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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
人,鸡,大小鼠
- 物种来源:
人,鸡,大小鼠
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
见说明书
- 运输方式:
低温运输
- 年限:
5-10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5×105cells/T25培养瓶
小鼠支气管上皮细胞培养基信息:
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到小鼠支气管上皮细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考小鼠支气管上皮细胞
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文献和实验实验材料: 1. 手术切除的含支气管的正常肺组织 2. 胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/L EDTA 3. 6孔培养板:用多聚赖氨酸包被 4. 不含Ca2+ 和Mg2+的1×PBS(pH=7.2),添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 6. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 将分离的两片肺叶组织用含双抗的1×PBS
冲洗,以除去血液和粘液。 2. 将气管或支气管的一端结扎,另一端插套管并固定。用注射器经套管注入1%中性蛋白酶,至气管充盈为止。将气管浸泡于PBS中,在37℃条件下消化20min。 3. 用注射器抽取培养液,将注射器插入套管,反复冲洗,以分离气管上皮细胞。然后,将气管或支气管游离端的结扎线剪断,回收管腔内的细胞悬液。 4. 用200目不锈钢网筛过滤,将滤液离心(1000r/min,10min)。弃上清液后,再用培养液洗涤离心1次。 5. 用培养液悬浮沉淀细胞,调整细胞
PriCells: 小鼠乳腺上皮细胞培养 实验材料: 1. 10-12周龄妊娠小鼠乳腺组织 2. 不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 3. FBS、含5%牛血清白蛋白(BSA)的PBS
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