重组人干扰素α/β受体2(IFNα/βR2)厂家

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名称：重组人干扰素α/β受体2(IFNα/βR2)厂家
编号：JN1131
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：Recombinant Human Interferon alpha/beta Receptor 2
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成，目的基因编码的Ile27-Lys243在C端带有Fc标签。

IFN-alpha/beta R2质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)

IFN-alpha/beta R2制剂：冻干品

IFN-alpha/beta R2保存：
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存，室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4～7℃保存2～7天，可分装后置于-20℃保存三个月。

IFN-alpha/beta R2复溶：
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后，请根据用量分装冻存，避免反复冻融。

关于IFN-alpha/beta R2：
Interferon α/β Receptor 2 (IFN-α/β R2) is a single-pass type I membrane protein which belongs to the type II cytokine receptor family. It complexes with IFN-α/β R1 to form the signaling receptor complex for the family of α and β IFN subtypes. By alternative splicing, IFN-α/β R2 can exist as a secreted soluble protein or as a type I membrane protein. IFN-α/β R2 is the principal ligand binding subunit of the receptor. Ligand binding is stabilized by the subsequent association with IFN-α/β R1, resulting in the formation of a signaling ternary receptor complex. IFNAR2 was detected in most lymphocytes, monocytes, and granulocytes, although IFNAR2 expression was higher in the monocytes and granulocytes than in the lymphocytes. Among the lymphocyte subsets, IFNAR2 showed high expression in natural killer (NK) cells and low expression in T lymphocytes. Isoform 1 and isoform 3 of IFNAR2 are directly involved in signal transduction due to their interaction with the TYR kinase, JAK1. Isoform 1 also interacts with the transcriptional factors, STAT1 and STAT2. Both forms are potent inhibitors of type I IFN activity.

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·KOF DNA聚合酶
编号：JN0017
英文名称：KOF DNA Polymerase
规格：250U
  本酶是一种经过基因工程改造的高保真DNA聚合酶，具有极强的3"→5"核酸外切酶活性（Proof-reading活性），当聚合反应发生碱基错配时，聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。与普通pfu相比，保真性更高，约为普通taq的50倍，普通pfu的6倍。其扩增性能也比普通Pfu高，成功克服了普通pfu酶扩增效率低的缺陷。

产品组成：

 

组份	JN0017-250U
KOF DNA 聚合酶（1U/ul）	250ul
dNTP混合液	250ul
10X KOF Buffer with Mg2+	2ml

产品用途：用于要求保真度高的PCR反应，包括克隆PCR，DNA片段拼接，引入突变，全基因合成，DNA片段的补平等。

使用建议：
KOF DNA Polymerase 产生的PCR产物为平滑末端，无3’端“A”突出，其PCR产物的克隆有几种方案。
1、PCR前引物进行5’ 加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中（参见实验方案）。
2、将产物3’ 末端加A后再与T载体连接（参见实验方案）。
3、引物中引入15bp与载体同源序列，利用BalbRec PCR产物一步定向无缝克隆试剂盒（Cat#JN0001）直接连接到目的载体。
由于KOF DNA聚合酶的校正活性可引起引物从3’ 端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30bp。另外为了减少由3’→5’外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并最后加入KOF酶。

应用实例：


图例一）50ul扩增体系中，以5ngλDNA为模板，对0.6kb～12.0kb片段的扩增结果。
泳道1：0.6kb；泳道2：1.0kb；泳道3：2.0kb；泳道4：3.0kb；泳道5：4.0kb； 泳道6：8.0kb；泳道7：10.0kb；泳道8：12.0kb；泳道M：1kb DNA Marker；

图例二）50ul扩增体系中，分别以50ng～0.05ng质粒为模板进行的灵敏度的扩增结果。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；泳道M：DNA 2000 ladder

常用反应体系（50μl）

10X KOF Buffer	5μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)	1.0μl
模板	1-50ng（质粒）
10ng-1μg(基因组)
KOF	1μl
ddH2O	至50μl

常用PCR循环：

当扩增片段＜3K：

温度	时间	循环数
94℃	1分钟30秒
94℃	20秒	30次循环
57℃	20秒
72℃	根据产物长度调整，60秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温

当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：

温度	时间	循环数
94℃	5秒	30次循环
68℃	根据产物长度调整，60秒/kb
72℃	5分钟
4℃	保温

质量保证：经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测纯度大于95%；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内，外切酶污染。

活性定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。


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