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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")RFT027型λDNA/HindIII+EcoRI(564~21226bp)北京现货促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:RFT027型λDNA/HindIII+EcoRI(564~21226bp)北京现货促销
编号:RFT027
规格:100次(2×25μg/2×250μl)
产地:国产|进口
本产品是由λDNA经HindIII和EcoRI完全双酶切而成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。产品浓度为0.1μg/μl,已含有1×loading buffer,可直接取2-5μl上样,使用方便。12条带的大小分别为564,831,947,1375,1584,1904,2027,3530,4268,4973,5148,21226bp。
使用方法:
1.65℃加热5分钟,立即冰浴3分钟,取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注:根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8-10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间45分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. λ DNA酶切Marker的末端容易由COS末端结合在一起,电泳前65℃预热5分钟能解开结合的COS末端,得到更清晰的电泳图像。如果不预热,21226bp和3530bp会结合形成24756bp的额外片段,同时电泳后3530bp亮度会明显弱于其他片段。
2. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
3. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
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RFT027型λDNA/HindIII+EcoRI(564~21226bp)北京现货促销关键词:λDNA/HindIII+EcoRI(564~21226bp),百奥莱博,RFT027
·RNase抑制剂
编号:RFT107
英文名称:RNase Inhibitor
规格:2000U|5×2000U
本RNase抑制剂是一种大肠杆菌表达的重组蛋白,可以通过非竞争性方式按1:1比例和RNase A、RNase B或RNase C结合,并抑制这三种酶的活性,保护RNA不被这三种酶降解。但本RNase Inhibitor不能抑制RNase I、T1、T2、H、U1、U2和CL3的酶活性。本品浓度为40U/μl
对于cDNA合成、体外转录、体外翻译等常见的反应体系中,为保护其中的RNA不被RNase降解,RNase Inhibitor推荐用量为最终浓度1-2U/μl。
特点:不含DNA内切酶和外切酶,用于各种RNA相关反应,防止RNase的污染。
用途:用于cDNA合成,体外转录,体外翻译,以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解;还可用于特定RNase活性的鉴定等。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为人类胎盘中编码该酶的基因。
分子量:约49.6 kDa(单体)。
活性定义:将能够抑制5ng RNase A的50% 活性的酶量定义为一个活性单位。
活性检测条件:100mMTris-HCl (pH7.5),1.2mMEDTA,0.1mg/ml BSA,100ng/ml RNase A,0.1mg/ml E.coli [3H]-RNA,50mg/ml yeast RNA,8mMDTT。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
储存溶液:20mM HEPES-NaOH (pH7.5),50mM NaCl,8mM DTT,0.5mM Detergent,50% (v/v) glycerol。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
·考马斯亮蓝快速染色液
编号:RFT054
英文名称:Commassie Blue Fast Staining Solution
规格:500ml
本考马斯亮蓝快速染色液是以考马斯亮蓝G-250为主要成分,采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的快速染色。由于配方中不含甲醇、乙酸等物质,因此在整个染色过程中清洁、安全,并且用水即可脱色。整个染色脱色过程只需30分钟左右即可得到清晰可见的结果,灵敏度高,可见10ng蛋白带。
用前必读:
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
使用方法:
1、漂洗:
将电泳后的PAGE胶取下放入微波炉专用塑料容器中,加入适量超纯水(以刚刚覆盖过胶面为适),微波炉中高火(700-800瓦)加热,至溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤2-3次;弃尽水溶液。
2、染色:
加入适量染色液(用量根据凝胶面积的大小及容器大小而定,以浸没胶面为准),放入微波炉中高火(700-800瓦)加热,溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤数次,直至蛋白条带清晰可见时即可停止加热;弃去染色液(收集到备用容器中,可以反复利用1-2次)。
注:
a.此步骤是染色的关键步骤,染色停止的标准是-条带清晰可见。如由于挥发导致染色液减少,可适当补加染色液。
b.如使用1.0mm或更厚的凝胶,染色煮沸时间会相应延长。
3、脱色:
加入适量超纯水(以刚刚覆盖过胶面为适),放入微波炉中高火(700-800瓦)加热,至溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤1-2次,此时PAGE胶的蓝色背景应已去除。
4、保存:
弃去水溶液,加入适量超纯水,观察和保存染色结果。
注意事项:
1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长各步骤的时间。
2、对于SDS-PAGE胶,步骤1的漂洗非常重要,因为残余的SDS会严重影响后续的染色;而对于不含SDS的非变性胶的染色,可以省略步骤1。
3、本染色液可以重复利用1-2次,敏感性没有明显下降。
4、本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。
储存条件:室温,有效期2年。
RFT027型λDNA/HindIII+EcoRI(564~21226bp)北京现货促销关键词:λDNA/HindIII+EcoRI(564~21226bp),百奥莱博,RFT027
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文献和实验CGGGATCCCG的酶切效率高达90%。其它酶的具体情况可以查NEW ENGLAND BioLabs的目录。按new england biolab的介绍,hindIII切割的时间较长,如果,直接切pcr产物再连接有时效率不高,导致转化效率低。如果有条件的话,可以先做at克隆,再酶切。TaKaRa的产品目录的A部分里有关于双酶切所用buffer的详细说明,最好依照执行。PCR反应后,是否可以直接用来酶切,而不需要从凝胶上回收后再酶切!酶切后直接在4%琼脂糖凝胶上电泳分型,有四种片段91,83,72,48BP,想用
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