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2-Chloro-5-fluorobenzaldehyde
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84194-30-9
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文献和实验等体积的酚/氯仿/异戊醇混匀,离心 4-5 min, 将上清转入一只新管中,加入 0.6-0.8 倍体积的异丙醇,轻轻混合直到 DNA 沉淀下来,沉淀可稍加离心。 6. 沉淀用 1 ml 的 70% 乙醇洗涤后,离心弃乙醇. 真菌 DNA 的提取: 方法一: 1. 取真菌菌丝 0.5 g, 在液氮中迅速研磨成粉 2. 加入 4 mL 提取液,快速振荡混匀 3. 加入等体积的 4 mL 的氯仿: 异戊醇 (24:1),涡旋 3~5 min
糖凝胶上检测分析。如图一所示 图一:2.2 超声破碎后,8000g,30秒,4°C,离心。将上清移入新的管子中。开始准备进行染色质免疫共沉淀(IP)。2.3 每份超声样品取50ul,这时的样品标记为INPUT,用于定量DNA浓度和作为PCR的空白对照。超声后的染色质应立刻冻入液氮中或者储存于-70°C可储存2个月。避免多次反复冻融。3检测DNA浓度1INPUT样品用于为后来的IP样品计算DNA浓度。DNA可采用PCR纯化试剂盒(加入70ul洗脱液,接着进入3.2a)或者采用酚/氯仿抽提(加入350ul
-3Pa(1×10-5~3×10-5Torr),样品升温至-100℃~-110℃。 3.蚀刻就是在真空中使冷冻样品表面上的冰升华。目的是为了暴露出样品断裂面上的超微结构,便于喷镀。一般认为最佳蚀刻深度约为30nm。若蚀刻深度不够,结构被冰掩盖不能充分暴露出来,图像模糊;若蚀刻深度过大,超微结构因其基础支持不足而倒塌,从而破坏了超微结构。蚀刻深度是由蚀刻速度和蚀刻时间决定的,而蚀刻速度是受真空度、温度、水蒸汽压所影响。一般蚀刻条件:真空度为133×10-3~133×
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