Caspase-3抗体说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖Caspase-3抗体说明书在内的抗体抗原产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：Caspase-3抗体说明书
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：YT152
英文名：anti-Caspase-3 antibody
本抗体是用人工合成的人Caspase-3本身的切割位点处一段多肽，经适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度多克隆抗体。

本Caspase-3抗体可以识别全长的Caspase-3(35kD)，也可以识别Caspase-3被剪切后产生的17kD片段。未发现和其它Caspase家族蛋白有交叉反应。

Caspase-3是细胞凋亡过程中最关键的执行分子(key executioner)之一，可以剪切细胞凋亡过程中的许多关键蛋白，例如PARP。Caspase-3的激活需要从没有活性的全长Caspase-3(35kD)，在Asp28和Ser29之间及Asp175和Ser176之间进行剪切，产生有活性的17kD肽段。Caspase-3的激活常被作为细胞凋亡的一个重要指标。

组份：
Caspase-3抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

交叉反应性：人，小鼠，大鼠，猴
宿主：兔
免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人Caspase-3本身的切割位点处一段多肽
抗体是别位点：Caspase-3
Caspase-3分子量：～35/17kD
克隆性：多克隆抗体
应用：WB,IP,IHC
推荐稀释比例：WB（1:1000）,IP（1:50）,IHC（1:500）

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。

关于Caspase-3抗体说明书的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·L-*丙*酸脱*酶
编号：YT549
英文名称：L-Phenylalanine Dehydrogenase (Crude Enzyme)
规格：100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的L-*丙*酸脱*酶，并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液，用于催化L-*丙*酸(L-Phe)氧化脱*基生成*丙*(代"酮")酸。

CAS：69403-12-9
外观：半透明黄色溶液
酶促反应：L-phenylalanine + H2O + NAD+ = phenylpyruvate + NH3 + NADH + H+
储存条件：-20℃，有效期1个月。

注意事项：
1. 由于本产品需新鲜制备，在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活，所以收到酶液后请根据需要进行分装，并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长，酶活力会有一定程度的下降，收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生，融化后混匀即可，不影响正常使用。

·T4 DNA聚合酶
编号：YT403
英文名称：T4 DNA Polymerase
规格：50U
本品是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以在结合有引物的单链DNA 模板上，从5"→3"方向催化DNA合成反应。T4 DNA Polymerase具有3"→5"外切酶活性，但不具有5"→3"外切酶活性。

特点：T4 DNA Polymerase由于同时具有5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"DNA外切酶活性，可以用于将5"端突出末端补平或3"端突出末端削平。T4 DNA Polymerase的3"→5"DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高，即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4 DNA Polymerase所消化。T4 DNA Polymerase的3"→5"外切酶活性比Klenow Fragment要高约200倍。

用途：
1）T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应；
2）DNA 5"或3"突出末端的平滑化；
3）通过置换反应进行标记DNA探针合成；
4）定点突变过程中第二链的合成；
5）不依赖于连接反应的PCR产物克隆。

来源：本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。

活性定义：37℃30分钟时间内，催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。

活性检测条件：67mM Tris-HCl(pH8.8)，6.7mM MgCl2，1mM DTT，16.7mM(NH4)2SO4，0.2mg/ml BSA，0.033mM of each dNTP，0.4MBq/ml[3H]-dTTP，0.2mM 热变性且经DNA酶部分消化过的小牛胸腺DNA。

纯度：不含DNA内切酶，不含RNase。

酶储存溶液：20mM potassiu*(代"m") phosphate(pH7.5)，200mM KCl，2mM DTT，and 50% glycerol。

Reaction Buffer(5X)：335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃)，33mM MgCl2，5mM DTT，84mM (NH4)2SO4。

缓冲液兼容性：在百奥莱博的内切酶反应缓冲液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性为100%，在1X B、1X G中的活性为75-100%。

失活或抑制：70℃加热10分钟可使T4 DNA Polymerase失活。金属离子螯合剂可以抑制T4 DNA Polymerase的活性。

储存条件：-20℃


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·Caspase-8抗体
编号：YT654
英文名称：anti-Caspase-8 antibody
规格：>20次
本抗体是以重组Caspase-8为抗原免疫rabbit，然后用protein A和抗原亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测至少可以检测20次。

本Caspase-8抗体可以识别全长的57kD的Caspase-8(有时全长的Caspase-8也被称作precursor)，也可以识别Caspase-8被剪切后产生的45kD(mouse)或43kD(human)、18kD和10kD片段。未发现和其它Caspase家族蛋白有交叉反应。

Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也称FLICE、MACH或Mch5，有时被写作caspase-8或caspase8，通常以酶原的形式存在，在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。Caspase 8被认为是细胞凋亡信号转导过程中比较上游的一个caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介导的细胞凋亡过程中caspase 8被激活，形成一个由p18和p10组成的二聚体，进一步激活下游的caspase 4，caspase 6，caspase 9和caspase 10。

建议本抗体用于Wetern检测时的起始稀释比例为(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)：检测全长Caspase-8按照1:1000稀释；检测Caspase-8被剪切后产生的片段按照1:500稀释。本品配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测时的一抗稀释。

组份：
Caspase-8抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

交叉反应性：人，小鼠
宿主：兔
免疫原：重组Caspase-8
Caspase-8分子量：57/45或43/18/10kD
应用：WB
推荐稀释比例：WB（1:1000）

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·C/EBP凝胶迁移突变探针(1.75μM)
编号：YT211
英文名称：C/EBP Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的C/EBP consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－C/EBP的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

EMSA突变探针－C/EBP的序列如下：
5"-TGC AGA GAC TAG TCT CTG CA-3"
3"-ACG TCT CTG ATC AGA GAC GT-5"

EMSA突变探针－C/EBP中C/EBP的公认的结合位点发生了突变，从而使C/EBP无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和C/EBP的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和C/EBP的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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