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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京冠状病毒荧光PCR检测试剂盒(SARS)价格厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多冠状病毒荧光PCR检测试剂盒(SARS)等病毒PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京冠状病毒荧光PCR检测试剂盒(SARS)价格厂家
规格:48次/盒
编号:SYA179
品牌:百奥莱博
等级:科研试剂
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规格:48次/盒
人类细小病毒B19是英国科学家Cossart及其同事于1977年在筛查无症状乙肝患者血清时无意发现的,根据生化及分子生物学特点将其归为细小病毒科。由于其是在B组的第19号样品中发现的,故命名为B19病毒。最初人们认为B19是人群中普遍存在而不致病的一种病毒,但后来发现,B19感染是引起传染性红斑、慢性溶血性贫血患者发生再障危象、免疫抑制患者慢性贫血、孕期流产、死胎的病原体。
本试剂盒适用于检测人全血等标本中的人细小病毒(B19)DNA,适用于人细小病毒(B19)感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
【检验原理】
本试剂盒用一对人细小病毒B19特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对人细小病毒B19核酸进行体外扩增检测,用于对可疑感染者的病原学诊断。
【试剂组成】
名称 数量 规格
核酸提取液 2管 1.5ml
酶液 1管 50μl
B19反应液 1管 1.0ml
B19阳性质控品 1管 50μl
阴性质控品 1管 250μl
说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】
-20℃避光保存、运输、避免反复冻融,有效期12个月。
【适用仪器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
【标本采集】
1. 适用标本类型:人全血;
2. 标本采集:
血液:无菌注射器抽取外周血1-2ml注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管;
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
【使用方法】
1. 样品处理(样本处理区)
1.1 样本前处理
取抗凝血下层(细胞层)50μl,加入200μl ddH2O使其胀破。
1.2 DNA提取
1) 取上述处理好的标本40μl,加入等体积核酸提取液,100℃恒温处理10分钟,13000 rpm离心5分钟,取上清液转移至新的1.5ml EP管,-20℃保存;
2) DNA的提取也可以采用北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。
2. 试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数,设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1
管阴性对照+1管阳性对照),每测试反应体系配制如下表:
试剂 B19 反应液 酶液
用量 20μl 1μl
3. 加样(样本处理区)
将步骤1提取的DNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μl,加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。
4. PCR扩增(核酸扩增区)
4.1 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内;
4.2 推荐循环参数设置:
步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号
1 1 cycle 94℃ 2min 否
2 40 cycle 94℃ 15sec 否
55℃ 30sec 是
反应体系为25ul;荧光通道检测选择:FAM通道。
5. 结果分析判定
5.1 结果分析条件设定
1) 设置基线(baseline):一般情况下,对ABI 7500、7700等仪器设为6-15cycle,对PE5700设为3-15cycle,对MJ Research Option2设为6-12cycle。特殊情况可对基线适当调整。
2) 设置阈值(threshold):以阈值线刚超过阴性对照扩增曲线(无规则的噪音线)的最高点。
5.2 结果判断
1) 阳性:检测样本Ct值小于等于35.0,且曲线有明显的指数增长期;
2) 可疑:检测样本Ct值大于35.0且小于40.0,重复一次实验,如果Ct值仍小于40.0,且曲线有明显的指数增长期,为阳性,否则为阴性;
3) 阴性:检测不到样本Ct值或Ct值为40。
6. 对检验结果的解析
实验室环境污染,试剂污染,标本交叉污染会出现假阳性结果;试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果。
7. 质控标准
1) 阴性质控品:扩增曲线无对数生长期或无Ct值显示;
2) 阳性质控品:扩增曲线有明显对数生长期,且Ct值≤32;
以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
【注意事项】
1. 所有操作严格按照说明书进行;
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化,混匀并短暂离心;
3. 反应液应避光保存;
4. 反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7. 实验完毕后用10%次*酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京冠状病毒荧光PCR检测试剂盒(SARS)价格厂家关键词:SARS,冠状病毒荧光PCR检测试剂盒(SARS),SYA179,百奥莱博
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