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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
919
- 英文名:
RNA Loading Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输,4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应三合一RNA上样液(A型,6X)哪里买,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:三合一RNA上样液(A型,6X)哪里买
规格:1.5mL
品牌:百奥莱博
英文名:RNA Loading Buffer
产地:国产|进口
本品是集RNA变性RNA、上样、RNA染色三种功能于一体的即用型溶液。
产品特点:
1.能提高RNA上样速度,免去繁琐的准备步骤,减少污染。
2.其含有的RNase抑制剂能抑制RNA样品中残留RNase的活性,保证电泳过程中RNA的完整性。
3.所含甘油和染料(仅BTN3130A含EB染料),便于直接上样和UV观察RNA电泳条带,免去染色和脱色过程。
4.本产品与DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2完全兼容。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 三合一RNA上样液 | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
本产品为红色液体,含红色的EB(*化乙锭),有致癌性,避免用手直接接触。
另一红色电泳示踪剂的电泳速度相当于50nt的RNA。
储存条件:常温运输,4℃(短期)或-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 按1:1-1:3的比例将RNA样品与RNA上样液混合(如5μL RNA+15μL RNA上样液)。
2. 65-85℃水浴保温10分钟,。
3. 冰浴5分钟后即可直接上样电泳。
注:本产品含EB,所以琼脂糖凝胶中可以不必再加EB。本产品与甲醛琼脂糖变性凝胶或用DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2配制的非变性琼脂糖变性凝胶兼容。
4.电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果,RNA 条带成红色。
疑难解答:
Q:为何RNA样品在甲醛变性胶中的电泳效果比普通非变性胶差?
A:这是因为在非变性胶中,即使内部有切口的RNA分子(实际已经是两条RNA分子)也会通过形成发夹结构而跟完整的分子等速电泳,而在变性胶中,完整RNA分子和内部有切口的RNA分子将以不同的速度泳动,所以变性胶看起来效果不好是反应了真实情况,非变性胶看起来好只是一种假象。要求严格的实验(如CDNA文库构建)最好还是使用甲醛变性胶判断RNA的质量好坏。
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·酵母化学感受态细胞制备试剂盒(B型)
编号:BTN81109B
英文名称:Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
规格:20次
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品。
产品特点:
1.一次制备,-80℃保存,多次使用,免去每次转化都要制备酿酒酵母感受态细胞。
2. 操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需要30分钟
3. 主要用于酿酒酵母S. cerevisiae,也适用于其他多种实验用酵母菌株,包括S. pombe、C. albicans、Pichia pastoris等。
4. 受体酵母可以不含质粒,也可用于携带有选择性质粒的酵母。
5. 对酿酒酵母,最高转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。对其他酵母,效率稍低,范围在100-2000个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变(Site-Directed Mutagenesis)、基因破坏(Gene Disruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。
8. 本产品可以制备20 只酵母感受态细胞(需要200mL 酵母培养液),其中A型只用于制备感受态细胞,B型还带高效转化液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
产品组成:
| 成分 | 20T(A) | 20T(B) |
| 制备液A | 120ml | 120ml |
| 制备液B | 6ml | 6ml |
| 制备液C | 10ml | 10ml |
| 转化液A | 无 | 30ml |
| 转化液B | 无 | 30ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
自备试剂:YPD培养基
使用方法:
一:酵母化学感受态细胞的制备
说明:按本方法制备1 管酵母化学感受态细胞就需要OD600达到0.6-1.0的新鲜酵母培养液10mL,用户需根据所需酵母感受态细胞的数量决定培养细胞的体积。如果超过10mL,则制备液的使用量需要按比例增加。
1. 挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以),接种到装在50mL离心管中的10mL的自备的YPD培养基中。
2. 30℃摇晃培养,摇床速度250rpm/分钟,直到OD600达到0.6-1.0(相当于0.6-1×107细胞/mL)。
3.室温3000rpm离心5 min,弃上清得酵母细胞沉淀。
4. 新鲜制备适量的酵母感受态制备工作液。对10mL 酵母需要5.25mL的工作液,其配制方法是:将4.75mL 制备液A、0.25mL 制备液B和0.25mL 制备液C 加入到一个无菌的离心管中后充分震荡混匀即可。酵母感受态制备工作液可放室温待用。
5. 用0.5倍体积的新鲜配制的酵母感受态制备工作液洗涤酵母细胞沉淀一次(对10mL 酵母则需要5mL 酵母感受态制备工作液)。即混合后振荡1分钟,室温3000rpm离心3分钟,去上清得洗涤后的酵母细胞沉淀。
6. 再用0.02倍体积的酵母感受态制备工作液充分重悬菌体(对10mL酵母,则需要0.2mL 酵母感受态制备工作液)。
7. 按每管0.2mL 分装到冷冻管中,放入保温冰盒中冷却半小时后再放入-80℃冰箱待用。0.2mL的感受态细胞足够1次转化使用。注意:放入保温冰盒的目的是使温度缓慢下降,急冻将使转化效率降低,这点跟大肠杆菌感受态制备过程不同。
二:化学转化酵母感受态细胞(只有B型提供相关试剂)
1. 将总体积不超过20μl的0.1-5μg质粒DNA 加到刚从-80℃冰箱取出的、还处于凝固状态的0.2mL 酵母感受态细胞上。注意:最好同时做一个不加质粒DNA的阴性对照组。
2.室温充分振荡直到凝固的感受态细胞完全融化。注意:此步非常关键,如果能在恒温振荡器上37℃振荡5分钟,则效果更好。
3. 加入1.4mL转化液A,轻柔颠倒混匀一分钟。
4. 30℃培养1小时。
5.室温3000g离心5秒,弃上清。
6.在酵母细胞沉淀中加1.0mL转化液B,振荡一分钟。
7.室温3000g离心5秒,弃上清。
8.在酵母沉淀细胞中加入适量(如100μl)的转化液B,混匀后在在选择培养基上全部涂盘。
9. 30℃培养3-5 天后即得酵母转化菌落。
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