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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
人,鸡,大小鼠
- 物种来源:
人,鸡,大小鼠
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
见说明书
- 运输方式:
低温运输
- 年限:
5-10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5×105cells/T25培养瓶
大鼠视乳头星形胶质细胞培养基信息:
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到大鼠视乳头星形胶质细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考大鼠视乳头星形胶质细胞
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文献和实验后,转移细胞悬液至新瓶中,加入DMEM/F12完全培养基,在37ºC, 5%CO2培养箱中培养9天(每3天更换培养液一次),第9天将培养瓶置于恒温旋转摇床上37ºC, 240rpm,摇18小时,去掉悬浮的细胞,用D-Hanks液清洗3次,进行传代培养即得纯化的星形胶质细胞。经免疫细胞化学法检测,98%以上的细胞GFAP免疫反应为阳性。
神经系统损伤后,星形胶质细胞增生、肥大,填补缺损,形成胶质瘢痕。 方法和结果 选择出生 2 d 的SD大鼠,无菌条件下分离出大脑皮层,用0.125%胰蛋白酶消化(37 ℃ 30min)后用培养液( 90% DMEM,10 % 胎牛血清,2mM谷氨酰胺)吹打分散成细胞悬液,先接种于玻璃培养瓶中,于培养箱中孵育30 min后,翻转瓶子吸出细胞悬液,除去已贴壁的成纤维细胞,再接种于涂有鼠尾胶的75cm2塑料培养瓶中, 种植密度为1×105 个细胞/cm2,每瓶10 ml细胞悬液置。置36 ℃、10
细胞培养名称:新生大鼠皮质星形胶质细胞培养组织来源:种属:大鼠年 龄:新生1天-2天取材部位: 皮质选用的酶:0.125%胰酶消化时间:37度15min注意事项:胰酶平时用1.5ml EP管分装冻存,用时解冻,37预温1min,以保持胰酶好的活性,消化时每隔5min轻轻摇动消化组织。细胞培养名称:成年大鼠室下区星形胶质细胞培养组织来源:种属:大鼠年 龄:成年2.5月零取材部位: 室下区/室周区选用的酶:0.125%胰酶+0.02%EDTA消化时间:37度25min注意事项:每隔5min轻轻
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