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- 文献和实验
- 技术资料
- 应用：
科研
- 检测方法：
酶联检测
- 供应商：
上海莼试
- 规格：
48T/98T
1）标本的采取和保存：可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本；
2）试剂的准备：所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液；
3）加样：一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。
4）保温：ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育。
5）洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
6）显色和比色：显色是ELISA中的最后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
7）结果判断：分定性判定和定量判定。
| 规格 | 价格 | 英文名 | 产品名 |
| 48T/98T | 来电详询 | Mouse Vitamin E,VE ELISA Kit | 小鼠VE检测试剂盒规格 |
A.夹心法，一般的操作步骤为:
➷将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体;
➷加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结;
➷洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗体，与待测抗原进行键结;
➷洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结;
➷洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果;
B.间接法，一般的操作步骤为：
➷将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原。
➷加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。
➷洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结。
➷洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器测定塑胶盘中的吸光值，以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
C.竞争法，其操作步骤为：
➷将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体
➷加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结
➷加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。
➷洗去检体与带有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少，显色也就越浅。
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