SYA063型肠炎沙门菌荧光PCR检测试剂盒现货供应

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北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括SYA063型肠炎沙门菌荧光PCR检测试剂盒现货供应在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：SYA063型肠炎沙门菌荧光PCR检测试剂盒现货供应
产地：国产|进口
编号：SYA063
品牌：百奥莱博
等级：科研试剂

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51-35-4 L-Hydroxyproline  L-羟基脯*酸
天青Ⅱ曙红 Guanidine carbonate 53092-85-6
ARB12506 大鼠结肠组织黏蛋白-2(MUC-2)Elisa方法检测 
ARB12201 大鼠皮质醇(CortIsol)定量分析 Rat cortisol ELISA KIT
D0402 脱纤维马血(无菌 袋装)
蛋黄粉 ε-PL
ARB12352 大鼠迟现抗原(VLA)血清中含量检测 Rat very late appearing antigen,vla ELISA KIT
伊红染色液(醇溶)   100ml|500ml
PY02-243  亚利桑那菌琼脂(SA)  100克  
BL1306 BCA蛋白浓度测定试剂盒
ARB10514 人白细胞介素32(IL-32)ELISA代测服务 Human interleukin 32,IL-32 ELISA KIT
L-丙-谷二肽 Erythritol 39537-23-0
ARB11932 大鼠17羟孕酮(17-OHP)Elisa方法检测 Rat 17-hydroxyprogesterone,17-ohp ELISA KIT
64-86-8 秋水仙碱 Colchicine
BL0793 猪IgG抗原(干粉)
SYA063型肠炎沙门菌荧光PCR检测试剂盒现货供应关键词：百奥莱博,肠炎沙门菌荧光PCR检测试剂盒,SYA063


·猪细小病病毒(PPV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA423
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·类致贺邻单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA078
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肉毒杆菌AB型双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA017
英文名称：Botulinus A/B Fluorescent PCR detection kit
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适用于检测粪便、水、血液等样本肉毒杆菌(BL) A/B型DNA，用于肉毒杆菌(BL) A/B型感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。
【原理】
本试剂盒用一对肉毒杆菌(BL)A/B型特异性引物和一条特异性荧光探针，经过裂解提取DNA，后者在Taq DNA聚合酶作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR-荧光探针体外扩增法对肉毒杆菌(BL) A/B型DNA进行体外扩增，从而达到快速检测肉毒杆菌(BL) A/B型之目的。
【组成】
名称 数量 规格
核酸提取液 1管 2ml/管
Taq 酶系 1管 50μl/管
BL-A/B-qPCR MIX 1管 1000ml/管
BL-A/B -阳性质控品 1管 50μl/管
阴性质控品 1管 250μl/管
【储存条件】-20℃保存，避免反复冻融。
【试剂规格及有效期】48T/盒，有效期6个月。
【适用仪器】
双通道及以上PCR仪器。
【标本采集和保存与运输】
1. 人或动物：
采集新鲜粪便，取黏液脓血部位标本，密闭送检。
2．血液：
采集新鲜抗凝血(非肝素抗凝)，密闭送检。
【使用方法】
1． DNA提取
1.1 粪便：挑取米粒大小粪便(尽可能取黏液脓血部分)，于放置有0.5ml生理盐水的离心管中，振荡混匀，13000rpm离心2分钟。弃上清，沉淀中直接加入100μl DNA提取液充分混匀，沸水浴10min，13000rpm离心5min取上清4μl做PCR反应。
1.2 水标本：取水样3ml，13000rpm离心2min；弃上清，沉淀中直接加入100μl DNA提取液充分混匀，沸水浴10min，13000rpm离心5min取上清4μl做PCR反应。
1.3 血液标本：取2ml抗凝血，静置待自然分层，吸取上层（血浆层）及中层（Buffy coat层），13000rpm离心2分钟。弃上清，沉淀中直接加入100μl DNA提取液充分混匀，沸水浴10min，13000rpm离心5min取上清4μl做PCR反应。
2．PCR扩增
从试剂盒中取出BL-A/B-qPCR MIX、Taq酶系，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N（N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照），每个测试反应体系配制如下表：
试剂 BL-A/B-qPCR MIX Taq酶系
用量 20μl 1μl
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入21μl，向每管中加入处理后样品或BL-阳性质控品和阴性质控品4μl，10000rpm瞬时离心10秒。将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内，推荐循环条件:94℃→2分钟，后94℃ 30秒→55℃ 45秒，40个循环。
荧光通道选择：检测选择FAM通道和HEX/VIC/JOE通道。如果使用ABI系列仪器，请务必在passive reference和quencher处均选择“NONE”。
3. 结果分析判定
FAM通道：Ct值≤35肉毒杆菌A型为阳性；Ct 值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。重复试验之后，如果Ct 值仍然在37-40个循环之间，判断肉毒杆菌A型为阳性，没有荧光值增长肉毒杆菌A型为阴性。
HEX/VIC/JOE通道：Ct值≤35肉毒杆菌B型为阳性；Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。重复试验之后，如果Ct值仍然在37-40个循环之间，判断肉毒杆菌B型为阳性，没有荧光值增长肉毒杆菌B型为阴性。
【质控标准】
阴性质控品：FAM和HEX/VIC/JOE通道全部阴性。
BL-阳性质控品：FAM和HEX/VIC/JOE通道的Ct值均应小于30.0。
以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
【注意事项】
初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·玉米转基因CBH-351单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA284
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪瘟(CSFV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA548
等级：科研实验专用
规格：10次/盒|48次/盒

·猪流感病毒N2亚型(SIV-N2)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA457
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·肠产毒性大肠杆菌(ETEC)耐热肠毒素(ST-est)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA091
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·大肠杆菌O104/O157双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA106
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·黄热病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA229
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·偏肺病毒(HMPV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA185
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·玉米转基因GA21单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA282
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽腺病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA391
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对禽腺病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对禽腺病毒DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染动物的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测呼吸道分泌物棉拭子(感染I群禽腺病毒的鸡、火鸡、鹅、鹌鹑)、卵巢、输卵管、卵泡、子宫和输卵管粘膜组织、泄殖腔拭子(感染II、III群禽腺病毒的鸡、鸭)等样本中的禽腺病毒(AADV)，用于禽腺病毒(AADV)感染的辅助诊断及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
AADV反应液(AADV-qPCR MIX) 1管 720μL/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
AADV阳性对照(AADVPTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
病死禽取卵巢、输卵管、卵泡、子宫和输卵管粘膜组织；活鸡取呼吸道拭子或泄殖腔拭子，放于1ml 50％甘油生理盐水中。
6.2 样品前处理
组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；泄殖腔拭子直接取100μL提取。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.31 纯培养物：取培养物50μL与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.3.2 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，取50μL样品，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.3.3 组织研磨液、拭子、血清、血浆及其他液体标本：取处理好的标本50μL，加入50μl DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(AADV-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(AADV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号 。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)： 不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(AADV-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线，表明AADV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AADV核酸阴性。
（3） 如果Ct值＞35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AADV 检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AADV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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