cDNA第二链合成试剂盒现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应cDNA第二链合成试剂盒现货供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：cDNA第二链合成试剂盒现货供应
编号：BTN131005
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：Second Strand cDNA Synthesis Kit
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链。

产品特点：
1. 即开即用，含有合成cDNA第二链的所有试剂。
2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
5×cDNA第二链合成缓冲液	480μl
20×cDNA第二链合成酶混合液	120μl
0.2 M EDTA溶液	120μl
超纯水	2ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
一、合成cDNA第一条链
本试剂盒不提供cDNA第一链合成试剂，用户需自备相关试剂合成cDNA第一链。
二、合成cDNA第二链
1.在冰浴上向已经完成合成cDNA第一条链的反应体系中依次加入下表试剂：

成分	用量
cDNA第一链合成反应液	10μl
超纯水	48μl
cDNA第二链合成缓冲液	16μl
cDNA第二链合成酶混合液	4μl
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时
自备的T4 DNA聚合酶	2μl
轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟
0.2M EDTA溶液	4μl

注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μl检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。

关于cDNA第二链合成试剂盒现货供应的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP )
编号：BTN151203
英文名称：Biotin-dUTP Solution
规格：25μL

·环孢霉素A
编号：BTN120687
英文名称：Cyclosporin A Solution
规格：1mL
本产品为浓度为10mg/mL的环孢霉素A溶液。环孢霉素A(Antibiotic S 7481F1；环孢多肽A ；环孢灵；山地明)，分子式: C62H111N11O12 ，分子量:1202.61 ，CAS号: 59865-13-3，环孢霉素A是由11个*基酸组成的环状多肽，它的第1、2、3、11位*基酸残基上可形成亲水性免疫抑制活性位点。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·重组蛋白G
编号：BTN131080
英文名称：Streptococci protein G
规格：1mg
本品为重组蛋白G，纯度＞90%，带His标签，分子量10kD。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

·胰蛋白酶(质谱级)
编号：BTN131029
英文名称：Trypsin，MS Grade
规格：100μg
胰蛋白酶是丝*酸蛋白酶，可特异性地切开赖*酸和精*酸残基的羧基端。胰蛋白酶这种严格的特异性是蛋白质鉴定的基础。天然胰蛋白酶易于自我水解，产生假胰蛋白酶，后者特异性较广，含有胰凝乳蛋白酶样活性。存在于胰蛋白酶制剂中的这些自我水解产物能产生多余的肽片段，从而干扰质谱检测到的片段的数据分析。

本产品是质谱分析级胰蛋白酶，其能提供最大限度的灵敏度。胰蛋白酶中的赖*酸残基已经过还原甲基化修饰，成为活性高且稳定的分子，抗拒自我水解的性能特别强。纯化的胰蛋白酶的特异性又由于TPCK处理使胰凝乳蛋白酶失活而进一步提高。处理过的胰蛋白酶经过亲和层析纯化，制成冻干粉。本产品能够用于胶内消化、溶液中酶解和质谱分析等实验。

产品特点：
➤ 纯度高，使用TPCK处理过，并经亲和纯化得到。
➤产品质量稳定，每批都经过质谱检测。
➤ 方便使用，以小瓶提供。
➤ 价值高，保证5次冻融循环后，性能稳定，这样使残余试剂量最小。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。干粉溶解在50mM醋酸中后，-20℃保存。若要长期储存，将溶解的胰蛋白酶存于-70℃。将冻融循环限制在5次以内。

使用方法：(溶液中酶解实验举例)
1．将目的蛋白溶解在6M guanidine HCl(or 6～8M urea or 0.1% SDS)，50mM Tris-HCl(pH8)，2–5mM DTT(or β-mercaptoethanol)的溶液中。
2．95℃加热15–20分钟或者60℃加热45–60分钟，自然冷却。
3．分析变性蛋白质时，加入50mM NH₄HCO₃(pH7.8)or 50mM Tris-HCl，1mM CaCl₂(pH7.6)，使guanidine HCl or urea终浓度至少为1M。如果上步已经加入SDS，可以不加入NH4HCO3。分析非变性蛋白质时，将蛋白样品溶解在pH为7-9的缓冲液内即可。
4．加入胰蛋白酶，使胰蛋白酶：蛋白质=1:100～1:20(w/w)。37℃孵育至少1小时。将反应体系移至-20℃或者加入胰蛋白酶抑制剂TCA(终浓度10%)终止酶反应。也可以将反应溶液的pH降到4.0以下，终止酶反应。
5．反相HPLC或者SDS-PAGE分析酶解反应结果。


