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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
826
- 英文名:
Plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京促销柱式质粒小量提取试剂盒价格在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京促销柱式质粒小量提取试剂盒价格
品牌:百奥莱博
编号:ALH075
规格:100次|200次
本试剂盒适用于小规模质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(100次):
RNaseA(10mg/ml)————————250μl
溶液P1—————————————25ml
溶液P2—————————————25ml
溶液P3—————————————35ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————100套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便,不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 本试剂盒适用菌株为XL-1 Blue和DH5α等核酸酶含量低缺陷型菌株。所用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株,核酸酶含量丰富,应购买本公司生产的高纯度质粒小量快速提取试剂盒。
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 溶液P3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒,建议接种单菌落于1.5~4.5ml加合适抗生素的LB培养基, 过夜培养14~16个小时,可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应适当加大菌体使用量,使用5~10ml过夜培养物,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,其它步骤相同。
5. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
6. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:柱式质粒小量提取试剂盒|小量质粒制备试剂盒|小量质粒提取试剂盒|质粒小量制备试剂盒
除北京促销柱式质粒小量提取试剂盒价格外,我公司正在打折促销以下产品:
·细胞组织DNA/RNA/蛋白分离纯化提取试剂盒
编号:ALH068
英文名称:Tissue Cells DNA/RNA/microRNA/Protein Extraction & Isolation Kit
规格:50次
本试剂盒用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和包括miRNA的总RNA和Protein(如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液,还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取,富集miRNA。)。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶,然后裂解混合物RNA/miRNA/DNA/Protein同时通过一个基因组DNA吸附柱,基因组DNA被吸附而miRNA/RNA/Protein穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的miRNA/RNA用乙醇调节结合条件后,miRNA/RNA在高离序盐状态下选择性吸附于miRNA/RNA吸附柱上,再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯miRNA/RNA。滤液经选择性沉淀得到Protein。无*酚、*仿DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的miRNA/RNA/基因组DNA纯度高,互不干扰。得到的miRNA/RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。
产品组分:
裂解液RLT Plus————50ml
Wash Solution 1————12ml
Wash Solution 2/3————10ml
RNase-free H2O—————10ml
抑制物去除液————25ml
漂洗液————————15ml
缓冲液————————60ml
洗脱缓冲液——————10ml
基因组DNA吸附柱和收集管————50套
RNA吸附柱和收集管————50套
产品特点:
1. 完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2. 快速,简捷,单个样品miRNA/RNA/基因组DNA/Protein分离操作一般可在1小时内完成。
3. 独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的miRNA/RNA不需要DNase消化可直接 用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4. 多次柱漂洗确保miRNA/RNA/基因组DNA高纯度,可直接用于下游各种实验。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺脾脏DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3×106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过3~4×106,组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT Plus 、抑制物去除液IR、Wash solution 1、Wash solution 2/3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 该试剂盒如需要用于植物样品尤其是多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/miRNA/RNA提取,请咨询技术人员,可能需要用到其它试剂。
5. 如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液,还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取,富集miRNA。请咨询我们。
6. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留(DNase消化也无法做到100%无残留), 本试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 分离清除技术,绝大多数DNA已经被清除,不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
储存条件:室温,有效期一年。
北京促销柱式质粒小量提取试剂盒价格关键词:小量质粒制备试剂盒,小量质粒提取试剂盒,质粒小量提取试剂盒,柱式质粒小量提取试剂盒
·RNA快速提取试剂盒(多糖多酚植物)
编号:ALH038
英文名称:Complex Plant RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于多糖、多酚及其他复杂植物组织细胞总RNA快速提取,无*酚、*仿RNA快速提取技术基础上,又采用基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶, 离心沉淀去除多糖多酚和次级代谢产物,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,然后RNA被选择性洗脱滤过, 吸附在基因组DNA清除柱上的残留DNA无法洗脱连同柱子一起丢弃从而清除掉DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成,世界上最简单快速的试剂盒。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.可以提取包括复杂中草药如石斛/丹参/雪莲/人参、复杂淀粉种子如水稻/小麦/玉米种子、复杂果实如葡萄/蓝莓/草莓/西瓜果实、复杂抗逆植物如冬青/松针/沙棘/胡杨、复杂花卉月季/玫瑰/梅/牡丹花、复杂多糖植物紫菜/仙人掌/芦荟水稻种子等数百种国内外试剂盒提取失败的样品。
5.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,无DNA残留,可用于荧光定量PCR、RT-PCR、芯片、二代测序、Northern-blot等各种实验。
试剂盒组份:
| 组份 | 50次 |
| 裂解液CLB | 50ml |
| 裂解液RLT Plus | 25ml |
| 去蛋白液RW1 | 40ml |
| 漂洗液RW | 10ml |
| RNase-freeH2O | 10ml |
| 基因组DNA 清除柱和收集管 | 50套 |
| 吸附柱和收集管 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备β-巯基乙醇,乙醇,研钵(可选)。
3. 样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到100%无残留),本试剂盒产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup) ,请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
储存条件:室温,有效期12个月。
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石蜡包埋组织切片 miRNA 提取试剂盒(DP502) 操作指南
以下操作按照天根产品 DP502 石蜡包埋组织切片 miRNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块样本2. 无水乙醇,二甲苯3. 移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1 ml); 1.5 ml,2.0 ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机,金属浴/水浴本文版权归天根生化科技(北京)有限公司所有,仅供个人学习使用
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