肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(E

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)价格的品牌：百奥莱博，是优质的细菌PCR检测试剂盒产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)等细菌PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)价格
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
编号：SYA089
产地：国产|进口
等级：科研试剂

我公司的肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·人副流感病毒4型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA177
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
人副流感病毒4型单重荧光PCR检测试剂盒说明书
一、简介：
人副流感病毒(Parainfluenza viruses，PIVs)，是一种常常引起儿童下呼吸道感染的单链的RNA病毒，属于副黏病毒。本试剂盒用一对人副流感病毒4 型特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR 技术对人副流感病毒4 型RNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中人副流感病毒4 型(PIV4)的探针报告基团为FAM。

二、用途：
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子等临床样品中人副流感病毒4 型的特异性检测。适用于人副流感病毒4 型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
人副流感病毒4型反应液(PIV4-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
人副流感病毒4 型阳性对照(PIV4-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月，反复冻融次数不宜超过5次。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Stratagene MX系列，Bio-Rad系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(PIV4-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照PIV4-PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。其中FAM基团检测PIV4，淬灭基团为None。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC)：FAM和HEX/VIC/JOE通道全部阴性。
(2) 阳性对照(PIV4-PTC)：FAM和HEX/VIC/JOE通道均有扩增曲线。
以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效
8.3 结果判定
FAM通道：Ct值≤35，人副流感病毒PIV4亚型核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明人副流感病毒PIV4亚型核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明人副流感病毒PIV4亚型核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA 酶。
(3) PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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SJ0722 伊红染色液
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ARB11895 人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)酶联免疫定量检测 Human phospho-inhibitory subunit of nf-κbα,pikbα ELISA KIT
D-缬*酸 Molecular sieves type 13X 640-68-6
2′-*脱氧尿苷 Poly C 784-71-4
ARB11478 人胰岛淀粉样多肽(IAPP)ELISA代测服务 Human islet amyloid polyPeptide,iapp ELISA KIT
25988-63-0 Poly-L-Lysine多聚-L-赖*酸(3-7万)
ARB10630 人血清素/血清胺(ST)含量测试 Human serotonin,st ELISA KIT
天狼星红染色液-A液   100ml
HC0261 Eppendorf大容量电动移液器
ARB12964 小鼠血管紧张素转换酶(ACE)酶标法分析 Mouse angiotensin converting enzyme,ace ELISA KIT
ARB13771 黄曲霉毒素(AFT)elisa测定使用说明书 aflatoxin,aft ELISA KIT
PY02-236  T1N3肉汤  250克  
ARB11192 人艰难梭菌毒素A(ClostrIdIum dIffIcIle toxIn A)elisa检测操作说明书 含量
CYB163009 羊抗人IgM-RBITC(μ链特异)
*基黑10B染色液   100ml
SJ0822 特美汀
17372-87-1 伊红Y(水溶) Eosin Y
A8015-18 小鼠血清Mice Serum
抗体去除液(Western)   100ml
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·肠出血性大肠杆菌(O104)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA082
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副溶血性弧菌/霍乱弧菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA097
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·H1/H3型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA167
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛支原体(mycoplasma)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA507
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对牛支原体特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR技术对牛支原体的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可以感染者的病原学诊断。

二、用途
本试剂盒用于检测气管分泌物拭子、肺组织等样本中的牛支原体(MB)，用于牛支原体(MB)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
MB反应液(MB-qPCR MIX) 1管 672μL/管
核酸提取液(DNA Extraction ) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
MB阳性对照(MB-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为12个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
病死或扑杀牛，无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品；病牛灭菌棉拭子沾取气管分泌物，放入无菌试管中。
6.2 样品前处理
组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 PCR扩增
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(MB-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(MB-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(MB-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线，表明MB核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明MB核酸阴性。
（3） 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行MB核酸检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明MB核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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