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生物素化的β-半乳糖苷酶供应

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月14日
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      550

    • 英文名

      Biotin-β-Galctosidase

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      低温运输,-20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应生物素化的β-半乳糖苷酶供应,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:生物素化的β-半乳糖苷酶供应
    品牌:百奥莱博
    规格:100U
    产地:国产|进口
    编号:BTN131097
    本产品为生物素标记的β-半乳糖苷酶,在免疫组化和免疫印迹应用中与ONPG一起使用。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    活性单位定义:一个单位等于每分钟在37℃,pH7.3时水解1μmol ONPG。

    关于生物素化的β-半乳糖苷酶供应的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:

    ·大肠杆菌T1化学感受态细胞
    编号:BTN140391
    英文名称:E.coli T1 Chemical Competent Cell
    规格:0.1mL*10
     本产品是采用大肠杆菌Mach1-T1 Phage Resistant菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。

    产品特点:
    1. 本感受态细胞是目前生长速度最快的感受态细胞,在*苄青霉素平板上,8-9h可见克隆;用于蓝、白斑筛选,12 h可见蓝斑;将过夜培养的单克隆在2ml的LB培养基中培养4-5h即可进行小量质粒提取。
    2.适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,减少克隆DNA同源重组的发生,提高质粒DNA的产量和质量。
    3. 本产品具有T1,T5噬菌体抗性。
    4. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达109cfu/μg。

    菌株基因型:F- φ80(lac Z)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rkmk+)ΔrecA1398 endA1 tonA

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。

    使用方法:
    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
    以下实验以50μl感受态细胞为例。
    2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
    3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
    4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

    注意事项:
    1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
    3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


    生物素化的β-半乳糖苷酶供应关键词:Biotin-β-Galctosidase,生物素化的β-半乳糖苷酶,BTN131097


    ·Southern级真菌DNA提取试剂盒
    编号:BTN130943
    英文名称:Fungus DNA extraction kit(Southern Grade)
    规格:10次

    ·柱式白色念球菌RNA提取试剂盒
    编号:BTN130847
    英文名称:Candida albicans RNA Column extraction kit
    规格:50次

    ·1×TBS(含5%BSA,0.1%Tween20溶液)
    编号:BTN160697
    英文名称:Candida albicans RNA Column extraction kit
    规格:250mL
    Tris缓冲盐溶液简称TBS,属于常规pH缓冲液,常用于清洗Western Blot中蛋白印迹膜或者配制封闭液,是常用分子生物学试剂。在TBS的基础上加入一定比例的Tween 20,能够大大增强TBS的洗涤作用。本产品主要成分为1*TBS、0.1%Tween20和5%BSA,可作为封闭液的基础试剂。

    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    ·10%Sarkosyl溶液(DNA级)
    编号:BTN100914
    英文名称:Candida albicans RNA Column extraction kit
    规格:250mL
    Tris缓冲盐溶液简称TBS,属于常规pH缓冲液,常用于清洗Western Blot中蛋白印迹膜或者配制封闭液,是常用分子生物学试剂。在TBS的基础上加入一定比例的Tween 20,能够大大增强TBS的洗涤作用。本产品主要成分为1*TBS、0.1%Tween20和5%BSA,可作为封闭液的基础试剂。

    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    ·琼脂糖
    编号:BTN81105
    英文名称:Agarose
    规格:100g
    琼脂糖电泳是核酸分析的最重要的方法之一,本产品可以满足大部分常规核酸电泳的要求,包括PCR电泳、质粒电泳、RNA电泳等等。产品透明度好,溶解快,胶液清澈透明;强度高,保证凝胶的强度与弹性,即使是低浓度的凝胶也不易发生破碎。低电内渗,减少对电泳质迁物迁移与分离的影响。极低的背景,没有其它荧光物质干扰,泳带与背景黑白分明,拍摄的图片效果好。没有核酸酶和蛋白酶污染。

    储存条件:常温运输及保存。有效期两年。

    ·n-十二烷基β-D-麦芽糖苷
    编号:BTN131046
    英文名称:n-Dodecyl-β-D-Maltoside
    规格:1g
    本产品用于溶解膜蛋白并保持其活性。HPLC测定其纯度>99%。低紫外吸收(1%溶液的A280<0.04)。与其他的去垢剂相比能够更好地保持溶解后膜蛋白的活性。
    n-十二烷基β-D-麦芽糖苷分子结构式

    储存条件:常温运输和保存,有效期一年。


    生物素化的β-半乳糖苷酶供应关键词:Biotin-β-Galctosidase,生物素化的β-半乳糖苷酶,BTN131097


    ·Orth固定液
    编号:BTN140411
    英文名称:Orth Fixative Solution
    规格:250mL
    该固定液固定组织较缓慢,不适合作为临床的活检固定液,4毫米厚的组织固定时间需36-72小时,该液对于染色质的固定好,显示清晰,但可溶解部分红细胞和含铁血黄素。

    该固定液不能沉淀蛋白质,它必须和醋酸配成混合固定液。它不能长期固定组织,经它固定的组织应充分水洗后保存于80%酒精中。

    储存条件:常温运输和保存,有效期一年。

    ·沉淀型TMB显色试剂盒
    编号:BTN101106
    英文名称:Precipitated TMB Chromogenic Kit
    规格:100mL
    TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方,辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物,适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学,以及原位杂交染色等。即开即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。

    产品特点:
    1.相对于DAB来说,灵敏度高。
    2.色泽稳定,无须避光显色。
    3.色带为蓝色,便于观察。
    4.无毒环保,可以放心使用。

    产品组成:

     
    成分 规格
    溶液A 100ml
    溶液B 100ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。

    使用方法:

    一、免疫印迹染色
    1.准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
    2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
    3.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2-5分钟,直至深蓝色沉淀出现。
    4.用镊子夹起固相膜,放入去离子水中清洗。
    5.空气中晾干。
    6.拍照记录。

    二、免疫化学染色
    1.准备好含有待测蛋白的组织切片:包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
    2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
    3.室温下,小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
    4.室温下孵育5-10分钟,或直至样本出现深蓝色。
    5.小心移去切片上显色工作液。
    6.室温下,小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
    7.小心移去切片上的PBS缓冲液。
    8.放上盖玻片或封片。
    9.(选择步骤)进行甲基绿复染。
    10.立即在一般光学显微镜下观察:阳性呈现深蓝色。

    注意事项:
    1.加入1滴溶液A和1滴溶液B,可按比例增减
    2.如果封闭欠佳,易造成背景颜色过深
    3.固相膜显色后数小时将会褪色,不能永久存在。
    4.该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
    5.染色后可用甲基绿或苏木素复染,增强对照。

    疑难解答:
    Q:在ELISA底物反应过程中,为何有些孔呈蓝色,而另外的孔呈蓝绿色?
    A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象,不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的,建议降低二抗的浓度。
    Q:ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀?
    A:HRP浓度过高,建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
    Q:如何降低背景读数?
    A:建议降低一抗或二抗浓度,延长封闭时间。



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    • MHC-I单体的生物素化

      Leupeptin,终浓度为1ug/ml       ⑤Pepstatin,终浓度为1uM       ⑥15ul  BirA酶, 终浓度为0.1uM         2. 室温下孵育过夜。         3. 将上述生物素化反应液置低温离心机中,用最大速度离心以去除沉淀。

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      本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。 NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应) 0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液,pH 8.0 双蒸水(注意去除游离氨基),用以配制碳酸氢钠缓冲液或硼酸缓冲液 DMSO(二甲亚砜,有毒试剂) 1 mol/L NH4Cl 叠氮钠(有毒试剂) PBS

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