柱式真菌RNA大量提取试剂盒品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

柱式真菌RNA大量提取试剂盒品牌的品牌：百奥莱博，是优质的RNA纯化产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多柱式真菌RNA大量提取试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：柱式真菌RNA大量提取试剂盒品牌
英文名：Fungal RNA Column large-scale extraction kit
规格：5次
产地：国产|进口
编号：BTN80904
本试剂盒是在本公司柱式真菌RNA提取试剂盒(BTN80804)的大提升级产品，跟柱式真菌RNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1.样品处理量大，最多可以处理50mL液体培养物或2g菌丝体。
2. 操作简单快捷，整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Norther杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高，一般在20-70μg/mL 酵母培养物(约2.0 ×107个细胞)。
5. 非酶细胞破裂法，适用于各种形态的真菌和各个种属的真菌，包括Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pombe和Pichia pastoris等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
溶液D	30ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将50mL液体真菌培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。如果是菌丝体，则直接称取2 克放入50mL塑料离心管中。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意：溶液A存放时容易产生沉淀，如果有沉淀，用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3～5分钟，转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿，充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3～5分钟，转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(体积越10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D，充分混匀。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合，然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒，弃收集管中的穿透液，然后再加入后一批混合液，重复操作，直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤：将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤：一次洗涤一般足够去除杂质，但如果样品OD260/280 比值不高，可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中，加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA 完整性的电泳检测：
 注意：普通DNA上样液不含变性剂，更没经过去RNase处理，所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定：
 将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%；也不要稀释过度，使OD读数在仪器的有效范围之外，这样得到的OD 比值没有意义。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2，最好不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。

除柱式真菌RNA大量提取试剂盒品牌外，我公司正在打折促销以下产品：

·常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
编号：BTN51101
英文名称：Tranzol
规格：20次
本品能使各种常态的E.coli细胞直接用于快速转化实验，使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备，保存和运输等繁琐的事情而操心，大大地缩短了基因克隆实验的时间，提高使用者的工作效率。

产品特点：
1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。
2. 常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
3.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli菌种包括K12 系的DH5a和Tg1，B 系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM，pET和Clion系列等。
4.转化效率适中，使用10ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在10E5 到10E6 CFU/ug质粒之间),使用3-5μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
5. 单管快速操作，整个操作可以在一个1.5mL塑料离心管中进行，最短可以在三十分钟内完成，不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
6. 稳定性好，本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。
 

成分	规格
常态转化液	1ml
阳性对照(pGEM3或pUC19)10μL,1ng/μL	5T
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 标记无菌的1.5mL塑料离心管并加入1mL液体培养基(如SOC或LB)，每次转化试验最好加上阳性对照(用提供的pGEM3或其他质粒)和阴性对照(不加DNA)各一个。
2. 如果使用E.coli菌落,则直接用接种环,无菌牙签或无菌吸头从培养皿上挑取1-5个菌落(直径在3-5 mm之间)到每个离心管中，用移液枪轻柔吹打散开。如果使用甘油菌种保存液,则直接取50-100μl菌种液到1mL培养液中。如果使用单个菌落培养得到的新鲜培养液，则取1mL培养了3-4小时的菌液直接从第4步开始。
3. 37℃保温1小时(如果保温时间延长到3-4小时，可以提高转化效率一倍，但过长则转化效率又开始降低)。
4.室温10000rpm离心1分钟后小心移弃上清(液体培养基)，离心速度低于10000rpm则细菌沉淀易丢失。沉淀的细菌约芝麻或麦片大小为宜。细胞过多或过少都不好。
5. 短暂离心，用移液枪小心将残留的培养液(约50μl)吸出，否则残留培养基将会严重影响转化效率，故此步不能省略。
6. 加入50μl 冰浴的Clion转化液并小心将细胞吹打均匀。
7. 加DNA样品。在样品管中加入1-5μl连接反应液并轻柔吹打均匀；在阳性对照管中加入5 ng阳性质粒(没被酶切的载体，也可以使用常用的pGEM，pUC，pBR322等质粒)；在阴性对照管中加入连接反应的阴性对照，如果没有则不加入任何溶液或加入1-5μl无菌水。
8. 将上述离心管置于-20℃直到液体凝固为止(一般需要20分钟到1小时)，然后冰浴放置5-10分钟。
9.在每个离心管中加入1mL无抗菌素的SOC或LB培养液，混匀后置37℃水浴保温1小时以便让抗性基因表达,否则将没有转化子生长。
10. 将溶液充分吹打混匀后分别取30-200μl分别涂于含相关的抗菌素的培养盘上，剩余溶液最好留4℃待用。
11. 37℃ 16-24小时培养，阴性对照盘上不应有任何落菌，否则可以判断操作中有污染或培养基中抗菌素浓度不够。使用质粒转化的阳性对照100μl涂盘一般能有上千个菌落。连接样品转化所得菌落数将取决于连接反应效率等多种因素，100μl的涂盘一般有几十到几百个转化子。

