis virus,pv-igG ELISA KIT
乙酸甲脒 DOX 3473-63-0
ARB13832 猪D二聚体(D2D)elisa测定使用说明书 Porcine d-dimer,d2d ELISA KIT
D-*甘*醇 IBA-K 56613-80-0
ARB12772 小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)定量分析 Mouse P-Selectin ELISA KIT
ARB10061 人B细胞连接蛋白(BLNK)ELISA检测服务 Human b-cell linker protein,blnk ELISA KIT
ARB10095 人D-乳酸脱*酶(D-LDH)含量分析 Human d-lactate dehydrogenase,d-ldh ELISA KIT
去离子水(无菌)   100ml|500ml
PY01-062  肌醇  25克  
2-甲基吲哚 TMB-PS 95-20-5
ARB10320 人中期因子(MK)ELISA代测服务 Human midkine,mk ELISA KIT
ARB11331 人胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)elisa检测操作说明书 Human cytosolic phospholipase a2,cpla2 ELISA KIT
BL1121 柠檬酸*缓冲液0.1mol/L， pH4.5，无菌溶液
ARB12370 大鼠肾上腺素(EPI)定量分析 Rat epinephrine/adrenaline,epi ELISA KIT
BTN131152 兔抗鸡IgY,辣根过氧化物酶标记 Rabbit Anti-Chicken IgY,HRP Conjugate
ARB12685 大鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)尿液中含量检测 Rat skeletal muscle actinin-α,sm actinin-α ELISA KIT
BL1276 4×非变性蛋白上样缓冲液
阿利新蓝染色液-A液(pH2.5)   100ml

我公司正在打折促销工具酶全系列产品，恭候您的咨询选购大片段Bst DNA聚合酶折扣价。