细胞膜可渗透钙离子荧光探针价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖细胞膜可渗透*离子荧光探针价格在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：细胞膜可渗透*离子荧光探针价格
编号：SY0554
品牌：百奥莱博
英文名：Fluo-4, AM, Cell Permeant
规格：50μg
产地：国产|进口
细胞生物学实验中常使用Fluo-3, AM作为一种荧光探针来检测细胞内*离子浓度变化。其检测原理基于Fluo-3,AM可穿透细胞膜进入细胞，之后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3游离配体几乎是非荧光性的，其荧光不会随*离子浓度升高而增强。但是，当它与细胞内*离子结合后可以产生较强的荧光，荧光会增加60至80倍。

Fluo-4, AM是*指示剂Fluo-3,AM的升级版本，主要变化为后者分子上的两个*原子被Fluo-4,AM上的*所取代，该结构上的微小变化使Fluo-4,AM加载更快，在相同浓度下检测信号更强。

本产品为Fluo-4,AM粉末状，用于细胞内*离子检测时，Fluo-4, AM的常用浓度为0.5-5μM。

CAS：273221-67-3
分子式：C51H50F2N2O23
分子量：1096.95
Ex/Em(nm)：Ex/Em=494nm/516nm
纯度：≥98%
外观：粉末
储存条件：-20℃避光干燥，有效期至少6个月。
结构式


注意事项
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）本Fluo-4,AM 容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。
3）第一次使用时，建议母液即配即用。试剂溶解后尽可能在短时间内使用，以保证实验效果。
4）母液遇水极易分解，如果不能一次用完，建议分装保存，例如分装成5μl/管，用封口膜封口，并用铝箔纸包裹，放在一个密闭性能好的塑料袋中，并放入一包干燥剂，在≤-20℃密封避光保存。
5）建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、*离子荧光探针的终浓度、培养时间等，找到最佳实验条件。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

除细胞膜可渗透*离子荧光探针价格外，我公司正在打折促销以下产品：

·DyLight 405标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号：SY0668
英文名称：DyLight 405-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
规格：100μl
本品为DyLight 405标记山羊抗兔IgG(H+L)。推荐稀释比例：1:25～100。

本品是使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的兔IgG分子，也会与其他兔免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应，但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。该荧光基团Amax（最大激发波长）为400nm，Emax（最大发射波长）为420nm。

本品适合做单标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。要做多标（multiple-labeling）实验，建议使用与相近物种的血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：DyLightTM 405, Amax=400, Emax=420
防腐剂：0.025% 叠氮化*
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

·聚凝胺
编号：SY0605
英文名称：Polybrene (hexadimethrine bromide)
规格：500ul
聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染，慢病毒介导的基因转染，作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂（肝素拮抗剂），常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序，因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。

本产品为即用型溶液，粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液，并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1：2000稀释，依细胞种类不同稀释比例不同，具体查阅相关文献。
注：Polybrene对某些细胞（如末端分化的神经元，DC细胞）毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。

操作步骤(仅供参考，具体使用浓度请参考相关文献)

实验1：逆转录病毒感染（Retroviral Infection）
（1）重组逆转录病毒原液的制备：取5ml生长培养基（5%血清）加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后，吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
（2）待感染细胞的培养：100mm培养盘内加入10ml完全培养基，细胞密度为5×105/盘。
（3）病毒感染：细胞培养24h后，吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 （或将病毒原液稀释到2ml）感染细胞，polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37℃孵育3-6h。
（4）收集病毒颗粒：加入8ml完全培养基。感染3天后，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。

实验2：转染
（1）完全生长培养基培养细胞，培养细胞密度约50%；
（2）孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液，按如下操作制备混合液：①添加完全培养基（60mm培养皿2ml，100mm培养皿3ml），37℃预热；②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀；③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
（3）去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
（4）去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution（15%DMSO in 1X HBSS）轻轻盖住细胞（60mm培养皿3ml，100mm培养皿4ml）。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
（5）立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗，100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
（6）加入完全培养基到细胞中；
（7）稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期2年。


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·PR-GFP报告基因质粒
编号：SY0162
英文名称：Progesterone receptor (PR) GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
PR-GFP报告基因是用于检测PR转录活性水平为目的的报告基因。PGR(progesterone receptor)主要介导孕酮的生理作用。孕酮是动物内分泌系统、免疫系统、经血调控、组织修复与再生、炎症反应、血管发生、胚泡着床与维持妊娠交互作用的关键因子，尤其在动物生殖活动中起着非常重要的作用。

PR-GFP报告基因主要用于检测细胞Progesterone 信号通路中的孕酮受体的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMPR-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个PR结合位点，可以高效地检测PR的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得PR-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGMPR -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMPR -GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


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·零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒
编号：SY0283
英文名称：Zero TOPO-Blunt Cloning Kit
规格：20T
本试剂盒是利用拓扑异构酶（Topoisomerase）高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成，与传统的T4连接酶相比，具有以下优势：
1）快速，仅需1-5分钟即可完成连接反应。
2）高效，无自连现象，阳性克隆率接近100%，无需设置蓝白斑筛选；
3）操作简单，从连接到涂板仅需15-20min。操作过程省去冰浴、热激和1h复苏。
4）可连接长达10kb目的产物。

产品用途：平末端PCR产物的快速克隆。克隆后PCR产物的快速测序【使用M13F/M13R引物】。

产品组份：
pESI-Blunt vector 30ng/µl)————20µl
1kb control insert(40ng/µl)————5µl
10×Enhancer————————20µl

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

·饱和酚
编号：SY0271
英文名称：Tris-saturated Phenol Tris
规格：250ml
室温下*酚是一种结晶固体，通常使用水相缓冲液或者*仿对其进行溶解。分子生物学中常用于核酸的提取。其原理是多数蛋白质相对于水相更易溶于*酚，而相反地，核酸较之酚相更易溶于水相，因此在核酸提取过程中通过离心，则可分为两层，其中底层为有机相，溶解有蛋白质；而上层液体为水相，溶解有核酸。而对于不同类型核酸的分离则依赖于水相pH值的变化。pH 在4-6之间DNA 仍留在有机相表面，而RNA则位于水相，因此可利用偏酸性饱和酚来实现RNA的分离；DNA的分离则要求pH值达到7.5-8.0之间，通常使用Tris缓冲液来达到这一要求。

本品为Tris饱和酚，即Tris平衡酚，其pH为7.9±0.2。在24℃呈单相，当温度＜24℃则分成两相，溶液内含有抗氧化剂8-羟基喹*(代"啉")，适用于常规DNA的提取。碱性条件下，DNA在水相，RNA在酚相，来分开DNA和RNA。

注意事项

1） 本品具有神经毒性，请小心操作。
2） 核酸提取过程中加入*仿也可提高抽提效率，*仿可使蛋白变性，从而使核酸蛋白更好的分离。此外，*仿还可有助于脂质的去除；
3） 核酸提取过程中也通常向酚：*仿中加入异戊醇来阻止泡沫的形成。
4） 如果酚相变为红色或者棕色，说明已经被氧化，不可使用。
5） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：4℃，有效期6个月。

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