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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
人,鸡,大小鼠
- 物种来源:
人,鸡,大小鼠
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
见说明书
- 运输方式:
低温运输
- 年限:
5-10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5×105cells/T25培养瓶
小鼠成骨细胞培养基信息:
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到小鼠成骨细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考小鼠成骨细胞
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文献和实验原代培养1.取新生3d以内BALB/c小鼠,断颈处死后立即投入75%酒精中消毒5min(虽有头部皮肤保护,但时间不要过长,所以事先要把准备工作做好之后再去杀老鼠)。2.D-Hank’s液漂洗后分离颅盖骨,刮除骨膜和结缔组织,DMEM清洗颅骨骨片并剪碎。(自我感觉碎一点好一些)3.加入0.25%胰蛋白酶(含0.02EDTA),37°恒温消化20min,吸出消化液,之后1mg/1mlI型胶原酶37°恒温消化20min后离心(1000r/min,5min),弃上清液。(消化时间自己摸索,之前我消化
一、饲养环境 小鼠对环境的适应性的自体调节能力和疾病抗御能力较其他实验动物差,而小鼠的品种和品系繁多,各个品种和品系都有自己的特殊要求,因此必须根据实际情况给予一个清洁舒适的生活环境。不同等级的小鼠应生活在相应的设施中。 小鼠临界温度为低温 10℃,高温 37℃,温度中性范围 30~33℃。饲养环境控制应达到如下要求:温度 18~29℃;相对湿度 40~70%;最好控制在 18~22℃,湿度 50~60%。一般小鼠饲养盒内温度比环境高 1~2℃,湿度高 5~10%。 要保持温度、湿度相对稳定
参与骨组织形成的细胞,由间充质细胞分化而来,骨膜形成后由骨膜的一些细胞分化而成。成骨细胞短柱状,有突起,核圆形,细胞质强嗜碱性。在将要形成骨组织的地方,排列成单层,彼此由突起相连。成骨细胞的主要功能是生成骨组织的纤维和有机基质。在生成有机的细胞间质以后,本身被埋于其中,变为成骨细胞。这时尚无骨盐,称类骨质。随后,有大量骨盐沉积在有机的细胞间质中,即成为骨组织。
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