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754
- 英文名:
First Strand cDNA Synthesis Kit II (RNase H minus)
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)说明书,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)
品牌:百奥莱博
英文名:First Strand cDNA Synthesis Kit II (RNase H minus)
规格:20次|100次
产地:国产|进口
编号:YT397
本试剂盒是一种采用了经过改造和优化的M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394),用于以总RNA、mRNA等为模板反转录合成cDNA第一链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂。
使用本试剂盒合成的第一链,可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、 cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。
使用本试剂盒可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1),反转录的最大长度可以超过10 kb。在采用M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394)的情况下,由于缺失了RNase H酶活性,RNA和DNA双链复合物中的RNA不会被降解,这样反转录出来的cDNA的长度就会更长,并且产量更高。

使用本试剂盒对总RNA反转录后,对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反转录。
本试剂盒中的M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394)热稳定性高,最适反应温度为42-45℃,但当温度达到50℃时仍具有很高活性,且可获得较高产量的cDNA。
试剂盒中提供了RNase Inhibitor,确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得较好的反转录效果。
试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物,前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录,后者进行反转录时不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA第一链的合成。
本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应时足够进行20个cDNA第一链样品的合成。
产品组份:
M-MLV反转录酶II(RNase H-)——————————20μl
Reaction Buffer (5X)————————————0.1ml
RNase Inhibitor (20U/μl)——————————20μl
dNTP Mix (10 mM each)————————————40μl
Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl)——————20μl
Random Hexamer Primer (0.2μg/μl)——————20μl
DEPC-treated Water——————————————0.3ml
储存条件:-20℃。
关键词:RNase H-,cDNA第一链合成试剂盒II,cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-),First Strand cDNA Synthesis Kit II (RNase H minus),YT397
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| 编号 | 名称 |
| YT429 | *苄青霉素*溶液(100mg/ml)(细菌培养用) |
| YT638 | 磷酸化Akt(Thr308位点)抗体 |
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| YT247 | PPAR凝胶迁移突变探针(10μM) |
| YT046 | His标签蛋白纯化试剂盒 |
| YT250 | 生物素标记SP1凝胶迁移探针(0.2μM) |
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| YT833 | p35/p25抗体 |
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| YT151 | Bcl-2抗体 |
| YT228 | NF-κB凝胶迁移探针(1.75μM) |
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| YT343 | MAPKK抑制剂(PD 98059) |
| YT199 | AP2凝胶迁移探针(10μM) |
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| YT158 | 细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE) |
| YT128 | 增强型CCK-8试剂盒 |
| YT581 | L-乙酰*基酸水解酶 |
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| YT807 | IKKα抗体 |
| YT923 | EGFR抑制剂(AEE788) |
| YT800 | 二甲基Histone H3(Lys4位点)抗体 |
| YT142 | Caspase 6 活性检测试剂盒 |
| YT863 | Alexa Fluor 647标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| YT526 | YTM 总RNA抽提试剂(Trizol法) |
| YT242 | p53凝胶迁移突变探针(10μM) |
| YT108 | DyLight 405抗兔免疫荧光染色试剂盒 |
| YT300 | 超氧化物检测试剂盒 |
| YT732 | 小鼠抗Insulin抗体 |
| YT539 | L-乳酸脱*酶 |
| YT745 | 兔抗N-Cadherin抗体 |
| YT428 | *苄青霉素*(细菌培养用) |
| YT400 | 核酸酶清除剂(核酸酶喷雾清除剂) |
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
性,与目的模板竞争引物和酶等,可能导致PCR扩增效率的下降,影响定量结果的准确性;另外,并不是每个基因都能在相邻的且大小合适的外显子上找到合适的跨内含子引物,所以,很大部分实验需要在一个外显子上设计引物,这时就必须经过去除基因组DNA步骤,才能得到准确可靠的结果。 传统基因组DNA去除的方法采用对RNA进行处理,由于引入了蛋白(DNase I),后续需要进行氯仿抽提纯化,操作繁琐,耗时长,RNA的回收率低。TIANGEN公司的FastQuantcDNA第一链合成试剂盒(KR106
的同聚核苷酸锚定序列。利用第二个巢式GSP和一个与同聚核苷酸尾巴可以退火的锚定引物来扩增cDNA的5'末端。用SUPERSCRIPTTM II RT从mRNA复制成cDNA用RNase H和RNase T1降解RNA用GLASSMAXò Spin Cartridge纯化cDNA用dCTP和TdT给纯化的cDNA加尾用精简的锚定引物和巢式GSP2 PCR扩增dC加尾的cDNA 用AUAP和巢式GSP重新扩增初步PCR产物最初的5'RACE系统是按照这个方法进行的,它首先利用SUPERSCRIPT™
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