快速核酸银染试剂盒北京价格

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")快速核酸银染试剂盒北京价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：快速核酸银染试剂盒北京价格
规格：1000ml
品牌：百奥莱博
英文名：Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid
编号：SY0274
分子生物学实验中，常利用银染的方法显示聚丙*(代"烯")酰胺凝胶或者琼脂糖凝胶中的核酸条带，其检测原理是：银离子(Ag+）可与核酸形成稳定的复合物，随后Ag+ 在碱性环境下被还原剂如甲醛还原成银颗粒，后者通过显色可把核酸电泳条带染成黑褐色。该方法检测灵敏度比EB高达200倍，常用于检测SSR标记、SNP标记等。

常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等若干个步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。而本品的推出可大大改善上述问题，主要体现在：1）超快速，整个过程仅需20分钟；2）操作简单，只有染色和显影两步；3）灵敏度跟常规方法相当，比EB高200倍，能检测到10ng的DNA条带。4）两个成分都是现用现配，可重复性好。

按照本方案提供的配制方法，共可配制试剂A和试剂B分别1000ml。

产品组份：

 

组分名称	规格	外观
试剂A 1	2g	干粉
试剂A 2（10×）	100ml	液体
试剂A 3（10×）	100ml	液体
试剂B 1（10×）	100ml	液体
试剂B2	5ml	液体

注意事项：
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）银染主要出现在PAGE胶的表面，因此该方法更适合用于薄胶（0.5-0.75mm）的检测。
3）染色过程中，缓慢的振荡是必要的，一般选择40-60 rpm。
4）凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致，所以全程操作中都应带手套。
5）PAGE凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的，所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS的去离子水。
6） 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面，可能是几步漂洗过程不够彻底，或染色过程温度太低。
7）较深的银染背景多是丙*(代"烯")酰胺中的杂质所致。
8）室温操作时，温度的波动往往会干扰银染的效果，恒温水浴可以解决这个问题。
9）染色使用的玻璃器皿必须非常干净，用酸浸泡可以满足要求。
10）银染应尽快照相，随着时间延长，蛋白条带会变浅，而背景会加深。
11）影响硝酸*(代"银")染色效果的因素很多，其使用容器的材质也是一个非常重要的因素。通常玻璃平皿是最理想的银染容器，其化学性质极其稳定，几乎不与银染试剂中的任何成分发生反应，且不具有吸附染料的特性。其次是医用搪瓷盘，瓷釉为无机玻璃质材料，能耐各种浓度的无机酸(包括强氧化性酸)、有机酸、弱碱和强有机溶剂，但不耐酸、碱介质交替使用，而常规银染法就是酸碱介质交替使用，因此搪瓷盘银染效果不如玻璃平皿。塑料种类较多，如果塑料是由含*基官能团的有机物（脲、三聚*胺或*代三聚*胺）与醛类（主要是甲醛）化合物经缩聚反应而得，则这种塑料会在碱性溶液中与有强还原作用的甲醛发生反应，进而使甲醛消耗，减弱银离子与蛋白的结合，降低显色敏感度和显色速度。

操作方法

1 配制试剂A（以100ml为例）
所需要配制的试剂A（即染色液）的体积跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。本方案以配制100mL试剂A为例进行详述，请根据具体凝胶大小，确定实际所需染色液用量，再按比例改变各组分用量。
以100ml试剂A为例，在一干净烧杯中加入下列组分搅拌混匀即可。试剂A需要新鲜配制。
去离子水：80 mL
试剂A1：0.2 g
试剂A2：10 mL
试剂A3：10 mL

2 配制试剂B（以100ml为例）
所需要配制的试剂B（即显色液）的体积跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。本方案以配制100ml试剂B为例进行详述，请根据具体凝胶大小，确定实际所需试剂B用量，再按比例改变各组分用量。
以100ml 为例，在一干净烧杯中加入下列组分搅拌混匀即可。试剂B需要新鲜配制。
去离子水：89.5 mL
试剂B1：10 mL
试剂B2：0.5 mL

