pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞

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北京百奥莱博专业生产供应pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞)厂家价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞)厂家价格
编号：SY0023
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
重组蛋白功能研究时，常需要将其在细胞内定位到具体的细胞器，例如细胞核（ nucleus）内、细胞质（ cytoplasm）内、线粒体（mitochondria）或内质网（endoplasmic reticulum）上等。而细胞内某种蛋白的存在部位取决于蛋白序列中的“定位序列”（targeting sequences）或“信号肽”，这些序列可能位于蛋白质的N端、C端或蛋白质内部。一旦蛋白质被转运到最终细胞部位，这些序列可能会被保留，也可能被切除。研究者可以根据自己的研究目的，将感兴趣的ORF片段构建到表达载体中进行研究。

pCMV/myc/mito线粒体定位表达载体是以pcDNA3.0为基本骨架改造的质粒，可进行哺乳动物细胞瞬转和稳转。具有多克隆位点，可将任何重组蛋白导向至线粒体内。

产品性质：
质粒类型：哺乳动物细胞表达
大小：4967
启动子类型：CMV
蛋白标签：C端Myc标签
抗性：Amp

储存条件：-20℃，有效期半年。

注意事项：
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本载体在重组蛋白C端加有Myc标签，可用于检测重组蛋白表达。如果不要带有Myc标签，可在重组蛋白基因中加入终止密码子。

我公司的pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞)厂家价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·人源高氧化程度低密度脂蛋白
编号：SY0441
英文名称：Human High Oxidized Low Density Lipoprotein (Human High Ox-LDL)
规格：2mg
我司提供的人源高氧化低密度脂蛋白（Human High Oxidized Low Density Lipoprotein，High Ox-LDL），是由过度铜离子介导人血浆来源的LDL进行的氧化修饰。新鲜血浆经检测为HCV，HBsAg和HIV阴性。本产品为无菌包装，可以直接稀释使用。本High Ox-LDL具有的高氧化水平使其产生明显的氧化应激，能够用来诱导细胞凋亡，以及建立细胞损伤模型。我们还提供中等氧化程度的Ox-LDL（SY0439），广泛用于脂质代谢的研究。除提供Ox-LDL，我们还提供人源乙酰化LDL（Ac-LDL），以及荧光标记的LDL。

LDL是由极低密度脂蛋白（VLDL）转变而来，主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞，运输到肝脏合成胆酸，其可用于研究受体介导的内吞作用过程，尤其是在动脉粥样硬化等疾病中，其血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。

氧化的LDL（Ox-LDL）是修饰LDL中的一类。修饰的LDL除包括氧化修饰的LDL外，还包括乙酰化LDL及丙二醛（MDA）、4-羟烯酸（4-HNE）直接结合的LDL，这些未经氧化修饰而仅经一般化学修饰的LDL称为衍化的LDL。不同于衍化的LDL，Ox-LDL 的生理学独特性表现在：1）在细胞生理功能影响上，Ox-LDL可诱发细胞毒性作用，影响花生四烯酸的代谢，抑制胆固醇酯化作用等，但衍化的LDL无上述效应；2）Ox-LDL消耗LDL内源性抗氧化物质，使LDL上的维生素E含量下降，而MDA-LDL无上述效应；3）氧化修饰涉及脂质过氧化反应，LDL中的PUFAs被氧化。MDA对LDL修饰，是直接和ApoB-100结合成希夫氏碱，脂质过氧化反应轻微；4）氧化LDL在氧化程度低时，ApoB降解；在氧化程度高时，ApoB又可发生再聚合。MDA对LDL的修饰，ApoB无降解、聚合反应发生；5）Ox-LDL 产生的荧光峰波长为430nm，而MDA -LDL的荧光峰波长为460nm。Ox-LDL不经LDL受体代谢，由清道夫受体识别、结合、内吞饮入细胞并丧失正常的胆固醇代谢途径，引起细胞内脂质沉积，泡沫样变。

LDL氧化修饰的方式有很多种，常见的有：1）细胞介导的LDL氧化修饰，又称为生物氧化修饰的LDL。如内皮细胞，巨噬细胞，单核细胞都具有此功能；2）过度金属离子介导的LDL氧化修饰，如Ca2+，Fe2+等；还有其他形式的氧化修饰，包括物理方法如紫外线，或过氧化物酶催化。

蛋白纯度：＞97%（琼脂糖凝胶电泳）
蛋白浓度：0.8-3.0 mg/ml
外观：无色乳状液体
缓冲液组分（Buffer Components）：PBS, pH 7.4
氧化程度（Oxidized Level）：TBARS检测（根据MDA的含量反映LDL的氧化程度）
起始LDL：0.1~0.5 nmol MDA/mg蛋白
高Ox-LDL：90~100 nmol MDA/mg蛋白
储存条件：4℃，避光，有效期4周


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·小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒
编号：SY0769
英文名称：Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody
规格：150T
本试剂盒可用于检测以小鼠单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验，检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合：已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物，生物素化二抗特异性结合上述复合物，经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素（即抗原所在位置），最后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。

本品可适用于多种类型样本，如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。

产品组份：

封闭液————————————7.5ml
生物素标记抗小鼠二抗————7.5ml
HRP 标记链霉亲和素————7.5ml
20×DAB底物缓冲液————400µl
20×H2O2浓缩液————400µl
20×DAB浓缩液————400µl

使用方法

1 样品准备
染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10min。石蜡切片于室温下用二甲*常规脱蜡、入水、抗原修复。
【注】：从此步骤起，严禁标本或组织切片干燥。

2 染色（以石蜡切片为例）
1）将处理好的石蜡切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10min，以消除内源性过氧化*酶的作用。
2）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
3）封闭：加一滴封闭液于组织切片上（需完全覆盖待检组织）孵育10min。
4）倒掉或吸干液体（不要冲洗）。
5）一抗：每张切片加2滴（100μl）或适量一抗（需完全覆盖待检组织），湿盒内孵育30-60min。
6）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
7）二抗：每张切片加一滴生物素标记抗小鼠二抗（需完全覆盖待检组织），孵育10min。
8）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
9）酶孵育：每张切片加一滴HRP标记链霉亲和素（需完全覆盖待检组织），孵育10分钟。
10）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
11）制备DAB显色液。
按照【20×DAB浓缩液：20×H2O2浓缩液：20×DAB底物缓冲液：水=1:1:1:20】的比例进行配制显色液，以1张切片为例，分别吸取上述3种溶液各2.5µl溶于50µl去离子水中，充分混匀即可。
【注】：
① DAB显色液需现配现用，避光放置，且在30min内使用。
② 可根据需要一次染多张切片，各种试剂量按照上述比例放大即可。
12）显色：向切片上滴加一滴上述DAB显色液，室温显色2-5min（此步可在显微镜下控制显色程度）。
13）自来水充分冲洗。
14）用合适复染剂复染，盐*(代"酸")酒精分化。
15）继续后续脱水、透明、封片、镜检。

3结果判定：阳性结果处显处染棕黄或棕褐色。

储存条件：4℃，勿冷冻，有效期一年。


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·胶原酶III型
编号：SY0537
英文名称：Collagenase III
规格：100mg
本品为III型胶原酶，≥100 U/mg solid，常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性*基酸（X）和甘*酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：
1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；
2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；
3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；
4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

分子量：68-130 kDa
激活剂：Ca2+、Zn2+
抑制剂：EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum
活力单位：在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1µM L-亮*酸的酶量定义为1个酶活力单位。
储存条件：4℃避光，有效期两年

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