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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
人,鸡,大小鼠
- 物种来源:
人,鸡,大小鼠
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
见说明书
- 运输方式:
低温运输
- 年限:
5-10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5×105cells/T25培养瓶
大鼠肺大静脉平滑肌细胞培养基信息:
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到大鼠肺大静脉平滑肌细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考大鼠肺大静脉平滑肌细胞
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文献和实验Perfusion Kit, mouse and rat,130-128-030) 搭配gentleMACS Octo八通道带加热全自动组织解离器使用。 7. 如何得到心肌细胞? 小鼠心脏由多种类型细胞构成,包括心肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞、免疫细胞、平滑肌细胞等。其中心肌细胞通过闰盘紧密连接,需要较强的酶解,但细胞膜脆弱,很容易在解离过程中破裂而造成细胞死亡。尤其是成年小鼠心肌细胞,体积大且不规则,更加大分离难度。 对于新生小鼠,闰盘未完全成熟,细胞连接没有十分紧密,可以使用常规解离方法,但可能出现得率
类呈舒张反应。PG内过氧化物、TXA2及PGI2均能使胃肠平滑肌收缩。子宫平滑肌对PGF类及TXA2均呈收缩反应,对PGE类呈舒张反应。 2.胃肠分泌 PGE 及PGI2可抑制由饮食、组胺或促胃泌素所致的胃酸分泌。PGE可增加胃和肠的粘液分泌,这是PGE保护胃粘膜的药理基础。 3.心血管系统 PGE类可使大多数血管床,包括小动脉、毛细血管前括约肌、毛细血管后小静脉,呈现舒张,而对大静脉无作用。因此,PGE类通常可使血压下降,使大多数器官(心脏、内脏及肾)血流
(二)具体实验技术名称 大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养 (三)实验对象 SD大鼠 (四)简要步骤 用 5%水合氯醛经腹腔麻醉. 在超净平台内. 迅速剖开大鼠胸腔. 取出心肺组织。在解剖显微镜直视下取出肺细小动脉。用镊子刮3-5次除去内皮细胞。再经培养和胶原酶消化. 即可获得平滑肌细胞了。 (五)我的窍门或者心得体会 1. 大鼠事先放入配好的75
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