3 染色
1）PAGE电泳结束后，将PAGE胶转移到装有去离子水的瓷盘中，进行漂洗，2min/次，共2次。
2）将PAGE胶转移到适当体积的试剂A，使试剂A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温染色10min。
3）倒掉试剂A，用去离子水快速漂洗2次，每次30秒。
4）将PAGE胶转移到适当体积的试剂B，使试剂B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到颜色显现，一般需要10min左右。
5）将PAGE胶置于适当背景下照相。

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·pUM19-T Vector TA克隆载体
编号：SY0022
规格：5μg
pUM19-T载体是一种高效克隆PCR产物（TA Cloning）的专用载体。它是在线性化pUC19载体的基础上，在两侧的3’端添加碱基T而制成。特殊的纯化方式使得超过99%的pUM19载体两端都具有3’-T突出端，因此极大的降低了载体自连率。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR 产物的3’端添加一个A，可与pUM19载体3’端的T互补连接，因此可大大提高PCR 产物的连接和克隆效率。pUM19载体多克隆位点位于β-lactamase基因内，可以通过蓝白斑快速筛选含有插入片断的重组子。连接使用的PCR 片段3’端应带有A 末端；Pfu DNA Polymerase等高保真聚合酶的扩增产物不带A，应先在其末端加A后再进行TA克隆。本品随载体提供对照片段(500bp)用于阳性对照反应。

1.将载体置于冰上融化。建议第一次使用时将载体分装成小份保存，每次取一支使用。

2.按下表配置连接反应体系
ddH2O——To 10 μl
10×Ligase Buffer——1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)——1μl (约0.025 pmol)
插入片段*——0.075 pmol～0.25 pmol
T4 DNA Ligase (400 U/μl)——1 μl
注：插入片段与载体的摩尔比应在3:1～10:1之间。请根据琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测确定插入片段的浓度，并根据其大小计算摩尔量。1 pmol 1 kb双链DNA的质量约为660 ng。

3.对照反应体系（可选）：
ddH2O——6 μl
10×Ligase Buffer——1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)——1 μl (约0.025 pmol)
500 bp control insert(50 ng/μl)——1 μl (约0.15 pmol)
T4 DNA Ligase (400 U/μl)——1 μl

4.轻轻吹打混匀反应体系，室温22-26℃孵育1-2小时，或16℃过夜。
5.转化：
1) 将连接产物加入到100 μl感受态细胞中(连接产物的体积不要超过感受态细胞体积的1/6)，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。
2) 将离心管置于42℃水浴，不要晃动，准确热激90秒后，立刻置于冰水浴中，不要晃动，静置2-3分钟。
3) 向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基，150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。
4) 2500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬混匀，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀，室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。
注：如果使用超级感受态细胞（转化效率>108 cfu/μg），可以直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。

储存条件：-20℃。

注意事项
1) 尽量避免反复冻融，可将载体和对照片段分装成小份后保存。
2) 为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。


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·支原体喷雾剂(即用型)
编号：SY0546
规格：500mL
支原体喷雾剂能阻止真菌（和孢子），细菌（和孢子），支原体和病毒（包括HIV和Hepatitis B）的生长和污染。它的活性成分是季铵类衍生物，不含汞，甲醛，*酚或酒精等刺激性物质，无毒并可以生物降解。对一般的工作台和器材表面没有任何损伤。本品为1×的工作液，直接使用即可。

