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523
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博生产销*(代"售")的猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒价格厂家,是高品质的动物疫病ELISA检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒价格厂家
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:192次/盒
编号:SYA640
想要了解更多关于猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒价格厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·嗜水气单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA077
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·转基因植物35S启动子单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA276
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛支原体(mycoplasma)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA507
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对牛支原体特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR技术对牛支原体的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可以感染者的病原学诊断。
二、用途
本试剂盒用于检测气管分泌物拭子、肺组织等样本中的牛支原体(MB),用于牛支原体(MB)感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
MB反应液(MB-qPCR MIX) 1管 672μL/管
核酸提取液(DNA Extraction ) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
MB阳性对照(MB-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
病死或扑杀牛,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;病牛灭菌棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中。
6.2 样品前处理
组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 PCR扩增
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(MB-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(MB-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(MB-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线,表明MB核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明MB核酸阴性。
(3) 如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行MB核酸检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明MB核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒价格厂家关键词:猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒,SYA640,百奥莱博
·风疹病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA248
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·嗜肺军团菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA045
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·登革热病毒Ⅱ型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA226
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·沙门菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA058
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·小肠结肠炎耶尔森菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA065
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA409
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规格:48次/盒|96次/盒
·驴源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号:SYA306
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肠出血型大肠杆菌EHEC O104/H4双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA105
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪细小病毒抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA637
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·黄热病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA229
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA087
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的肠出血性大肠杆菌溶血素基因,用于肠出血性大肠杆菌溶血素基因的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
本试剂盒用一对肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| Hly反应液(Hly-qPCR MIX) | 1管 | 960μL/管 |
| 核酸提取液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(EnzymHly MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 250μL/管 |
| Hly阳性对照(Hly-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集及处理:
1.水样便取0.5-1mL;疑似污染的食物取1g。
2.水样便13000rpm离心2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;疑似污染的水直接取100μL。
二、DNA提取:
对上述处理好的样本加入等体积的核酸提取液(固体标本加入50uL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Hly-qPCR MIX)、酶混合液(EnzymHlyMIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 20µL | N×20µL |
| 酶混合液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 21µL | N×21µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Hly-PTC)4μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 预变性 | 1循环 | 94℃ for 2 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 94℃ for 15 sec 55℃ for 30 sec |
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(Hly-PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,且有明显的指数增长曲线,表明肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)核酸阴性。
➤如果35<Ct值,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明肠出血性大肠杆菌溶血素(Hly)核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒价格厂家关键词:猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒,SYA640,百奥莱博
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猪弓形虫抗体 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中 弓形虫抗体 。 实验原理 : 本试剂盒 采 用双抗 原 夹心 酶联免疫 法 (ELISA ) 测定 标本 中 猪 弓形虫抗体 。用纯化的 猪 弓形虫抗原 包被微孔板,制成固相抗 原 , 可与样品中猪 弓形虫抗体相结合 , 经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后 再与HRP 标记的猪
:分别是竞争性蛋白质结合分析法[3]、放射性免疫分析法[4]和薄层色谱法[5]。在80年代,放射性免疫分析法得到了广泛的应用和改进,由于这种方法采用放射性核素标记,应用范围受到一定限制,为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性,进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒,这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应,所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗,毫无疑问,兔多抗在约四十年的cAMP,cGMP定量
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