北京现货柱式真菌DNA提取试剂盒供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货柱式真菌DNA提取试剂盒供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货柱式真菌DNA提取试剂盒供应
英文名：Fungus DNA Column extraction kit
产地：国产|进口
规格：50次
品牌：百奥莱博
本试剂盒是真菌DNA提取试剂盒的柱式升级产品，能够破裂各种真菌坚硬的外壳，同时使用硅胶膜DNA 纯化技术，得到的DNA适用于各种后续实验。

试剂盒特点：
1. DNA 纯净，OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 操作简单，整个过程约15分钟，比大多数同类产品短。
3. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
4.液体培养物处理量在0.1-3mL之间，真菌菌丝、孢子、子实体的处理量在0.1-0.5g之间。
5. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 称取0.1-0.5g 湿的真菌菌丝、孢子、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
 注意：最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为DNA 会吸附在表面，影响得率。如果菌丝或子实体等已经十分干燥，则使用量最好比上面推荐的使用量低5-10倍；如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA，则需要先去除红细胞等成份，具体方法请参考相关文献和相关产品的使用说明书，如红细胞裂解液)。
2.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀，需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
3. 65℃保温5-30分钟，其间最好吹打混匀2-3次。
4. 12000～15000g室温离心3分钟。
5. 将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色混浊状。
7. 将其置于冰浴中放置5-10分钟。
8. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
9. 加入0.2mL的*仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
10. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清到新1.5-5mL塑料离心管中。注意：由于下一步要加1.5倍体积的溶液C，所以新的离心管的体积要足够大。
11. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀，然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。
12. 每次转移0.7-0.8mL 混合液后，室温放置5-10分钟。
13. 12000～15000g室温1分钟，弃穿透液。
14. 对需要多次上柱的样品，可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中，重复第12-14 步的操作。
15. 将0.7mL 通用洗柱液加入离心柱，室温离心1分钟，弃穿透液。
16.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000～15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤)。
17. 空甩1分钟去除残留液体。
18. 将离心柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μL通用洗脱液。
19.室温放置5分钟后离心1分钟，管底即为真菌DNA溶液，可立即使用，也可长期保存在－20℃。
20.可以重复上步一次，以洗脱更多的DNA。

北京现货柱式真菌DNA提取试剂盒供应正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)
编号：BTN120404
英文名称：Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
规格：500U
牛小肠碱性磷酸酶与E.coli来源的碱性磷酸酶相同，催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解，对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于CIAP处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端，因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。

产品用途：
1．去除载体DNA片段的5´-末端的磷酸基；
2．防止克隆载体的自连接；
3．蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化；
4．为5´末端标记准备模板。

产品组成：

成份	规格
CIAP(10～30U/μl)	500U
10×CIAP Buffer	0.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在37℃、pH9.8的条件下，1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。

纯度：
1．30 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．30 U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3．18 U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

使用举例：
1．在微量离心管中配制50μL反应体系：

成分	加入量
DNA Fragment in TE Buffer	1～20pmol
10×CIAP Buffer	5μl
CIAP(10～30units/μl)	1-2μl
补水到	50μl

2．37℃或50℃反应30分钟。或者先37℃反应15分钟，再50℃反应15分钟。注意：单链DNA和具有5´突出末端的DNA在较低温度下(如37℃)即可去磷酸化，而具有3´突出末端的DNA或平末端DNA需要较高温度(如50℃)才能去磷酸化。
3．*酚/*仿/异戊醇(25:24:1)抽提2次。注意：如果早在*酚抽提之前，用自备的蛋白酶K降解CIAP酶，则效果更好。具体做法是：加入EDTA和SDS使其终浓度为5mM EDTA和0.5% SDS，最后加入蛋白酶K溶液，使其终浓度为50μg/mL，然后56℃处理30分钟，再75℃孵育10分钟。然后用于*酚/*仿/异戊醇抽提。
4．*仿/异戊醇(24:1)抽提1次。
5．添加2.5μl的3M NaCl(终浓度150mM)。
6．添加125μl的(2.5倍量)冷乙醇，在-20℃下放置30～60分钟。
7．13000g离心20分钟后，小心去上清。
8．用1mL 75%乙醇洗涤一次。
9．干甩数秒，小心吸弃上清。
10．用20μl以下的TE Buffer溶解DNA沉淀待用或放-20℃长期放置。


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