使用效果：

左图是用10 ngClionG载体转化10个E.coli Tg1菌落后得到的转化子。右图是用3μL连接液(ClionB载体+1 Kb DNA片段,10μL反应体系)转化10个E.coli DE3菌落后37℃过夜保温得到的转化子。涂盘量均为200μL。


柱式真菌RNA大量提取试剂盒品牌关键词：Fungal RNA Column large-scale extraction kit,柱式真菌RNA大量提取试剂盒,BTN80904

HEPES溶液(pH7.2)  1mol/L 100ml
ARB10832 人抗角蛋白抗体(AKA)尿液中含量检测 Human anti-keRatin antibody,aka ELISA KIT
硼*(代"酸")盐溶液(0.1mol/L,pH8.5-10)   500ml
81-88-9 Rhodamine B 罗丹明B
溶葡球菌酶 Sodium iodoacetate 9011-93-2
BTN100835 胃蛋白酶抑制剂溶液 Pepstatin Solution
PP0401 超敏可逆蛋白染色试剂盒
二**(代"胺")磺酸* L-Phenylglycine methyl ester?HCl 6152-67-6
ARB11350 人类白细胞抗原G(HLA-G)Elisa方法检测 Human leukocyte antigen g,hla-g ELISA KIT
ARB11182 人空泡毒素相关蛋白A(VAcA)elisa检测说明书 Human vacuolating cytotoxin a,vaca ELISA KIT
总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(NBT核黄素比色法)   50T|100T
BL0609 琼脂糖凝胶6B Sepharose 6B
柱式真菌RNA大量提取试剂盒品牌关键词：Fungal RNA Column large-scale extraction kit,柱式真菌RNA大量提取试剂盒,BTN80904

中性福尔马林固定液(10%)   500ml|5L
对硝基*(代"*")基-α-D-吡喃葡萄糖苷 EDTA-FeNa 3767-28-0
ARB12258 大鼠血糖酶标法分析 
75881-23-1 阿利新蓝8GX Alcian Blue8GX
F030203 HRP标记小鼠抗人IgG Fab抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG Fab*HRP
PY02-329  改良麦康凯肉汤基础  250克  
BFD045 呕吐毒素快速检测试剂盒
ARB10003 人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)尿液中含量检测 Human 1,3-disphosphoglyceRate,1,3-dpg ELISA KIT
磷酸*缓冲液(pH5.8-8.0)  0.1mol/L|0.2mol/L|0.5mol/L 500ml
ARB11860 人糖连抗原153(CA153)定量分析 Human ca153   ELISA KIT
BTN130428 甲基化PCR 2.0试剂盒 Methylation-Specific PCR V2.0 Kit
D-Hanks平衡盐溶液(无酚红)  1×|5× 500ml
9000-91-3 β-Amylase β-淀粉酶
ARB14093 大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)酶标法分析 
J0317                       山羊抗兔IgG(H+L)抗血清                    
ARB13468 鸡免疫球蛋白A(IgA)Elisa定量检测 Chicken immunoglobulin a,IgA ELISA KIT
BTN101102 改良Lowry法蛋白定量试剂盒 Enhanced Lowry Assay Kit
DL-乳酸 FMOC-OSU 50-21-5

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