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·电泳级耐热型SYBR染料
编号：BTN61201
英文名称：SuperSYBR Green
规格：50μL
本品是改良型的SYBR Green I，它跟常规的SYBR Green I相比检测灵敏度相当，但具有耐热、耐水解的特点，所以十分稳定，使用更加方便。

产品特点：
1. 稳定，本产品浓缩液可以在常温下存放一年以上，方便运输和保存。本产品的1X工作液在常温下的半衰期为120 多天，比常规的SYBR Green I(5天)长20倍以上。
2. 使用方便多样，既可以在制备凝胶时加入到融化的琼脂糖凝胶中，还可以象常规的SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar一样用于电泳后染色。
3. 灵敏，其检测灵敏度跟SYBR Green I相同，比EB 灵敏200-100倍。
4.低毒、环保、健康。
5.可检测各种核酸分子，包括dsDNA、ssDNA、RNA和Oligo。
6. 兼容性好，不但与常用的TAE、TBE和5分钟超快电泳缓冲液SuperBuffer-2等兼容，还与常用的UV 检测系统和可见光激发检测系统兼容。
7. 对 DNA 泳动速度的影响小于常规的SYBR Green I。
8. 半衰期长，自然损耗低，可多次使用，使其相对使用成本比常规的SYBR Green I和其它非对称花青类染料低。

储存条件：常温运输保存(避光)，保存期为一年。

本产品可以在电泳中染色，优点是用量少，但如果与DNA的比例没达到最佳时，带型容易弥散；也可以在电泳后染色，优点是不会对DNA电泳产生干扰，但用量大，还需要额外的染色过程。客户可以根据需要选择使用方法。百奥莱博不建议将本产品用于染色后再上样(即先将其与DNA 混合然后再上样)，也不建议将其用于PAGE(因分子较大,难以进入凝胶)。

使用方法之一：电泳中染色(仅适于琼脂糖凝胶电泳)
1. 按常规方法制备琼脂糖凝胶，胶中不能含任何其他染料。
2. 将按1：10000的比例将SuperSYBR 直接加到熔化的琼脂糖凝胶中并充分摇晃均匀(5μl可以加入到50mL 熔化的琼脂糖凝胶中)，然后倒胶。
3.其余的上样、电泳、UV 观察等步骤按常规操作进行。在254nm 紫外照射透视下，与双链DNA 接合的SuperSYBR 呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。如果使用300nm 紫外照射透视*(代"仪")观察也可以，但效果不如254nm。
4. 未用完的胶可以反复融化，如果保存时间在一周以上，最好闭光。
 注意：本方法的灵敏度比在熔化的琼脂糖凝胶中加EB染色的方法高，比电泳后染色经济(后者用量大)。SuperSYBR与DNA 结合同SYBR Green I跟DNA的结合一样，有时会影响DNA样品的相对迁移率。如果出现DNA电泳带弥散的现象，说明SuperSYBR和DNA的比例没达到最佳，可以适当调节DNA的上样量。

使用方法之二：电泳后染色
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用水将10000×SuperSYBR 原液稀释2500倍成4×工作液(如：将5μl SuperSYBR 原液加到10mL 水和2.5mL 5 M NaCl中，加NaCl的目的是促进SuperSYBR与DNA的结合)。由于SuperSYBR 对玻璃和非聚丙*(代"烯")材料具有一定亲和力，故建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙*(代"烯")类容器。
3. 将电泳后染色工作液倒入合适的聚丙*(代"烯")容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。
4.在 254nm紫外照射透视下，与双链DNA 接合的SuperSYBR 呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。如果使用300nm 紫外照射透视*(代"仪")观察也可以，但效果不如254nm。
 注意：电泳后染色工作液可以冷冻避光储存，可以在一个星期内重复使用多次。


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ARB13726 兔热休克蛋白40(HSP-40)酶标法分析 Rabbit heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
8008-63-7 牛胆粉
BTN60206  Ampicillin Solution
IEF阳极缓冲液  20× 250ml|500ml
CBZ-D-脯*酸 MMT 6404-31-5
F030708 BIOTIN标记兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA*BIOTIN
N-三(羟甲基)甲基-2-*基乙磺酸*盐 Nuclease eliminator Wipes 70331-82-7
ARB13040 小鼠补体片断5A(C5A)酶免分析 Mouse complement fragment 5a,c5a ELISA KIT
PY01-020  蛋黄卵磷脂  10克  
ARB13116 小鼠*通道阻滞剂(CCB)ELISA检测服务 Mouse calcium channel blockers,ccb ELISA KIT
DL-酪*酸 HSF 556-03-6
ARB12276 大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)Elisa分析 Rat plasmin-antiplasmin complex,pap ELISA KIT

北京百莱博科技有限公司专业生产核酸扩增(PCR)产品，欢迎来电咨询选购cDNA第二链合成试剂盒现货供应。