使用方法
1） 每两个星期喷一次CO2培养箱，喷洒前不需要清空培养箱。
2） 超净工作台每次使用前喷一次，待其自然风干。

储存条件：室温，有效期18个月

·15%预制胶，12孔
编号：SY0375
英文名称：Precast Protein Gels, 15%, 12 wells
规格：1盒（10块）
本品通过pH中性缓冲液制备，丙*(代"烯")酰胺与甲叉丙*(代"烯")酰胺配比是29：1，其规格为浓缩胶5%，分离胶15%，胶板尺寸10×8cm，凝胶厚度1 mm，12孔梳齿，单孔最大上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液，蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad，天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。

N,N-亚甲基双丙*(代"烯")酰胺（甲叉丙*(代"烯")酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比，使用预制胶具有以下优点：1）即开即用，不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固，节省了宝贵的时间和精力；2）不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂（丙*(代"烯")酰胺/甲叉丙*(代"烯")酰胺：神经毒性和遗传毒性；TEMED：强神经毒；过硫*(代"酸")铵：可严重损伤呼吸道，眼睛，皮肤）；3）大规模生产，胶与胶之间重复性好，质量稳定，不像手工灌胶那样结果差异大。

使用方法

1）剪开包装取出胶，撕去胶板底端胶纸，将预制胶固定在电泳槽中，加入电泳缓冲液没过梳齿部位，双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢（一定要慢，否则会将胶齿拔断或拔歪）拔出，在前后板的上方中央卡上一个“V”型卡（通过加固前后板，不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙，还可稳定跑胶质量，电泳过程中“V”型卡不可取出），上样后进行电泳，电泳后取出胶板，用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开，将胶取出，弃去塑料板。
2）电泳：使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液（tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%）。推荐使用低压100V，15min换高压150V跑至电泳结束。
3）转膜：使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液（含 20%甲醇或乙醇），操作与实验室原有操作完全相同。

储存条件：4℃，有效期一年。

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本品含有的部分试剂如丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺有毒，对人体有害，请注意适当防护。
3）电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液，试剂纯度不够，反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ，因为引入的*离子和*离子会影响电泳效果。
4）电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸，否则电路不通，无法电泳。
5）拔梳子时最好浸没在电泳缓冲液中拔，一方面由于液体润滑梳子更容易拔，另一方面不会产生气泡。另外拔梳子时越慢越好，如此可防止梳齿被拔断或拔歪。
6）在电泳后开板取胶时，用小号一字螺丝刀或中号镊子插入左右两板间缝隙，用力搬动，两板即可应声分开，此时两板底部还不能分开，要通过掰开两板取出凝胶。
7）在上样前，使用“V”型卡加固前后板（加样和电泳过程“V”型卡不可移动或拔出），使用时只需将一个“V”型卡“轻轻地”（不必卡到底，不掉即可）卡在前后板的上端中间区域，可确保上样不会产生板胶间的缝隙从而导致样品泄露，电泳时“V”型卡不必取出如此可有助于稳定跑胶质量。
8） 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露，可通过两种方式解决本问题：一是内槽加满缓冲液，外槽液面加至距内槽液面3-5mm，从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装，使其没有凸起的平滑面朝外，从而防止漏液。


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·零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)
编号：SY0282
英文名称：Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted
规格：20T
本试剂盒是利用拓扑异构酶（Topoisomerase）高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成，与传统的T4连接酶相比，具有以下优势：
1）快速，仅需1-5分钟即可完成连接反应。
2）高效，无自连，阳性克隆率接近100%，无需设置蓝白斑筛选；
3）操作简单，从连接到涂板仅需15-20min。操作过程省去冰浴、热激和1h复苏。
4）可连接长达10kb目的产物；
5）本产品不含多克隆酶切位点（MCS），使用者在引入后续酶切位点进行酶切操作时，不会受到MCS位点的影响，从而增加酶切效率以及克隆成功率。

产品用途：A尾PCR产物的快速克隆。克隆后PCR产物的快速测序【使用M13F/M13R引物】。

产品组份：
pESI-T simple vector (30ng/μl)————20μl
1kb control insert (40ng/μl)——————5μl
10×Enhancer————————20μl

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

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