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840
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一周
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖pUM19-T Vector TA克隆载体品牌在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:pUM19-T Vector TA克隆载体品牌
产地:国产|进口
规格:1μg
品牌:百奥莱博
pUM19-T载体是一种用于PCR产物高效克隆(TA Cloning)的专用载体。它是在线性化pUC19载体的基础上,在两侧的3’端添加碱基T而制成。经特殊工艺改造后,使其具有较高的克隆效率:
1)特殊的纯化方式使得超过99% 的pUM19载体两端都具有3’-T突出端,因此极大的降低了载体自连率。
2)由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR 产物的3’端添加一个A,可与pUM19载体3’ 端的T互补连接,因此可大大提高PCR 产物的连接和克隆效率。
3)pUM19载体多克隆位点位于β-lactamase基因内,可以通过蓝白斑快速筛选含有插入片断的重组子。
产品组份:
pUM19-T Vector (50 ng/μl)————20 μl
500 bp control insert (50 ng/μl)————20 μl
使用说明
1. 将载体置于冰上融化。建议第一次使用时将载体分装成小份保存,每次取一支使用。
2. 按下表配制连接反应体系:
| ddH2O | To 10 μl |
| 10×Ligase Buffer | 1 μl |
| pUM19-T Vector (50 ng/μl) | 1μl (约0.025 pmol) |
| 插入片段* | 0.075 pmol~0.25 pmol |
| T4 DNA Ligase (400 U/μl) | 1 μl |
注:插入片段与载体的摩尔比应在3:1~10:1之间。请根据琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测确定插入片段的浓度,并根据其大小计算摩尔量。1 pmol 1 kb双链DNA的质量约为660 ng。
3. 对照反应体系(可选):
| ddH2O | 6 μl |
| 10×Ligase Buffer | 1 μl |
| pUM19-T Vector (50 ng/μl) | 1 μl (约0.025 pmol) |
| 500 bp control insert(50 ng/μl) | 1 μl (约0.15 pmol) |
| T4 DNA Ligase (400 U/μl) | 1 μl |
4. 轻轻吹打混匀反应体系,室温22-26℃孵育1-2小时,或16℃过夜。
5. 转化:
1) 将连接产物加入到100 μl感受态细胞中(连接产物的体积不要超过感受态细胞体积的1/6),轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
2) 将离心管置于42℃水浴,不要晃动,准确热激90s后,立刻置于冰水浴中,不要晃动,静置2-3分钟。
3) 向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
4) 2500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬混匀,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀,室温正置10min。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
【注】:如果使用超级感受态细胞(转化效率>108 cfu/μg),可以直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。
注意事项
1) 尽量避免反复冻融,可将载体和对照片段分装成小份后保存。
2) 连接使用的PCR 片段3’ 端应带有A 末端;Pfu DNA Polymerase (SY0036)等高保真聚合酶的扩增产物不带A,应先在其末端加A后再进行TA克隆。
3) 为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
附1:pUM19-T 载体结构
储存条件:-20℃。
除pUM19-T Vector TA克隆载体品牌外,我公司正在打折促销以下产品:
·赤霉素,赤霉素A3
编号:SY0621
英文名称:Gibberellic Acid (GA3)
规格:5g
本品适用于植物细胞培养,可先溶于乙醇(50 mg/ml),然后用水稀释到需要的工作浓度,建议现配现用。也可过滤除菌后,以相对高些的储存液(稀释的水溶液)浓度于4℃避光保存。
赤霉素(Gibberellic acid),也称为赤霉素A3(GA3),一种内源性的植物生长调节剂,在植物发育过程中发挥着各种重要功能:
1)刺激细胞分裂和延伸从而促进根茎快速延伸;
2)对需要层积处理或者光照诱导发芽的一些植物,赤霉素可解除休眠,诱导有丝分裂和开始;
3)提高种子萌发率。还能参与一些生理活动,比如向重力性,张力和开花式样等。低浓度的GA3可非常显著的调控植物生长,常用工作浓度为0.01-5 mg/L。高浓度的GA3可能会产生相反的效果。
中文别名:九二零;赤霉素X;赤霉素A3;赤霉酸;
英文别名:A3; GA3
CAS:77-06-5
分子式:C19H22O6
分子量:346.4
外观:白色结晶
溶解性:易溶于甲醇、乙醇、碳酸**、醋酸*水溶液,不溶于水或乙*(代"醚")
储存条件:4℃
结构式:
·iFluor 555标记鬼笔环肽(橘色)
编号:SY0568
英文名称:iFluor 555 phalloidin
规格:300T
本品为iFluor 555标记的鬼笔环肽,可发出橘红色的荧光,具有独一无二的高亮度和光稳定性,且染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。iFluor 555 鬼笔环肽染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容,包括荧光蛋白、纳米晶体和其他iFluor偶联物(包含iFluor偶联二抗)。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。本品以1000×储存液形式(溶于DMSO)提供。
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片、细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
分子量:~1300
最大激发/发射波长:556/574nm
溶解性:溶于DMSO
储存条件:-20℃避光干燥,有效期一年
结构式
pUM19-T Vector TA克隆载体品牌关键词:百奥莱博,SY0295,pUM19-T Vector TA克隆载体
牛胆盐 β-Sitosterol
Pollak三色染色液 4×50ml|4×100ml
BTN130869 人超氧化物歧化酶 Superoxide Dismutase
姬姆萨氏色素 Glutathione Sepharose 4B 51811-82-6
BTN100201 海量PCR片段纯化试剂盒 Mega PCR Clean-Up Kit
BL0646 丁基-琼脂糖凝胶4B Butyl -Sepharose 4B
H0301 新生牛血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/500ml/500ml*20
PY02-236 T1N3肉汤 250克
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17372-87-1 伊红Y(水溶) Eosin Y
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pUM19-T Vector TA克隆载体品牌关键词:百奥莱博,SY0295,pUM19-T Vector TA克隆载体
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购pUM19-T Vector TA克隆载体品牌。
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