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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒厂家价格在内的动物疫病ELISA检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒厂家价格
编号:SYA640
等级:科研试剂
规格:192次/盒
品牌:百奥莱博
欲了解更多猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒厂家价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·口蹄疫(FMDV)通用型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA500
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·脑膜炎奈瑟菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA111
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·玉米转基因Bt176单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA280
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪瘟病毒(CSFV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA393
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对猪瘟病毒特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步法荧光RT-PCR技术对猪瘟病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中猪瘟病毒的探针报告基团为FAM。
二、用途:
本试剂盒适用于猪病料、鼻咽拭子、血液等样本中的猪瘟病毒(CSFV)特异性检测。适用于猪瘟病毒(CSFV)感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
猪瘟病毒荧光qRT-PCR反应液(CSFV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可按常规方法提取,也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
6.2.1 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管,做好标识。
6.2.2 加入600μL裂解液,200μL样本,200μL*仿,混匀器上振荡5 s,4℃ 12000 rpm离心15 min。
6.2.3 吸取步骤6.2.2中的上清液转移至新的无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管中(避免吸出中间层),加入400 μL 异丙醇,颠倒混匀。
6.2.4 4℃ 12000 rpm离心15 min,弃上清;加入600 μL 75%乙醇。
6.2.5 4℃ 12000 rpm离心10 min,弃上清。打开离心管管盖,室温干燥5 min-10 min。
6.2.6 加入10μL 无核酸酶水,溶解管底的RNA,5000 rpm离心5 s,-20℃保存。若长期保存需放置-80℃冰箱。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(CSFV-qRT-PCRMIX)、酶混合物(EnzymesMIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(CSFV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(CSFV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明CSFV核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明CSFV核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行CSFVqRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明CSFV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒厂家价格关键词:SYA640,猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒,百奥莱博
·冠状病毒(HKU)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA180
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·脊髓灰质炎病毒2型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA206
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪出血性魏氏梭菌(CW)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA435
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·流感嗜血杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA043
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪链球菌/脑膜炎奈瑟菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA113
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·结肠弯曲菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA067
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪细小病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA778
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对猪细小病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对猪细小病毒核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、原理
该试剂盒适用于检测带毒猪血液、分泌物、排泄物以及肾、肺、肝、脑、睾丸、淋巴结和胎盘等组织标本中猪细小病毒(PPV)DNA,用于猪细小病毒(PPV)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
荧光PCR反应液 1管 672μL/管
阴性对照 1管 50μL/管
阳性对照 1管 50μL/管
FD1试剂 1瓶 15mL/瓶
FD2试剂 1管 500μL/管
FD3试剂 1瓶 15mL/瓶
FD4试剂 1瓶 30mL/瓶
FD5试剂 2管 2mL/管
吸附柱及收集管 1包 48套/包
四、储存条件及有效期
荧光定量PCR试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月;DNA提取试剂盒于常温保存,有效期为12个月。1.5mL离心管、移液器、吸头等请自备。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无DNA酶污染的离心管中备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.2 DNA提取
6.2.1 在上述样本中加入300μL FD1试剂和10μL FD2试剂,震荡混匀;
6.2.2 58℃孵育至完全裂解(样品不同而异,细菌、液体样本建议孵育15min,动物细胞、组织和粪便样本建议孵育15min-1h,样本裂解越完全,核酸提取效果越好);
6.2.3 12000 rpm离心5min,转移上清于一无菌离心管中;
6.2.4 在2.3的离心管中加入300ul FD3试剂,震荡混匀;
6.2.5 将全部溶液加入带膜吸附柱(收集管)中,12000 rpm离心1min,弃去流出液;
6.2.6 加入600ul的FD4试剂,12000 rpm离心1min,弃去流出液;
6.2.7 12000 rpm离心2min,去除残留液体;
6.2.8 将吸附柱放置于新的无核酸酶的1.5 mL离心管中,在膜中央加入20-50µL FD5试剂,室温静置1min,12000rpm离心1min,收集核酸溶液,-20℃保存,若长期保存需放置-80℃冰箱。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(PPV-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性质控品(NTC)/阳性质控品(PPV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(PPV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明猪细小病毒核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明猪细小病毒核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行猪细小病毒qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明猪细小病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒厂家价格关键词:SYA640,猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒,百奥莱博
·拉沙热病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA242
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽传染性支气管炎病毒(IBV)单重荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)
编号:SYA356
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对禽传染性支气管炎病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用一步法荧光RT-PCR技术对禽传染性支气管炎病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测气管渗出物、支气管和肺组织、肾脏或输卵管等标本中禽传染性支气管炎病毒(AIBV)RNA,用于禽传染性支气管炎病毒(AIBV)感染的辅助诊断及流行病调查,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
禽传染性支气管炎荧光qRT-PCR反应液(AIBV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 107copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 106copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 105copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 104copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 103copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 107copies/μL) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AIBV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AIBV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(AIBV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明SEA核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明SEA核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行SEA qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明SEA核酸阳性;否则判为样本阴性。
(5) 标准曲线相关系数数值介于0.97~1之间。(相关系数数值等同于r2值),根据斜率及Y轴截距列出计算公式,并通过标准曲线计算样品RNA含量拷贝数。
例如:Y轴截距=41.5 斜率=-3.83
公式为:Y=-3.83(logX)+41.5
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京百莱博科技有限公司是动物疫病ELISA检测试剂盒产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒厂家价格。
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文献和实验本文主要介绍 ELISA 试剂盒、实验样本、相关问题,帮助大家更好地开展实验 试剂盒 Q1:科研试剂盒与临床试剂盒的区别 ? A1:临床试剂是经过权威机构认可的,如 FDA、CFDA 等;而科研试剂一般是厂家自主研制,不需要通过权威机构验证。 经营临床诊断类产品的机构需要取得《医疗器械经营企业许可证》;经营科研试剂的机构不需要此证件。 临床试剂盒一般仅用于检测人血清/血浆等较为单一的分泌性样本类型;科研试剂盒的样本检测种类、检测范围则比临床试剂盒宽广得多。但一般来说,临床试剂盒的质量
猪弓形虫抗体 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中 弓形虫抗体 。 实验原理 : 本试剂盒 采 用双抗 原 夹心 酶联免疫 法 (ELISA ) 测定 标本 中 猪 弓形虫抗体 。用纯化的 猪 弓形虫抗原 包被微孔板,制成固相抗 原 , 可与样品中猪 弓形虫抗体相结合 , 经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后 再与HRP 标记的猪
:分别是竞争性蛋白质结合分析法[3]、放射性免疫分析法[4]和薄层色谱法[5]。在80年代,放射性免疫分析法得到了广泛的应用和改进,由于这种方法采用放射性核素标记,应用范围受到一定限制,为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性,进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒,这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应,所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗,毫无疑问,兔多抗在约四十年的cAMP,cGMP定量
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