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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
242
- 英文名:
AP-Avidin
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
AP标记亲和素品牌是高品质的蛋白质研究产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多AP标记亲和素等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:AP标记亲和素品牌
规格:100mg
编号:BTN131087
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本产品为碱性磷酸酶标记的亲和素,SDS-PAGE检测均一性。每mol亲和素含有大约1mol碱性磷酸酶。
产品应用:
1.在内源过氧化物酶会对实验造成影响的免疫组化中使用;
2.免疫印记;
3.酶联免疫吸附试验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性单位定义:1单位表示在37℃,pH9.5情况下,每分钟从对硝基酚磷酸盐释放1.0μmol对硝基酚。
除AP标记亲和素品牌外,我公司正在打折促销以下产品:
·大肠杆菌Tuner(DE)plysS感受态细胞
编号:BTN130564
英文名称:E.coli Tuner(DE)plysS Rosetta Competent Cell
规格:0.1mL*10
Tuner(DE3)plysS是的Tuner(DE3)衍生菌株,为高度严紧表达宿主菌,用于毒性蛋白表达,lac 透性酶突变,可以精细控制表达水平。抗性为*霉素(34μg/ml)。
基因型:F–ompT hsdSB(rB– mB–)gal dcm lacY1(DE3)plysS(CmR)
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
·一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装
编号:BTN80810
英文名称:One-Stop SDS-PAGE Pack
规格:30次
SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法,但是单独配制各种溶液十分繁琐,为此我们公司开发了本产品。
产品特点:
1.一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
2.安全,将实验人员接触粉末状丙*(代"烯")酰胺的可能降到最低。
3.灵活,分开提供的丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺便于配制各种比例和浓度的SDS-PAGE,满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4.使用改良的浓缩胶缓冲液,由于其含有染料,制备的浓缩胶呈蓝色,便于上样时识别加样孔。
5.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 丙*(代"烯")酰胺干粉 | 60g |
| 甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉 | 3g |
| 分离胶缓冲液,4× | 200ml |
| 浓缩胶缓冲液,4×(含染料) | 100ml |
| TEMED | 1.5ml |
| 过硫*(代"酸")铵(干粉) | 1g |
| SDS-PAGE上样液,5× | 1套(1mL) |
| SDS-PAGE电泳液,1×(干粉) | 1套(20L) |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但TEMED和5×SDS-PAGE上样液需低温运输,分别在4℃和-20℃有效期一年。
自备试剂:去离子水。
使用方法:
1.第一次使用本产品时需先配制30%丙*(代"烯")酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水,充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2.第一次使用本产品时还需配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液(30% AB溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*(代"烯")酰胺。对SDS-PAGE电泳,丙*(代"烯")酰胺与甲叉双丙*(代"烯")酰胺比例一般在19:1左右,因为此时PAGE胶的孔径最小,分辨率最高。制备方法是将3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*(代"烯")酰胺溶液中(注意:甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉有神经毒性,避免吸入粉末)。配好的30%AB溶液最好4℃避光保存并在1月内用完。
3.根据平板的面积和胶的厚度估计需要配制的浓缩胶和分离胶的体积。并根据要分离的蛋白质的大小确定选择浓缩胶和分离胶的浓度,参考下表:
| 蛋白质大小范围(kD) | 最佳浓缩胶浓度 | 最佳分离胶浓度 |
| 15-45 | 4% | 15% |
| 15-60 | 4% | 12.5% |
| 18-75 | 4% | 10% |
| 30-120 | 4% | 7.5% |
| 60-200 | 不需要 | 5% |
注:如果上样体积少于10μL,可以不需要浓缩胶。
4.配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):称0.1克过APS干粉到1mL去离子水中,摇晃溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
5.配制分离胶:在一个25mL的三角瓶中,先按下表的用量加入水、30%AB溶液和4×分离胶缓冲液。以下是配制10mL胶的用量,更大体积则各成分用量需按比例增加。丙*(代"烯")酰胺溶液有神经毒性,一定要戴手套操作。
| 胶浓度 | 用量(单位:mL) | ||
| 水 | 30%AB溶液 | 4×分离胶配胶液 | |
| 5% | 5.83 | 1.67 | 2.50 |
| 6% | 5.50 | 2.00 | 2.50 |
| 7% | 5.17 | 2.33 | 2.50 |
| 7.5% | 5.00 | 2.50 | 2.50 |
| 8% | 4.83 | 2.67 | 2.50 |
| 9% | 4.50 | 3.00 | 2.50 |
| 10% | 4.17 | 3.33 | 2.50 |
| 11% | 3.83 | 3.67 | 2.50 |
| 12% | 3.50 | 4.00 | 2.50 |
| 13% | 3.17 | 4.33 | 2.50 |
| 14% | 2.83 | 4.67 | 2.50 |
| 15% | 2.50 | 5.00 | 2.50 |
| 16% | 2.17 | 5.33 | 2.50 |
6.配制浓缩胶(一般使用4%的浓度):在一个25mL的三角瓶中,先按下表的用量加入水、30%A B溶液和4×浓缩胶缓冲液。以下是配制10mL 4%浓缩胶的用量,丙*(代"烯")酰胺溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
| 胶浓度 | 用量(mL) | ||
| 水 | 30%AB溶液 | 4×浓缩胶缓冲液(含蓝色染料) | |
| 4% | 6.17 | 1.33 | 2.50 |
7.将分离胶和浓缩胶溶液摇晃混匀,抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
8.分别加入50μL 10%APS和30-50μL TEMED(这是配制10mL分离胶和浓缩胶的用量,更大体积的胶则用量需按比例增加),迅速摇匀。
9.先灌分离胶,在胶的液面距离顶部1.5 cm的时候,停止灌胶。
10.由于分离胶比重较大,可以立即在上面灌浓缩胶,但灌注时必须小心,不要破坏分离胶和浓缩胶的液面,在浓缩胶液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子,室温聚合30-60分钟。如果不能做到小心灌浓缩胶,则必须待分离胶室温聚合30-60分钟后再灌制。
11.拔出梳子,用1×SDS-PAGE电泳液冲洗加样孔。
12.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够的1×SDS-PAGE电泳液。本产品提供20升的SDS-PAGE电泳液干粉,将所有干粉溶解在2 L水中即得10×SDS-PAGE电泳液,用时再稀释成1×工作液。
13.在蛋白质样品中加入5×SDS-PAGE上样液(4μL样品中加1μL上样液),100℃煮沸3~5分钟。短暂离心,取上清上样。
14.先用10 mA的电流电泳(对0.75mm厚×14cm×14cm的胶)直到染料进入从浓缩胶进入分离胶。
15.将电流增加到15 mA,直到染料进入分离胶底部时终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理。
AP标记亲和素品牌关键词:BTN131087,AP-Avidin,AP标记亲和素
(不需DNA酶消化)"
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AP标记亲和素品牌关键词:BTN131087,AP-Avidin,AP标记亲和素
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