北京现货一站式DNA尿素-PAGE电泳套装批发

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货一站式DNA尿素-PAGE电泳套装批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货一站式DNA尿素-PAGE电泳套装批发
品牌：百奥莱博
英文名：One-Stop DNA Urea-PAGE Pack
规格：30次
产地：国产|进口
本品是专门用于DNA 尿素-PAGE电泳的一站式试剂盒。

产品特点：
1.一站式，即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。用户不需要单独准备各种成分。
2.可用于DNA 测序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保护实验等。
3. 安全，免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
4.电泳后可直接用于银染、EB染色等实验。

产品组成：

 

成分	规格	保存
电泳级尿素	210g	常温
电泳级丙*(代"烯")酰胺	77.34g	常温
电泳级甲叉双丙*(代"烯")酰胺	2.67g	常温
10×TBE电泳液	250ml	常温
电泳级TEMED	1.5ml	4℃，避光
电泳级过硫*(代"酸")铵	1g	常温
2×尿素-PAGE上样液	1ml	-20℃
说明书	1份

储存条件：常温运输，保存条件见上表，有效期一年。

使用方法：

一、PAGE浓度和交联度的选择指南
尿素-PAGE一般推荐用29：1(丙*(代"烯")酰胺：甲叉双丙*(代"烯")酰胺)的交联度，
在此条件下，DNA片段和最适PAGE浓度对应关系如下：

单链DNA长度	最佳PAGE浓度	二甲*青FF迁移率 对应的长度	*酚蓝的迁移率 对应的长度
50-400nt	8%	160nt	45nt
200-1000nt	5%	260nt	65nt
750-2000nt	3.5%	460nt	100nt

二、制备尿素-PAGE胶
1. 配制尿素-PAGE胶(这是配制100mL胶的用量，配制更大体积的胶则需以此用量为基础按比例增加)
A：新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：按每0.1 克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL超纯水的比例将水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中，摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B：新鲜交联度为29:1的40%的丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(AB溶液，下同)：在装有77.34 g电泳级丙*(代"烯")酰胺干粉的瓶中加入约120mL自备的去离子水，然后将全部甲叉双丙*(代"烯")酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙*(代"烯")酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有毒粉末飘出。甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶解度低，不会溶解在这少量溶液中)。充分摇晃混匀后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
C：配尿素-PAGE胶：在一个250mL的三角瓶中，先按下表的用量加入去离子水、40%AB溶液和10×TBE缓冲液。丙*(代"烯")酰胺单体溶液具有神经毒性，一定要戴手套操作。

PAGE胶浓度	各成分用量(尿素为克，其余单位是mL)			补水到(mL)
	尿素	40%AB溶液	10×TBE缓冲液
5%	42	12.5	5.0	100
6%	42	15.0	5.0	100
7%	42	17.5	5.0	100
8%	42	20.0	5.0	100
9%	42	22.5	5.0	100
10%	42	25.0	5.0	100
11%	42	27.5	5.0	100
12%	42	30.0	5.0	100

D：搅拌溶解，然后用滤纸过滤。最好能抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应)，无条件也可以不脱氧。
E：加入500μL 10%APS和100μL TEMED，迅速摇匀后倒胶。
F:在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶，插入梳子。
G:室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
H: 拔出梳子，用0.5×TEB液冲洗加样孔。

三、样品准备
2. 对一般样品、测序样品、微卫星DNA、AFLP样品、DDRT样品、RPA样品：将样品跟上样液1:1 混合，95℃ 3分钟变性，然后放冰上待用。
3. 对TGGE样品：可以直接上样。

四：电泳
4. 将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽中加入足够0.5×TEB电泳液。
5.预电泳5-30分钟将冰上放置的样品上样。
6.连接电源线，打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热，这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压，产热都将随电泳时间而变化，不好控制)。对小胶一般用5-6W 固定功率，大胶用15-25W 固定功率。
7. 终止电泳，取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意：如果银染，必须延长固定时间以便让洗出尿素，否则残留尿素会干扰后面的银染。

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·DNA marker(pBR322/BstN I)
编号：BTN90602G
英文名称：DNA ladder(pBR322/BstN I)
规格：50次
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。


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·银染清除剂
编号：BTN100603
英文名称：Silver Stain Scavenger
规格：30次
银染是目前最灵敏的非同位素蛋白质和核酸染色技术，对银染后的条带进行原位酶切(in-gel digestion)和后续MS分析是蛋白组学研究的重要手段。大量研究表明如果预先对银染条带进行去除银粒子的处理，则原位酶切更加有效，MS灵敏度更高。目前最常用的脱银粒子清除方法(如铁*酸*/硫代硫*(代"酸")*法、硫*(代"酸")铜/硫代硫*(代"酸")*法)的主要缺点是引入的金属离子会影响后续反应、有的成分还有毒性(如铁*酸*)、工作液极不稳定。为克服这些缺点，本公司开发了无毒环保的新型银粒子清除剂。

产品特点：
1．高效，5分钟处理即可清除PAGE胶中银染留下的银粒子。
2．成分不含金属离子，跟原位酶切和质谱分析(包括MALDI-TOEMS)等后续反应高度兼容，脱银后PAGE胶还可以再次银染或考染。
3．成分无毒环保，保障研究人员和环境的安全。
4．既可用于蛋白质银染后的脱银，也可用于核酸银染后的脱银。
5．即开即用，使用非常方便，不需要配制各种溶液。

产品组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1．银染后，切下含所需蛋白条带的PAGE胶条用自备的去离子水摇晃浸泡2次，每次5分钟以去除电泳缓冲液。注意：不要使用整块PAGE胶。
2．用干净镊子将胶条转移到5-10mL的容器中(如5mL的塑料管或10mL的细菌培养管)，加入1mL溶液A，摇晃5分钟。
3．直接在上步的管子中再加入3.3mL溶液B，继续摇晃直到染色脱去(一般需要约20分钟)。
4．取出脱色后的胶条，在去离子水中摇晃浸泡二次，每次5分钟。
5．胶条可以直接用于后续的再染色或质谱分析(需要先甲*(代"酸")酸化和脱水处理)。

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