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肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)厂家价格

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  • ¥4200 - 5800
  • 百奥莱博
  • SYA092-NOC
  • 北京
  • 2025年07月12日
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      长期

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      北京百奥莱博科技有限公司

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      阴凉干燥

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)厂家价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)等细菌PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)厂家价格
    品牌:百奥莱博
    规格:48次/盒
    等级:科研试剂
    产地:国产|进口
    编号:SYA092

    欲咨询购买肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)厂家价格,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:

    ·人类小DNA病毒(B19)单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA246
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·沙门菌及痢疾杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA079
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA114
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒
    一、简介:
    本试剂盒用一对鼠疫杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对鼠疫杆菌进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

    二、用途:
    本试剂盒适用于检测全血等样品中的鼠疫杆菌(YP),用于鼠疫杆菌(YP)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。

    三、试剂盒组成:(48T)
    组份 数量 规格
    YP反应液(YP-qPCR MIX) 1管 672μL/管
    DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5ml/管
    酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
    阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
    YP阳性对照(YP-PTC) 1管 50μL/管

    四、储存条件及有效期:
    本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。

    五、荧光PCR仪器适用范围:
    ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪等。

    六、样品的采集与RNA提取
    6.1 样品的采集
    取抗凝血下层血细胞50μL,加入100μL双蒸水吹匀。
    6.2 RNA提取
    可采用PCR试剂盒配备的DNA抽液体,按以下说明进行DNA核酸的提取。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
    对上述处理好的样本加入50μL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5ml EP管,-20℃保存。
     注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

    七、检测步骤:
    7.1 试剂的准备
    从试剂盒中取出荧光PCR反应液(YP-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
    设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
    试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
    荧光PCR反应液 14µL N×14µL
    酶混合物 1µL N×1µL
    总量 15 µL N×15µL
    向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(YP-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
    7.2 qRT-PCR反应条件
    将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
    推荐循环条件:
    1循环 50℃ for 2min
    预变性 1循环 95℃ for 10 min
    PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

    八、结果分析:
    8.1 结果分析条件设定
    直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
    8.2 试验成立判定
    (1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
    (2) 阳性对照(YP-PTC):均产生扩增曲线。
    (3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
    8.3 结果判定
    (1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明鼠疫杆菌核酸阳性。
    (2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明鼠疫杆菌核酸阴性。
    (3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
    (4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行鼠疫杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明鼠疫杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。

    九、注意事项:
    (1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
    (2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
    (3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
    (4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
    (5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



    肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)厂家价格关键词:肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒,SYA092,百奥莱博,EIEC,肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)


    ·禽传染性法氏囊病病毒(IBDV)单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA352
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒|96次/盒

    ·轮状病毒C型单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA199
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·肺炎克雷伯菌单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA037
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒
    编号:SYA662
    等级:科研实验专用
    规格:192次/盒|480次/盒

    ·札如病毒/星状病毒双重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA216
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒

    ·禽流感病毒H3亚型(AIV-H3)单重荧光PCR检测试剂盒
    编号:SYA384
    等级:科研实验专用
    规格:48次/盒
    一、简介:
    本试剂盒用一对禽流感病毒H3亚型特异性引物,结合特异性荧光探针,用一步法荧光RT-PCR技术对禽流感病毒H3亚型RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中禽流感病毒H3亚型的探针报告基团为HEX/VIC/JOE。

    二、用途:
    本试剂盒适用于鼻咽提取物、鼻咽拭子、支气管肺泡灌洗液等临床样品中禽流感病毒H3亚型的特异性检测。适用于禽流感病毒H3亚型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供参考。

    三、试剂盒组成:(48T)
    组份 数量 规格
    禽流感H3荧光qRT-PCR反应液(H3-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
    酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
    无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
    阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
    阳性对照(H5-PTC) 1管 50μL/管

    四、储存条件及有效期:
    本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。

    五、荧光PCR仪器适用范围:
    ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

    六、样品的采集与RNA提取
    6.1 样品的采集
    按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
    6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
    6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
    6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
    6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
    6.2 RNA提取
    可按常规方法提取,也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
    6.2.1 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管,做好标识。
    6.2.2 加入600 μL裂解液,200 μL样本,200 μL*仿,混匀器上振荡5 s,4℃ 12000 rpm离心15 min。
    6.2.3 吸取步骤6.2.2中的上清液转移至新的无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管中(避免吸出中间层),加入400 μL异丙醇,颠倒混匀。
    6.2.4 4℃ 12000 rpm离心15 min,弃上清;加入600 μL 75%乙醇。
    6.2.5 4℃ 12000 rpm离心10 min,弃上清。打开离心管管盖,室温干燥5 min-10 min。
    6.2.6 加入10μL 无核酸酶水,溶解管底的RNA,5000 rpm离心5 s,-20℃保存。若长期保存需放置-80℃冰箱。
     注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

    七、检测步骤:
    7.1 试剂的准备
    从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(H3-qRT-PCRMIX)、酶混合物(EnzymesMIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
    设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
    试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
    荧光PCR反应液 14µL N×14µL
    酶混合液 1µL N×1µL
    总量 15µL N×15µL
    计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(H3-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
    7.2 qRT-PCR反应条件
    将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
    推荐循环条件:
    反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
    预变性 1循环 95℃ for 10 min
    PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
    60℃ for 45 sec
    在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为HEX/VIC/JOE,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

    八、结果分析
    8.1 结果分析条件设定
    直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
    8.2 试验成立判定
    (1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
    (2)阳性对照(H3-PTC):均产生扩增曲线。
    (3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
    8.3 结果判定
    (1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明H3核酸阳性。
    (2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明H3核酸阴性。
    (3)如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
    (4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行H3qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明H3核酸阳性;否则判为样本阴性。

    九、注意事项:
    (1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
    (2)所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
    (3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
    (4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
    (5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



    肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)厂家价格关键词:肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒,SYA092,百奥莱博,EIEC,肠侵袭性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(EIEC)

    Tris抗原修复液(10×,pH10.0)   100ml
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    胰蛋白酶-EDTA溶液(含酚红)  0.05%:0.02%|0.25%:0.02% 100ml
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    BL0776 Matrigel(基底胶)

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