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257
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括麻疹病毒荧光PCR检测试剂盒报价在内的病毒PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:麻疹病毒荧光PCR检测试剂盒报价
品牌:百奥莱博
等级:科研试剂
规格:48次/盒
编号:SYA247
想要了解更多关于麻疹病毒荧光PCR检测试剂盒报价的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·猪口蹄疫病毒亚I型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA647
等级:科研实验专用
规格:192次/盒|480次/盒
·甲型H1N1/甲型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA166
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对甲型流感病毒特异性引物,一对甲型H1N1特异性引物,分别结合一条特异性荧光探针,用一步法双重荧光RT-PCR技术对甲型流感病毒RNA、流感H1N1病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中甲型流感病毒的探针报告基团为VIC/HEX/JOE,流感H1N1病毒的探针报告基团为FAM。
二、用途:
本试剂盒适用于检测各种咽拭子、鼻拭子、泄殖腔拭子、组织样品等临床样品中甲型流感病毒和H1N1亚型流感病毒。可用于甲型流感病毒和H1N1亚型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供参考。
二、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
甲型流感/H1N1荧光qRT-PCR反应液(IAV-A/H1N1-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC) 1 管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI7500荧光定量PCR检测仪。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃。但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 样品RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光RT-PCR反应液(IAV-A/H1N1-RT-PCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1 µL N×1 µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。总体系20µL。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号 报告基团:设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道,可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测H1N1,VIC/HEX/JOE基团检测IAV-A,淬灭基团均为None,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道全部阴性。
(2) 阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) FAM通道:Ct值≤35 H1N1亚型流感病毒核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明H1N1亚型流感病毒核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明H1N1亚型流感病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
(2) HEX/VIC/JOE通道:Ct值≤35 甲型流感病毒核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明甲型流感病毒核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明甲型流感病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
麻疹病毒荧光PCR检测试剂盒报价关键词:麻疹病毒荧光PCR检测试剂盒,SYA247,百奥莱博
Acr-Bis(40%,19:1) 500ml
CYB164011 羊抗人IgG(1:500~2000)-HRP
ARB12748 小鼠CD19分子(CD19)Elisa分析 Mouse cluster of differentiation 19,cd19 ELISA KIT
7365-45-9 N-2-哌*(代"嗪")-N"-2-乙磺酸 HEPES
F030701 BIOTIN标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*BIOTIN
*氧乙酸 Acid blue 1 122-59-8
7240-90-6 X-gal
F030409 胶体金标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*GOLD
BL0965 封闭绵羊血清正常(原液) 10ml
2×Taq plus MasterMix 500μl|5×500μl
隐色结晶紫 L-Homoserine 603-48-5
ARB10800 人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)含量测试 Human anti-extractable nuclear antigen antibody,ena-ab ELISA KIT
碱性品红水溶液(1%) 100ml
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SJ0106 Cellulase RS 纤维素酶RS
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BL1138 BL21(DE3)受体菌
麻疹病毒荧光PCR检测试剂盒报价关键词:麻疹病毒荧光PCR检测试剂盒,SYA247,百奥莱博
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113-24-6 Pyruvic Acid 丙*(代"酮")酸*
BL0796 鸡IgG抗原(液体)
去氧野艽霉素盐*(代"酸")盐 PAR sodiu*(代"m") salt 73285-50-4
肌纤维染色液(Puchtler鞣酸偶氮荧光桃红法) 5×50ml
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108321-42-2 G-418 遗传霉素
磷酸葡萄糖异构酶 Sephadex LH-20 9001-41-6
癸基吡喃葡萄糖苷 L-Alanine 58846-77-8
PY02-250 阿奇霉素检定培养基 250克
CBZ-L-*丙*酸 5"-ATP,Na2 1161-13-3
ARB13619 兔子促卵泡素(FSH)尿液中含量检测 Rabbit follicle-stimulating hormone,fsh ELISA KIT
弱磷酸盐缓冲液(LoPBS,pH7.0) 100ml
盐*(代"酸")付玫瑰**(代"胺") Indoxyl-Glucuronide 569-61-9
BL1297 GST标签纯化树脂(GST Resin)
BTN131071 牛血清γ球蛋白标准品 Bovine γ IgG Standard
1M Tris (pH6.8) 100ml
ARB10792 人抗内因子抗体(IFA)酶联免疫定量检测 Human intrinsic factor antibody,ifa ELISA KIT
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文献和实验。 【产品研发意义】 埃博拉出血热(EHF)是由埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)引起的一种急性出血性传染病,发病率快,致死率高,是人类危害最严重的传染病之一,对公共卫生安全和人类的健康有很大的威胁。 到目前为止,EHF还没有有效治疗的药物和疫苗。我国尚未有检测到EBOV病毒,为了防止EBOV进入我国,建立一种快速、准确、敏感的检测方法显得尤为重要。为此,我公司研制出埃博拉病毒Z亚型核酸荧光PCR检测试剂盒、埃博拉病毒Z、S亚型双重核酸荧光PCR检测试剂盒和埃博拉病毒Z、S、B、C、R
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光共振能量迁移(FRET,Fluorescent Resonance Energy Transfer)原理:当两个荧光基团靠近时,高能量荧光基团会将受激发产生的能量转移到相临的低能量荧光基团上。由于标记在探针上的两种荧光基团所发出荧光信号的变化可以反映PCR扩增产物的数量变化,从而使得荧光PCR技术可以起到实时检测的目的。目前,根据荧光基团在寡核苷酸探针上的不同标记形式,各种荧光PCR检测试剂盒所采用的荧光探针基本可以分为三种类型:Taqman探针、分子信标和荧光杂交探针表1: Taqman探针、分子
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