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北京百奥莱博科技有限公司
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4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
Hoechst 33342染液(即用型) 细胞凋亡与增殖由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Hoechst 33342染液(即用型)等细胞凋亡与增殖产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:Hoechst 33342染液(即用型) 细胞凋亡与增殖
编号:SY0499
产地:国产|进口
规格:10ml
品牌:百奥莱博
本系列产品均以溶液形式提供,其中Hoechst 33342染液(1mg/ml)(SY0563)为特定浓度的产品,其浓度为1mg/ml。用于细胞核染色时,推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。Hoechst 33342染液(即用型)(SY0499)为浓度经过优化的产品,确保可以满足各种常规染色的需要。
Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
中文名称:二*甲亚胺, 三*化* 2-(4-乙基*基)-5-(4-甲基-1-哌*(代"嗪")基)-2,5-二-1H-*并咪唑
英文名称:2’-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
分子式:C27H28N6O·3HCl
分子量:561.93
CAS:23491-52-3
纯度:≥95%(HPLC)
储存条件:4℃,有效期6个月
结构式

使用方法
1. 用PBS或合适的缓冲液制备 10~50µM Hoechst33342染色液。
2. 固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33342染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
a) 对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。
对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
b) 吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
c) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
3. 活细胞或组织染色:
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
注意事项
1) Hoechst 33342 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
欲了解更多Hoechst 33342染液(即用型) 细胞凋亡与增殖的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
002016 枸橼酸纳抗凝牛血 100ml|500ml
反式-2-己烯酸 Ammonium succinate 13419-69-7
32986-56-4 Tobramycin 托普霉素/妥布霉素
F050311 小鼠IgM抗体 Mouse IgM
ARB12684 大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)Elisa方法检测 Rat mullerian inhibiting substance/anti-mullerian hormone,mis/amh ELISA KIT
2,4,6-三*-3-羟基*甲*(代"酸") BCP 14348-40-4
BOC-L-缬*酸 Aprotinin 13734-41-3
DNase/RNase-Free去离子水
磷酸化蛋白提取试剂盒 Phosphorylated protein extraction kit 50T|100T
BL0869 羊抗大鼠免疫血清
ARB13775 豚鼠3-羟-3-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA)检测服务
酸性铬蓝K DL-Thioctic acid 3270-25-5
HC0165 有机玻璃离心管架
ARB13434 鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)代做ELISA实验 Chicken soluble endothelial protein c receptor,sepcr ELISA KIT
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ARB11900 人磷酸苷油酸脱*酶(GADPH)血清中含量检测
BL1316 2×Pfu PCR MasterMix(不含染料)
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657-27-2 L-Lysine L-赖*酸盐*(代"酸")盐
ARB14176 人可溶性CD14(sCD14)含量测试
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·E-64蛋白酶抑制剂
编号:SY0329
规格:5mg
E-64是一种不可逆的,强效,高选择性半胱*酸蛋白酶抑制剂和*蛋白酶激活抑制剂,可以透过细胞和组织,且具有低毒性,因此被广泛地用于在体内研究中。E-64不能抑制丝*酸蛋白酶(除胰蛋白以外)。E-64可溶于水,在pH2-10体系中稳定,但在*水或HCl体系中不稳定。作为蛋白酶抑制剂使用时,建议工作浓度1-10μM。
CAS:66701-25-5
分子式:C15H27N5O5
分子量:357.41
外观:白色粉末
纯度:≥99%
溶解性:溶于水
储存条件:2~8℃
结构式:

·40%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺,19:1
编号:SY0339
英文名称:40% Acryl/Bis Solution, 19:1
规格:500ml
Acryl-Bis常用于配制聚丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶是由丙*(代"烯")酰胺(Acrylamide,简称Acryl)和交联剂甲叉双丙*(代"烯")酰胺(N,N’-methylene bisacrylamide,简称Bis)在由TEMED(N,N,N’,N’-四甲基乙二*(代"胺"))催化过硫*酸还原产生的自由基的存在下,引发聚合反应,形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。凝胶的孔径由两个参数决定,分别是单体总浓度(%T, w/v)和交联剂比重(%C)。
产品性质

通过改变这两个参数,可优化孔径确保得到最佳的分离效果和最佳分辨率。%T决定凝胶的相对孔径大小,%T越高,平均孔径越小。
本品为含40%(w/v)Acryl/Bis的水溶液,两者之间的比例为19:1,更适合DNA测序和核酸分离。
储存条件:4℃,避光
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·免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)
编号:SY0319
英文名称:Lysis Buffer for WB/IP Assays (without enzyme inhibitors)
规格:100ml
本品WB/IP裂解液,是一种非变性条件下的裂解液,可以有效维持原有的蛋白间的相互作用。其主要裂解成分为1%的Triton X-100,不含蛋白酶、磷酸酶等抑制剂,裂解得到的蛋白样品可用于Western、IP、CoIP以及许多兼容1%Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。
注意事项
1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂或不加酶抑制剂。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3)如果WB/IP裂解液得到的蛋白样品是用于酶活性测试或一些生物小分子的检测,需要测试标准品用该裂解液稀释后是否会显著影响标准曲线,如无显著影响,则可继续使用。
4) 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
(一) 细胞样品
1)融解WB/IP裂解液(无抑制剂),混匀。取适当量的裂解液,根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。因为大团细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀、免疫共沉淀、酶或生物小分子检测等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解WB/IP裂解液(无抑制剂),混匀。取适当量的裂解液,根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
3)按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
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文献和实验Hoechst33258(或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 (或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液:称取Hoechst33258(或Hoechst33342)1mg,用20ml蒸馏水溶解,过滤,4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液,pH7.0。 固定液:4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化,用PBS洗5min; 或冰冻切片用冰丙酮固定15min,吹干,用PBS洗5min; 或细胞
Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining
of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells
1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。
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