Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)厂商在内的抗体抗原产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)厂商
英文名：Alexa Fluor 647-labeled Goat Anti-Mouse IgG(H+L)
编号：YT863
规格：0.1ml
产地：国产|进口
本Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)用于免疫荧光染色。

Alexa Fluor 647是一种较常用的非常明亮的远红外荧光探针。通常该荧光探针被激发后肉眼不能观察到激发出来的长波长荧光，但可以被很多成像系统例如激光共聚焦显微镜等所检测到。Alexa Fluor 647的荧光光谱与Cy5比较接近。Alexa Fluor 647的荧光光谱与Cy5比较接近。Alexa Fluor 647的吸收峰651nm、发射峰667nm。

本抗体为用纯化的小鼠IgG免疫山羊，然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化，并经过人IgG、马IgG、牛IgG(bovine IgG)、兔IgG和猪IgG吸附纯化的优质二抗。对人IgG、马IgG、牛IgG(bovine IgG)、兔IgG和猪IgG几乎没有结合能力。特别适合于对于二抗种属特异性要求比较高的荧光染色实验。

本Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)用于免疫荧光染色时的推荐稀释比例为1:500。实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节荧光标记二抗的稀释比例，推荐的调节范围为1:200-1000。

本抗体如果用于常规的免疫染色，以每次检测需1毫升1:500稀释的荧光标记二抗计，至少可以检测50次。如果适当重复使用已经使用过的荧光标记二抗，至少可以多检测150-250次。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L)厂商关键词：Alexa Fluor 647标记抗小鼠IgG(H+L)二抗,Alexa Fluor 647标记二抗,山羊抗小鼠二抗,小鼠IgG(H+L)抗体

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·乙酰乳酸合成酶
编号：YT556
英文名称：Acetolactate Synthase (Crude Enzyme)
规格：100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的乙酰乳酸合成酶，并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液，用于催化一分子丙*(代"酮")酸脱羧并与另一分子丙*(代"酮")酸缩合成一分子乙酰乳酸，从而导致侧链*基酸缬*酸、亮*酸和异亮*酸的生物合成。

CAS：9027-45-6
外观：半透明黄色溶液
酶促反应：2 pyruvate = 2-acetolactate + CO2
储存条件：-20℃，有效期1个月。

注意事项：
1. 由于本产品需新鲜制备，在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活，所以收到酶液后请根据需要进行分装，并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长，酶活力会有一定程度的下降，收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生，融化后混匀即可，不影响正常使用。

·Ad-mCherry-GFP-LC3B
编号：YT160
英文名称：adenovirus expressing mCherry-GFP-LC3B fusion protein
规格：1ml|10×1ml
本品是一种可以表达mCherry-GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒，可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬的检测。

LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族，其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止，LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个*基酸残基的蛋白，在蛋白合成后，被Atg4所酶切而失去了C端的22个*基酸蛋白，从而暴露出C端的甘*酸，人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中，其C端暴露的甘*酸经过一个类似泛素化的过程，以ATG7为E1样激活酶， 以ATG3为E2样连接酶，以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶，在C端甘*酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同，LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后，自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切，而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大，但由于其极强的疏水性，在SDS-PAGE电泳时，LC3B II比LC3B I迁移得更快，其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后，在非自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中；而在自噬的情况下，荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上，以斑点的形式表现出来。

自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关，在饥饿等不利的环境条件下， 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分，为细胞的生存提供能量及原材料，促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用，自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。

Ad-mCherry-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒，感染后能够在靶细胞中有效表达红色荧光蛋白mCherry、绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白，呈现明亮的红色和绿色荧光，可以用于细胞自噬的检测。

自噬小体在与溶酶体融合过程中，溶酶体内的酸性环境会导致GFP荧光淬灭，这为追踪GFP-LC3B的细胞定位增加了难度。mCherry是一种来自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的单体红色荧光蛋白，当其与GFP进行LC3B的共同标记时，在GFP被溶酶体酸性环境所淬灭的情况下，可以发出红色荧光的mCherry因为其卓越的稳定性而被保留。因此，通过融合表达mCherry-GFP-LC3B蛋白，可以非常有效地追踪自噬过程。在用Ad-mCherry-GFP-LC3B腺病毒感染细胞后，在非自噬的情况下，荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B以弥散的黄色荧光(mCherry和GFP的综合效果)形式存在于细胞质中；而在自噬的情况下，荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上，以黄色斑点的形式表现出来(LC3B dot or punctae)；当自噬体与溶酶体融合后，因GFP荧光的部分淬灭而以红色斑点的形式表现出来。

腺病毒感染细胞后为瞬时表达，通常不会与基因组DNA重组，不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后，有效表达时间通常不少于7天，不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。

百奥莱博的Ad-mCherry-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统，感染普通的细胞后不能进行扩增和重组，从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。

本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。

本产品的滴度≥1×108 pfu/ml，使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞，每孔50万细胞计算，共可以感染10个孔；如果按照20 MOI感染24孔板的细胞，每孔10万细胞计算，共可以感染50个孔。如果MOI值提高，则相应可以感染的孔数会减少；如果MOI值降低，则相应可以感染的孔数会增加。

注意事项：
1. 反复冻融会降低病毒滴度，如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后，如果在一周内使用，可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年，可能会导致滴度下降，此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体，请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1)，没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病，可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。

储存条件：-20℃，有效期1～2个月。

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